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幽門(mén)螺旋桿菌CagA蛋白對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin表達(dá)及磷酸化的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-10-24 03:33

  本文關(guān)鍵詞:幽門(mén)螺旋桿菌CagA蛋白對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin表達(dá)及磷酸化的影響


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【摘要】:目的1.觀察幽門(mén)螺旋桿菌感染對(duì)人胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)及磷酸化的影響。2.明確CagA蛋白對(duì)人胃黏膜上皮細(xì)胞β-Catenin的表達(dá)及磷酸化的影響。3.探討CagA蛋白誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin表達(dá)增加的分子機(jī)制。方法1.收集胃竇黏膜活檢標(biāo)本80例,切片觀察胃黏膜的病理變化;2.免疫組化染色觀察胃黏膜組織中的HP感染狀況:所有胃黏膜標(biāo)本切取6um厚的組織切片,標(biāo)本經(jīng)脫蠟、水化后,采用HP特異抗體檢測(cè)胃黏膜組織中HP的感染狀況,根據(jù)有無(wú)HP感染,所有標(biāo)本分為HP陽(yáng)性組及HP陰性組。3.PCR擴(kuò)增觀察HP陽(yáng)性胃黏膜組織中HP的CagA基因狀態(tài)所有HP陽(yáng)性的胃黏膜標(biāo)本分別切取6-8張6um厚的組織切片,放入消毒的EP管中,采用Qiagen公司的試劑盒,從石蠟包埋組織中提取DNA,并以此DNA作為模板,采用CagA特異的引物擴(kuò)增CagA基因,擴(kuò)增產(chǎn)物采用瓊脂糖凝膠電泳分析。HP陽(yáng)性胃黏膜又被進(jìn)一步分為CagA陽(yáng)性組與CagA陰性組。4.免疫組化染色觀察胃黏膜上皮細(xì)胞中β-Catenin及p-β-Catenin的表達(dá)及分布,采用半定量及定量方法,分析不同CagA狀態(tài)的HP感染對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)、分布及磷酸化的影響。5.采用細(xì)胞培養(yǎng)及基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)探討CagA蛋白誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)增高的分子機(jī)制。結(jié)果1.HP感染誘導(dǎo)人胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)增高。2.HP感染誘導(dǎo)的胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)增高與CagA基因的狀態(tài)有關(guān),CagA陽(yáng)性的HP感染使胃黏膜上皮內(nèi)β-Catenin的磷酸化減少。3.CagA蛋白可能通過(guò)抑制PAR1b/MARK2激酶活性,導(dǎo)致β-Catenin的磷酸化降低。結(jié)論1.幽門(mén)螺旋桿菌感染可誘導(dǎo)人胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)增加。2.HP誘導(dǎo)的胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的表達(dá)增高與CagA蛋白的狀態(tài)密切相關(guān),CagA蛋白抑制胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin的磷酸化。3.CagA蛋白可能是通過(guò)抑制PAR1/MARK2激酶的活性,導(dǎo)致胃黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)β-Catenin磷酸化水平降低。
【關(guān)鍵詞】:幽門(mén)螺旋桿菌 CagA β-Catenin 磷酸化
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R573;R735.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 前言11-15
  • 第一部分 幽門(mén)螺旋桿菌CagA蛋白對(duì)胃黏膜上皮中β -Catenin表達(dá)及磷酸化的影響15-27
  • 材料與方法15-21
  • 結(jié)果21-24
  • 討論24-27
  • 第二部分 幽門(mén)螺旋桿菌CagA蛋白影響β-cat在胃癌AGS細(xì)胞系中表達(dá)的分子機(jī)制27-42
  • 材料與方法27-38
  • 結(jié)果38-40
  • 討論40-42
  • 結(jié)論42-43
  • 參考文獻(xiàn)43-47
  • 文獻(xiàn)綜述 CagA蛋白與β-Catenin的磷酸化47-53
  • 參考文獻(xiàn)50-53
  • 致謝53-54
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐東娟;李國(guó)富;張紅梅;呂懷盛;張寧妹;馬莉瓊;江海峰;張建中;;不同方法檢測(cè)胃黏膜活檢標(biāo)本中幽門(mén)螺桿菌感染狀況的價(jià)值[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2014年06期

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本文編號(hào):1086834

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