本文關(guān)鍵詞：ω-3多不飽和脂肪酸調(diào)節(jié)腸道菌群平衡緩解NAFLD機制

  更多相關(guān)文章： ω-3多不飽和脂肪酸 高脂飲食 非酒精性脂肪性肝病 腸道菌群 肝脂肪變性和炎癥

【摘要】：非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是現(xiàn)今發(fā)達(dá)國家和我國發(fā)達(dá)地區(qū)的最常見的慢性肝臟疾病,也是代謝綜合征在肝臟的表征。流行病學(xué)研究分析顯示,富含ω-3多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)的魚油和紫蘇子油可以干預(yù)NAFLD的進程,緩解肝損傷和肝炎癥,但其具體機制尚不完全清楚。近來也有研究表明:ω-3 PUFAs可調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,可能在防止NAFLD炎性損傷過程中發(fā)揮重要作用。目的:高脂高膽固醇膳食飼喂雄性Sprague Dawley(SD)大鼠構(gòu)建NAFLD動物模型,研究富含ω-3 PUFA的魚油和紫蘇子油緩解高脂膳食誘導(dǎo)NAFLD進程及對腸道菌群平衡的干預(yù)作用。方法:將40只8-9周齡SD健康雄性大鼠進行隨機分組,每組10只共四組,大鼠按下面四種飼料配方喂養(yǎng)16周:第一組喂食正常飼料,為正常對照組(NOR,n=10);第二三四組喂食高脂飼料,分別為高脂模型組(HFD,n=10)、魚油干預(yù)高脂組(FOH,n=10)、紫蘇油干預(yù)高脂組(POH,n=10)。16周后,采集糞便、收集血清,快速摘除肝臟并稱重。用比色法測定血清中TCH、LDL-C、TG含量,酶法檢測血清中ALT、AST活力,肝組織標(biāo)本石蠟切片(5μm切片),進行HE染色,采用qPCR和western blot技術(shù)檢測肝組織中IL-1、IL-6、TNF等促炎因子的表達(dá)。采用試劑盒法提取腸道細(xì)菌基因組DNA,利用16S rDNA V4區(qū)序列設(shè)計引物,雙末端測序法對四組腸道微生物進行測序分析。根據(jù)測序結(jié)果,用qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線法進行驗證,基于特異基因的qPCR對各組腸道微生物Akkermansia和Escherichia的量進行測量。結(jié)果:肝臟HE染色觀察到富含ω-3 PUFA魚油和紫蘇子油干預(yù)組肝臟脂質(zhì)積累減輕,炎性細(xì)胞浸潤減少,緩解了炎癥。相比于HFD組,魚油和紫蘇子油干預(yù)組血清中肝功能指示酶ALT和AST活力顯著下降,同時干預(yù)組中肝組織促炎因子Il-1β,TNF-α,和IL-6等顯著下調(diào)。因此,魚油和紫蘇子油都能改善高脂誘導(dǎo)的肝脂肪變性和炎癥。與正常對照組比較,高脂喂養(yǎng)顯著增加了腸道中普氏菌(Prevotella)、埃希式桿菌屬(Escherichia)等革蘭氏陰性細(xì)菌的相對豐度,而魚油和紫蘇子油可以輕微的扭轉(zhuǎn)這趨勢。TLR4是革蘭氏陰性細(xì)菌的脂多糖(LPS)識別受體,在肝臟細(xì)胞中,高脂組TLR4的表達(dá)是最大的,而干預(yù)組明顯下調(diào)TLR4的表達(dá),相比于HFD組,干預(yù)組血清中LPS濃度顯著下降,這一結(jié)果同樣和腸道微生物變化一致。此外,魚油和紫蘇子油都緩解了高脂喂養(yǎng)動物腸道內(nèi)Prevotella和Escherichia的過度生長,并且魚油和紫蘇子油腸道菌群具有相似的組成。與高脂組相比,只有魚油組腸道中減肥菌Akkermansia的相對豐度增加。結(jié)論:富含DHA/EPA的魚油和富含ALA的紫蘇子油均可緩解高脂所致代謝紊亂,并能調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,表明:ω-3 PUFAs可通過減少腸道革蘭氏陰性菌的豐度、抑制革蘭氏陰性菌介導(dǎo)的肝臟炎癥,達(dá)到緩解高脂所致的肝炎癥的效果,這一結(jié)果將有助于我們更好的理解ω-3 PUFAs對健康的營養(yǎng)價值。
【關(guān)鍵詞】：ω-3多不飽和脂肪酸 高脂飲食 非酒精性脂肪性肝病 腸道菌群 肝脂肪變性和炎癥
【學(xué)位授予單位】：武漢輕工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R575.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1 緒論10-18
• 1.1 非酒精性脂肪肝病及其病理機制研究進展10
• 1.2 NAFLD和腸道菌群之間關(guān)系的研究進展10-13
• 1.2.1 NAFLD與腸道菌群10-11
• 1.2.2 NAFLD腸道內(nèi)的重要微生物11-13
• 1.3 ω-3 PUFA與腸道菌群13-14
• 1.3.1 膳食與腸道菌群13
• 1.3.2 ω-3 PUFA緩解炎癥13-14
• 1.4 腸道菌群分子分析技術(shù)14-15
• 1.4.1 16S rDNA基因檢測技術(shù)的產(chǎn)生與應(yīng)用14-15
• 1.4.2 實時熒光定量PCR技術(shù)15
• 1.5 目的意義和技術(shù)路線15-18
• 1.5.1 目的意義15-16
• 1.5.2 技術(shù)路線16-18
• 2 ω-3 PUFA改善大鼠NAFLD18-38
• 2.1 實驗材料與方法18-29
• 2.1.1 實驗主要儀器和試劑18-22
• 2.1.2 實驗動物與飼料22-24
• 2.1.3 血清樣本采集24
• 2.1.4 血脂及肝功能檢測24
• 2.1.5 肝臟病理檢測24
• 2.1.6 炎性因子分子指標(biāo)測定24-28
• 2.1.7 統(tǒng)計分析28-29
• 2.2 結(jié)果與分析29-35
• 2.2.1 魚油和紫蘇子油改善高脂誘導(dǎo)的脂肪肝29-32
• 2.2.2 魚油和紫蘇子油減輕高脂誘導(dǎo)的肝損傷32-33
• 2.2.3 魚油和紫蘇子油減輕高脂誘導(dǎo)的炎癥33-35
• 2.3 討論35-38
• 3 ω-3 PUFA改善大鼠NAFLD腸道菌變化38-56
• 3.1 材料與方法38-44
• 3.1.1 主要儀器和試劑38-39
• 3.1.2 腸道微生物基因組DNA提取39
• 3.1.3 腸道微生物測序和組成分析39-40
• 3.1.4 相關(guān)腸道菌的量化40-43
• 3.1.5 血清中LPS的測定43
• 3.1.6 統(tǒng)計學(xué)分析43-44
• 3.2 結(jié)果與分析44-53
• 3.2.1 膳食誘導(dǎo)腸道微生物的改變44
• 3.2.2 腸道微生物門水平上的比較44-45
• 3.2.3 腸道微生物科和屬水平上的比較45-48
• 3.2.4 腸道菌群的量化驗證48-51
• 3.2.5 ω-3 PUFA改善腸道菌群51-53
• 3.3 討論53-56
• 4 全文總結(jié)56-57
• 4.1 本文的主要結(jié)論如下56
• 4.2 研究展望56-57
• 參考文獻57-65
• 致謝65-66
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果66

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉華;黃湘寧;許莉;;成都市中老年人腸道菌群比例的初步探討[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年20期

2 王新文;阿基業(yè);曹蓓;劉林生;趙春艷;陳曉虎;王廣基;;腸道菌群對某些疾病及藥物療效與毒性的影響[J];藥學(xué)進展;2012年05期

3 張曉婧;曾本華;劉智偉;廖振林;方祥;魏泓;;兩種不同品系小鼠的人源菌群模型的建立與腸道菌群的比較[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2013年04期

4 陳秀琴;黃小潔;石達(dá)友;郭世寧;;中藥與腸道菌群相互作用的研究進展[J];中草藥;2014年07期

5 ;腸道菌群 你所不知的那部分“自己”[J];科學(xué)之友(上旬);2013年06期

6 阿梅;漫話腸道菌群平衡[J];中老年保健;1997年02期

7 尹軍霞,林德榮;腸道菌群與疾病[J];生物學(xué)通報;2004年03期

8 王建陽;關(guān)注住院病人的腸道菌群[J];現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2005年04期

9 ;歐盟啟動腸道菌群基因組研究工程[J];中國食品學(xué)報;2008年03期

10 李蘭娟;;感染微生態(tài)研究進展——腸道菌群對機體代謝影響[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2009年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹虹;郝小燕;彭亮;方幸幸;;腸道菌群與機體代謝及相關(guān)疾病——感染微生態(tài)學(xué)的研究進展[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2011年

2 王保紅;李e，

本文編號：1104496