本文關鍵詞：幽門螺桿菌口腔唾液測試板的臨床實用價值研究

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【摘要】：研究背景1983年,澳大利亞學者沃倫(Warren)和馬歇爾(Marshall)首次在胃炎患者的胃黏膜中發(fā)現(xiàn)了幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp),引起了學術界的廣泛關注。迄今為止,關于Hp的研究取得了長足進展。H.pylori是一種革蘭氏陰性微需氧桿菌,有鞭毛,具有典型的微曲桿狀形態(tài),可呈“S”型或“C”型,易發(fā)生球形變(抗生素、環(huán)境因素等可誘發(fā)),其分泌的尿素酶、黏附蛋白等毒力因子可以克服如高胃酸等各種不利因素,進而長期定植在胃黏膜表面。H.pylori感染能引起胃內及胃外的一系列病變,其中最重要的是,H.pylori感染是胃癌的首要病因。1994年,世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)將Hpylori定為I類(明確的)致癌物質。目前其已經被確認是慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、胃黏膜相關性淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤、成人和兒童不明原因的缺鐵性貧血以及特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)等疾病的重要致病因素。此外,還有較多的研究顯示,微量營養(yǎng)素缺乏相關性疾病、哮喘、肝炎、胰腺疾病以及動脈粥樣硬化等疾病都可能與該菌的感染密切相關。此外,醫(yī)學界曾認為胃是幽門螺桿菌(H.pylori)的唯一生存環(huán)境,但自從1989年Krajden等學者首次從胃炎患者的牙菌斑中、1993年F erguson等首次從唾液中分離并成功培養(yǎng)出H.pylori以來,口腔作為Hp定植和生長的另一重要環(huán)境逐漸得到學者們的廣泛認可。隨后,口腔幽門螺桿菌的研究成為H.pylori研究的又一熱點。有學者認為,幽門螺桿菌可能是一類條件致病菌,它除了可以引起胃部病變,還可能誘發(fā)疾病。消化道有病變的患者,其口腔中的幽門螺桿菌與胃黏膜內的幽門螺桿菌在形態(tài)學、生物學特征上相似,具有同源性。而口腔中廣泛存在于唾液、牙菌斑等部位的幽門螺桿菌不僅可導致口腔疾病,還可能隨唾液吞咽到達胃內并定植,從而引起胃內病變,造成胃內幽門螺桿菌再次感染和復發(fā)。幽門螺桿菌的傳播途徑至今仍存在爭議,未能完全明確。實驗動物如蒙古沙鼠等雖然具有一定的易感性,但是大多數(shù)學者認為,人類是自然環(huán)境中的主要傳染源和易感種群。誠然,胃是H.pylori的最主要感染場所和貯存場所,但是學者們從人類口腔的唾液、牙菌斑、口腔潰瘍等部位廣泛分離和培養(yǎng)出H.pylori,提示口腔可能是人類除了胃部這個貯存場所以外的另一場所。有學者提出,幽門螺桿菌的傳播方式主要有口-口傳播,口-胃傳播,胃-口傳播,糞-口傳播以及侵入性檢查傳播等幾種途徑。其中,胃-口傳播的方式可以分為兩種。第一反酸、惡心及嘔吐的消化道運動,使得胃內的H.pylori隨胃內容物反流至口腔內。第二,口-口接觸或糞-口播散,比如家族聚餐或不良的衛(wèi)生習慣等�？梢�,口腔作為消化道的一部分,H.pylori作為病原體,通過其在口腔與消化道之間感染的播散,成為了聯(lián)系消化道疾病與口腔疾病之間的“信使”。幽門螺桿菌(H.pylori)感染現(xiàn)已成為人類最常見的慢性細菌感染之一,其感染率受到社會經濟水平、教育水平、水源、地域、職業(yè)、年齡、種族及飲食衛(wèi)生習慣等等因素的影響。吸煙、飲酒與H.pylori感染的關系暫未完全明確,需進一步研究。流行病學提示,發(fā)達國家幽門螺桿菌的感染率約為10%-50%,而發(fā)展中國家H.pylori的感染率可達到40%-80%,部分欠發(fā)達國家可高達90%以上。我國也是幽門螺桿菌高感染率的國家之一,H.pylori的評價感染率約為56.22%,其中,廣東地區(qū)H.pylori感染率最低,約為42.01%,而西藏地區(qū)的感染率最高,為84.62%。但并非所有感染幽門螺桿菌的個體均出現(xiàn)明顯的消化道癥狀,通常僅有10-15%的感染者可能出現(xiàn)典型的臨床表現(xiàn)。因此,早期、準確的檢測幽門螺桿菌感染,對多種口腔以及胃部的相關疾病,特別是胃腺癌的防治均具有重要意義。目前臨床上診斷H.pylori感染的方法很多,主要分為侵入性和非侵入性檢查兩大類。侵入性檢查需要借助胃鏡檢查方能完成,是一類損傷性檢查方法,包括快速尿激酶試驗(RUT)、組織學檢查、細菌培養(yǎng)等；非侵入性檢查則無需胃鏡輔助,具有無損傷、受試者耐受性好等特點,主要包括同位素標記的13C或14C尿素酶呼氣試驗(13C或14C-UBT)、糞便抗原、血清學方法(H.pylori抗體等)和分子生物學(如PCR、基因測序等)檢測等等。因為侵入性檢查往往存在受試者耐受性較差、測試儀器價格昂貴、檢測時間長以及對相關技術要求較高等限制,同時還可能存在交叉感染等問題,現(xiàn)今非侵入性檢查已逐漸成為學者們研究幽門螺桿菌感染檢測的熱點。唾液幽門螺桿菌測試板(Hp Saliva Test cassette, HPS)是近年來新出現(xiàn)的一種檢測H.pylori感染的非侵入性方法,其不同于既往簡單的抗原和抗體檢測,而是應用膠體金層析式雙抗體夾心法原理,能針對性的檢測人體唾液中由H.pylori產生的尿素酶,與口腔內其他能產生尿素酶的菌類無交叉反應,特異性強,因而能達到檢測幽門螺桿菌的目的。新近數(shù)篇關于唾液HPS測試板的研究多次驗證了HPS檢測H.pylori感染具有較高的敏感性及特異性,與傳統(tǒng)的UBT、RUT及多種聯(lián)合檢測等方法的結果相近,且操作簡便、快速、患者耐受性好,因此,有學者認為HPS可以作為臨床上診斷H.pylori感染的一種可靠的非侵入性檢查。本文主要研究三部分內容,來探討HPS檢測幽門螺桿菌(H.pylori)感染的臨床價值：第一,HPS法檢測唾液幽門螺桿菌感染的情況,并將HPS的檢測結果分別與RUT和HE聯(lián)合檢測、快速尿素酶試驗(RUT)、胃黏膜組織切片染色(HE染色)的結果進行比較。第二,對胃黏膜組織病理提示為萎縮、糜爛、胃息肉、不典型增生和腸上皮化生五種類型的研究對象,分別對其HPS和HE檢測幽門螺桿菌的結果進行比較分析。第三,同時行結腸鏡檢查的受試者中,對結腸鏡發(fā)現(xiàn)息肉,以及內鏡下息肉切除后病理提示為腺瘤性息肉的病例,分別對其HPS和RUT檢測幽門螺桿菌的結果進行比較分析。研究目的幽門螺桿菌(H.pylori)感染能引起胃內及胃外的一系列病變,是WHO確定的工類致癌物質,是胃腺癌的首要病因。目前幽門螺桿菌已經被確認是慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、胃黏膜相關性淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤、成人和兒童不明原因的缺鐵性貧血以及特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)等疾病的重要致病因素。唾液幽門螺桿菌測試板(HPS)是近年來新出現(xiàn)的檢測H.pylori感染的非侵入性方法,應用膠體金層析式雙抗體夾心法原理,能針對性的檢測人體唾液中由H.pylori產生的尿素酶,特異性強。本文通過對唾液HPS檢測法與傳統(tǒng)的RUT、病理HE染色法進行比較,同時比較HPS和HE對常見胃部病理類型的H.pylori的檢出率,以及HPS和病理HE染色對結腸息肉特別是腺瘤性息肉對應H.pylori日性率有無差異,探討HPS檢測幽門螺桿菌感染及其對常見病變的臨床應用價值。方法1、一般資料 選擇2013年10月至2014年3月期間無明顯消化道癥狀來我院行胃鏡檢查的體檢者,均獲得知情同意。共納入228例符合條件者,其中男性154例,女性74例；年齡24-68歲,平均47.5歲。同時行結腸鏡檢查的146例,行息肉切除的51例。納入研究者均應排除以下情況：(1)心肺肝腎功能嚴重損害；(2)惡性腫瘤； (3)最近2個月內接受過質子泵抑制劑、抗生素、H2受體拮抗劑和鉍劑的治療。2、HPS檢測方法 胃鏡檢查前(空腹8h以上),使用HPS抗原測試板,嚴格按照說明書進行操作：1)囑患者在胃鏡檢查前留取唾液1-2m1；2)將唾液吐入塑料杯中；3)將測試板置于平坦臺面上,用吸管吸取4滴唾液,滴入取樣杯中；4)滴加2滴緩沖液于取樣杯中；5)更換吸管,充分混勻液體后,吸取3-4滴混合液滴入加樣窗口,5-15分鐘內觀察結果。結果判定：指示窗口顯示檢測帶(T區(qū))和對照帶(C區(qū))均出現(xiàn)色帶,說明H.pylori陽性；只顯示C區(qū)色帶,說明H.pylori陰性；均未出現(xiàn)色帶為無效。3、胃黏膜組織快速尿激酶實驗(rapid urease test,RUT)檢測方法使用我院實驗室生產的胃幽門螺桿菌快速尿素酶試劑進行檢測,胃鏡下取得的胃竇部和(或)胃體部的黏膜組織標本,按照常規(guī)進行操作及結果判定。觀察5分鐘顏色變粉紅即為H.pylori陽性。4、胃黏膜組織切片蘇木精-伊紅染色(HE染色)檢測方法胃鏡下取得的胃竇部和(或)胃體部的黏膜組織標本,由我院病理科進行常規(guī)取材和固定、脫水、包埋、切片及染色等操作。顯微鏡下觀察到幽門螺桿菌菌體為H.pylori陽性。5、統(tǒng)計學方法應用統(tǒng)計軟件SPSS13.0進行數(shù)據(jù)處理。第一部分HPS與RUT及HE聯(lián)合檢測、HPS與RUT、HPS與HE染色之間檢測的結果比較采用配對的四格表資料的Mcnemar檢驗。第二部分對五種病理類型對應HPS與HE染色的檢測結果,兩組間比較采用卡方檢驗。第三部分對腸鏡下檢測出息肉、進行息肉切除提示為腺瘤性息肉的結果,對應HPS與HE染色比較采用卡方檢驗。陽性率、敏感度、特意度、準確率、陽性預測值及陰性預測值均用百分率表示。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結果1、HPS、RUT、HE檢測H.pylori感染的比較：1)HPS與聯(lián)合檢測(RUT或HE)相比較,陽性檢出率分別為47.8%、41.67%,陽性符合率(靈敏度)為84.2%,陰性符合率(特異度)為78.2%,準確率為75.4%,陽性預測值為73.4%,陰性預測值為87.4%；2)HPS與HE檢測相比較,陽性檢出率分別為47.8%、40%,陽性符合率(靈敏度)為85.7%,陰性符合率(特異度)為68.7%,準確率為75.4%,陽性預測值為64.5%,陰性預測值為87.8%；3)HPS與RUT檢測比較,陽性符合率(靈敏度)為88.7%,陰性符合率(特異度)為67.5%,準確率為73.2%,陽性預測值為50.5%,陰性預測值為94.1%。2、常見病理類型對應HPS與HE檢測：行胃黏膜活檢的175例中,病理分別診斷為萎縮、糜爛、胃息肉、腸上皮化生及不典型增生的病例,H.pylori感染均有著較高的檢出率。對HPS與HE的結果進行卡方檢驗,萎縮、腸上皮化生及不典型增生三種類型中,HPS與HE檢測方法的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3、結腸息肉與腺瘤性息肉對應HPS與HE檢測：146例同時接受了結腸鏡檢查,發(fā)現(xiàn)息肉的78例,其中HPS、HE的陽性率分別為69.2%、45.4%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。息肉行內鏡下切除后診斷為腺瘤性息肉的24例,對應HPS、HE的陽性率為66.7%、47.4%。結論1、HPS具有操作簡單、快速、無痛苦等優(yōu)點,被檢者耐受性好。2、HPS、RUT、HE染色檢測幽門螺桿菌感染的比較：HPS陽性檢出率為47.8%,與文獻報道H.pylori的平均感染率較為一致。HPS與RUT、HE染色檢驗H.pylori感染陽性率相比較,靈敏度、特意度、準確率、陽性預測值及陰性預測值均具有較理想的數(shù)值。提示HPS是臨床篩查H.pylori感染的一種很有價值的非侵入性方法,值得臨床進一步驗證。3、病理類型對應HPS與病理HE檢測：HPS與HE染色在五種常見的病理類型均具有較高的幽門螺桿菌陽性檢出率,印證了H.pylori感染與上述病變有相關性。胃黏膜萎縮、腸上皮化生和不典型增生是由非萎縮性胃炎向胃腺癌演變過程中重要的病變階段,是胃癌的癌前病變。HPS與HE檢測H.pylori感染在上述三種病理類型中均具有較高的檢出率,且HPS的陽性率相比HE染色有顯著性差異,提示HPS在篩查萎縮、腸上皮化生和不典型增生等癌前病變中可能具有一定的意義,可用于可能出現(xiàn)上述病變的特定人群的篩查。4、結腸息肉與腺瘤性息肉對應HPS與HE檢測：HPS與HE染色檢測幽門螺桿菌感染均提示,在檢出結腸息肉以及腺瘤性息肉的病例中,H.pylori均具有較高的檢出率,提示HPS在篩查腸息肉以及腺瘤性息肉中可能具有一定的意義。腺瘤性息肉是結直腸癌最重要的癌前病變,近年來的研究提示,幽門螺桿菌及其毒力因子CagA可能是結直腸癌的發(fā)生和發(fā)展的危險因素之一。因此我們推斷,HPS對萎縮、腸上皮化生、典型增生以及結結直腸息肉等病變的篩查可能具有一定的價值,為胃癌前病變及結腸息肉的初篩提供了新思路。
【關鍵詞】：幽門螺桿菌 唾液 測試板 RUT HE染色
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R573
【目錄】：

• 摘要3-10
• ABSTRACT10-17
• 前言17-28
• 參考文獻24-28
• 引言28-29
• 1 材料與方法29-32
• 2 主要實驗結果32-37
• 3 討論37-45
• 全文總結45-48
• 參考文獻48-53
• 英文縮略詞表53-54
• 攻讀學位期間成果54-55
• 致謝55-57

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 葉國欽;;兒童幽門螺桿菌感染的新思考[J];中國當代兒科雜志;2014年03期

2 張羽;陳曦;馮希平;;胃腸道疾病與口臭的關系[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2014年06期

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7 賈妙興;王磊;陳飛;;~(13)C呼氣試驗與血清學快速試驗檢出幽門螺桿菌陽性率的差異[J];山西醫(yī)藥雜志;2015年13期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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本文編號：1076009