本文關(guān)鍵詞：腹瀉主導(dǎo)型腸易激綜合征患者的腸道菌群研究

  更多相關(guān)文章： 腹瀉型主導(dǎo)型腸易激綜合征 高通量測序 實時熒光定量PCR 腸道菌群 普雷沃氏菌屬 感染后腸易激綜合征 實時熒光定量PCR 腸道菌群 普雷沃氏菌屬

【摘要】：第一部分腹瀉主導(dǎo)型腸易激綜合征患者的腸道菌群研究背景及目的腸易激綜合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是一種以腹部不適、腹痛、排便習(xí)慣改變及大便性狀改變?yōu)榕R床表現(xiàn)的功能性胃腸病。其病因尚不明確,該病的發(fā)病因素可能與腸道菌群改變相關(guān)。根據(jù)臨床癥狀不同,IBS被分為腹瀉主導(dǎo)型(IBS-D),便秘主導(dǎo)型(IBS-C),便秘腹瀉交替型(IBS-M)[1],其中IBS-D和腸道菌群的關(guān)系據(jù)研究報道尤為密切。本實驗通過Miseq高通量測序聯(lián)合16s rDNA實時熒光定量PCR法(QPCR)分析IBS-D患者與正常人群糞便中的腸道菌群分布差異,以期發(fā)現(xiàn)對腸易激綜合征診斷治療有指導(dǎo)意義的特定菌群。探究腸道菌群與IBS-D患者癥狀嚴(yán)重程度及生活質(zhì)量的關(guān)系。方法在通過浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)以及患者知情同意的情況下入組邵逸夫醫(yī)院就診的患者,選取40例經(jīng)羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷為IBS-D的患者,同時入組20例健康人組成健康對照組,IBS-D患者入組時填寫IBS癥狀等級評分量表及SF-36生活質(zhì)量量表。提取IBS-D患者及正常人糞便中的16SrDNA,隨機(jī)各取3例樣本進(jìn)行基于Illumina Miseq平臺的高通量測序,根據(jù)測序結(jié)果及既往研究選取特定細(xì)菌引物通過16S rDNA實時熒光定量PCR法進(jìn)一步檢測及驗證,分析IBS-D組與正常組糞便中的菌群分布差異。比較患者癥狀嚴(yán)重程度、生活質(zhì)量與特定腸道菌群含量的相關(guān)性。結(jié)果1)高通量測序結(jié)果顯示,IBS-D患者的平均細(xì)菌密度低于健康對照組。IBS-D患者與正常人群對比,腸道中普雷沃氏菌屬所占的百分比明顯高于正常對照組,分別為69.77%及8.21%(P0.05)；而擬桿菌屬所占的百分比明顯低于正常對照組,分別為4.92%及60.62%(P0.05),其余菌屬分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2)16S rDNA熒光定量PCR結(jié)果顯示IBS-D患者中擬桿菌屬、雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬數(shù)量減少及普雷沃氏菌屬和大腸桿菌數(shù)量增加有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),最顯著的是,普雷沃氏菌屬在中國IBS-D患者中較正常人群增加超過100倍(P0.05)。3)普雷沃氏菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬及大腸桿菌含量與IBS-D患者癥狀嚴(yán)重程度及生活質(zhì)量無顯著相關(guān)性。結(jié)論IBS-D患者腸道內(nèi)普雷沃氏菌屬和大腸桿菌數(shù)量顯著增加,擬桿菌屬、雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬數(shù)量顯著減少。首次發(fā)現(xiàn)了中國IBS-D患者糞便中的優(yōu)勢菌屬為普雷沃氏菌屬,其在IBS的發(fā)病機(jī)制和診治中可能發(fā)揮重要作用。第二部分感染后腸易激綜合征小鼠模型建立及菌群分析背景及目的部分IBS患者癥狀出現(xiàn)于急性腸道感染之后,因此提出感染后腸易激綜合征(post-infectious irritable bowel syndrome,PI-IBS)的概念,本實驗使用旋毛蟲腸道急性感染后小鼠腸易激綜合征模型,通過QPCR的方法對其腸道菌群進(jìn)行分析,進(jìn)一步驗證腸道菌群在IBS致病中的作用。方法構(gòu)建PI-IBS小鼠模型,評估其內(nèi)臟高敏感性及腸道炎癥狀況,通過QPCR法對腸道內(nèi)特定細(xì)菌含量進(jìn)行檢測,分析其與健康對照小鼠分布差異。結(jié)果PI-IBS小鼠內(nèi)臟敏感性較正常小鼠增高(P0.05),QPCR結(jié)果顯示PI-IBS小鼠腸道內(nèi)普雷沃氏菌屬增加(P0.05),而雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬、擬桿菌屬、大腸桿菌數(shù)量與正常對照組無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論PI-IBS小鼠腸道內(nèi)中普雷沃氏菌屬增加,其余菌屬無變化,其在IBS致病中的作用值得深入探究。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R574

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李曉青;常敏;許東;方秀才;;中國腸易激綜合征流行病學(xué)調(diào)查現(xiàn)狀分析[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2013年08期

2 王紅妹,李魯,沈毅;中文版SF-36量表用于杭州市區(qū)居民生命質(zhì)量研究[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年06期

，

本文編號：1144597