復(fù)方血竭制劑對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠肺、腸IL-6表達(dá)的影響
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【摘要】:潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)是炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)的一種類型,病變位于黏膜及黏膜下層,主要累及結(jié)腸與直腸。UC的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,主要考慮環(huán)境、遺傳免疫、病原微生物所致。UC除胃腸道受累外,其它器官也常累及。Turner-Warwick M等人首先報道了UC可導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)疾病,直到Kraft SC等人研究發(fā)現(xiàn)并確定肺部受累為UC腸外表現(xiàn)。本實驗通過BALB/c小鼠構(gòu)建4%葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)誘導(dǎo)的急性期UC動物模型,復(fù)方血竭制劑干預(yù)作用后,通過免疫組化、ELISA、RT-qPCR測定結(jié)腸與肺組織中白介素-6(interleukin-6,IL-6)表達(dá)量,作為判斷預(yù)后及療效的指標(biāo),為復(fù)方血竭制劑緩解UC及UC肺損傷提供實驗依據(jù)。為探討復(fù)方血竭制劑對UC小鼠模型結(jié)腸與肺組織的保護(hù)作用,將60只雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分成4組,每組15只,分別為正常組、DSS組、血竭組、DSS+血竭組。全部小鼠適應(yīng)環(huán)境喂養(yǎng)7d。第8d,正常組予以1ml生理鹽水灌胃;DSS組予以4%DSS自由飲用同時給予1ml生理鹽水灌胃;血竭組予以復(fù)方血竭(0.075g/kg/d)1ml灌胃;DSS+血竭組予以4%DSS自由飲用同時給予復(fù)方血竭(0.075g/kg/d)1ml灌胃。10d后,觀察小鼠一般情況、疾病活動指數(shù)(disease activity index,DAI)評分、病理組織學(xué)評分評價組織炎癥的嚴(yán)重程度。通過免疫組化觀察陽性細(xì)胞個數(shù),ELISA與RT-qPCR測定結(jié)腸與肺組織中IL-6表達(dá)量。實驗結(jié)果表明正常組、血竭組無明顯炎性表現(xiàn);DSS組、DSS+血竭組分別為重度及輕度炎性表現(xiàn)。DSS組、DSS+血竭組小鼠DAI評分顯著增高,但DSS+血竭組小鼠評分呈下降趨勢,結(jié)果比較有顯著性差異(P0.05);DSS組、DSS+血竭組結(jié)腸長度分別為(5.220±0.405)cm、(6.380±0.434)cm,結(jié)果比較有顯著性差異(P0.05);DSS組、DSS+血竭組結(jié)腸病理組織學(xué)(histological,HI)評分分別為(6.150±0.145)、(2.640±0.056),肺病理組織學(xué)評分分別為(7.320±0.079)、(3.360±0.157),結(jié)果比較有顯著性差異(P0.05);免疫組化法檢測結(jié)腸與肺組織IL-6表達(dá)量,顯微鏡下觀察,DSS+血竭組比DSS組陽性細(xì)胞個數(shù)明顯減少(P0.05);酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)檢測結(jié)腸與肺組織IL-6表達(dá)量,DSS組、DSS+血竭組結(jié)腸與肺組織IL-6表達(dá)量分別為(66.511±1.171、76.068±0.537)pg/mg、(19.121±3.141、24.791±2.332)pg/mg,結(jié)果比較有顯著性差異(P0.05);實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)檢測結(jié)腸與肺組織信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)的表達(dá)量,DSS組、DSS+血竭組結(jié)腸與肺組織IL-6mRNA表達(dá)量分別為(14.087±2.143、15.971±0.170)、(6.536±2.432、8.042±0.671),結(jié)果比較有顯著性差異(P0.05)。本實驗通過小鼠自由飲用DSS,成功制備UC模型,與人類UC癥狀及臨床表現(xiàn)相似。通過觀察各組小鼠臨床癥狀,從一般情況、DAI評分、病理組織學(xué)評分中可知,DSS+血竭組小鼠較正常組重,較模型組減輕。通過ELISA、免疫組化、RT-qPCR測定結(jié)腸與肺組織中IL-6表達(dá)量,說明復(fù)方血竭制劑對UC小鼠肺、腸有治療作用,更加為“復(fù)方血竭制劑可以下調(diào)IL-6表達(dá)量,緩解小鼠實驗性UC及UC肺損傷”這一觀點提供強(qiáng)有力的實驗理論依據(jù),為治療UC及UC肺損傷帶來新的希望。
【關(guān)鍵詞】:復(fù)方血竭 結(jié)腸炎 潰瘍性 IL-6 肺
【學(xué)位授予單位】:河北北方學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R574.62
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 英文縮寫10-12
- 前言12-13
- 材料與方法13-19
- 結(jié)果19-22
- 附圖22-33
- 附表33-35
- 討論35-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-46
- 綜述 關(guān)于IL-6/STAT3信號通路在潰瘍性結(jié)腸炎治療中的新進(jìn)展46-55
- 參考文獻(xiàn)51-55
- 致謝55-56
- 個人簡歷56
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1116603
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