本文關鍵詞：應用腸神經(jīng)消融術建立功能性便秘大鼠動物模型

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【摘要】：功能性便秘是一種臨床常見的慢性疾病,病因未明,根據(jù)患者腸道動力、肛門直腸的功能狀態(tài)改變可將其分為3型:結腸慢傳輸型、排便功能障礙型(出口梗阻型)以及混合型便秘。美國、西班牙等歐美國家總體發(fā)病率高達6%-28%,其中50%的患者為混合型便秘,即同時存在結腸運輸功能減弱和直腸肛門功能障礙。目前,其發(fā)病病因、病理生理變化尚不完全明確,同時缺乏一種較為滿意的動物模型以模擬其病理生理的改變。本研究擬利用腸神經(jīng)節(jié)消融術建立慢傳輸型便秘模型以及同時存在結腸慢傳輸和出口梗阻情況的混合型便秘模型,共分為兩部分。第一部分:應用腸神經(jīng)消融術建立慢傳輸型便秘大鼠模型目的:通過部分消融結腸神經(jīng)節(jié)創(chuàng)新建立一種大鼠慢傳輸型便秘模型。方法:選用S-D雌性大鼠,5-6周齡,隨機分為正常對照組、假手術組、實驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,正常對照組不做處理,假手術組及實驗組大鼠在麻醉下,通過腹腔手術分別給予生理鹽水及0.05%、0.1%、0.25%、0.5%苯扎氯銨溶液處理全結腸30min。術后2周開始記錄各組大鼠相關指標,包括進食量、體重、24h排便粒數(shù)、24h糞便干重、胃腸傳輸時間,通過HE染色、免疫組化染色、Elisa、Western Blot等方法對結腸病理改變、腸道神經(jīng)細胞、Cajal間質細胞、神經(jīng)遞質(5-HT)濃度及腸道細胞凋亡情況進行評價。結果:實驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與正常對照組、假手術組相比胃腸運輸時間明顯延長(P0.05),且與苯扎氯銨濃度正相關。HE及免疫組化染色出現(xiàn)腸道神經(jīng)細胞、Cajal間質細胞減少,凋亡增加等不同程度病理改變,符合慢傳輸型便秘病理改變,實驗組Ⅲ結腸5-HT濃度較其他各組顯著降低(P0.01)。結論:本研究采用0.25%苯扎氯銨消融結腸神經(jīng)節(jié)成功構建結腸慢傳輸型便秘動物模型,該模型制作簡單、病理改變穩(wěn)定且更符合慢傳輸型便秘的病理改變。第二部分:應用腸神經(jīng)消融術建立混合型便秘大鼠模型目的:應用腸神經(jīng)消融術部分消融結腸、直腸神經(jīng)節(jié)建立一種既往無文獻報道的混合型便秘大鼠模型。方法:選用S-D雌性大鼠,5-6周齡,隨機分為假手術組、慢傳輸組、出口梗阻型組、混合型便秘組,在腹腔注射麻醉下,假手術組、慢傳輸型便秘組通過腹腔手術分別給予生理鹽水、0.25%處理全結腸;出口梗阻組、混合型便秘組分別給予濃度為0.5%苯扎氯銨溶液處理直腸,1周后,混合型便秘組行開腹手術,給予濃度為0.25%苯扎氯銨處理全結腸。2周后檢測各組大鼠進食、體重、排便重量、排便粒數(shù)、糞便干濕比、胃腸傳輸時間,并通過HE染色、免疫組化染色、Elisa及Western Blot等方法對結腸的組織病理改變進行評價。結果:混合型便秘組大鼠排便明顯減少,結腸糞便潴留,呈巨結腸改變,結腸運輸時間較假手術組明顯延長,與假手術組存在顯著差異(P0.05),且存在腸道神經(jīng)細胞、Cajal間質細胞減少,凋亡增加,神經(jīng)遞質(5-HT)分泌減少(P0.05)。結論:本研究采用0.25%聯(lián)合0.5%苯扎氯銨消融結腸及直腸神經(jīng)節(jié)成功構建混合型便秘動物模型,該模型制作方法簡單、病理改變穩(wěn)定且較為符合混合型便秘的病理改變。
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R574.62;R-332

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