本文關(guān)鍵詞：用于急性肝損傷防治的益生菌分離篩選及其作用機制研究

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【摘要】：人體腸道內(nèi)定植著數(shù)目龐大(1014)、結(jié)構(gòu)復(fù)雜(超過1000種細(xì)菌)的微生物群。大量研究證實腸道微生態(tài)失衡與肝病有著密切的關(guān)系,應(yīng)用益生菌調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡進(jìn)而治療肝病的方法已受到廣泛關(guān)注。 本實驗的目的是從健康人體篩選并研究具有自主知識產(chǎn)權(quán)的可用于防治肝病的益生菌。實驗步驟為從健康人體腸道篩選潛在益生菌,經(jīng)過形態(tài)學(xué)觀察、基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜鑒定和16S rDNA序列分析后得到36株益生菌。繼續(xù)進(jìn)行耐酸實驗、耐膽鹽實驗和抑制致病菌實驗后,選擇性能優(yōu)良的5株益生菌：乳桿菌Lac-5、乳桿菌Lac-10、乳桿菌Lac-15、乳桿菌Lac-16和片球菌Ped-1,分別給SD大鼠灌胃8天,然后采用D-半乳糖胺腹腔注射造成大鼠急性肝損傷,劑量為1.1g/kg。24h后處死大鼠,檢測肝功能、血清細(xì)胞因子、肝臟和腸道組織病理、細(xì)菌易位和腸道菌群組成等指標(biāo)。 結(jié)果顯示乳桿菌Lac-15、乳桿菌Lac-16、乳桿菌Lac-10和片球菌Ped-1可以降低AST水平,乳桿菌Lac-15和片球菌Ped-1可以降低ALT水平、升高血清IL-10水平、阻止血清總膽紅素上升。乳桿菌Lac-10和片球菌Ped-1可以升高血清INFy水平。 乳桿菌Lac-15、乳桿菌Lac-16、乳桿菌Lac-10和片球菌Ped-1均可以減輕由D-半乳糖胺造成的肝臟損傷,此外只有乳桿菌Lac-15和片球菌Ped-1可以減輕腸道黏膜損傷。 乳桿菌Lac-15、乳桿菌Lac-5和片球菌Ped-1可以有效減輕細(xì)菌易位。應(yīng)用PCR-DGGE分析后發(fā)現(xiàn)預(yù)先應(yīng)用乳桿菌Lac-15和片球菌Ped-1可以顯著改變急性肝損傷大鼠的腸道菌群結(jié)構(gòu)。 最后我們對菌株Lac-15和Ped-1的基因組進(jìn)行了測序,并從基因組學(xué)的角度分析了菌株益生性能和減輕肝損傷能力的機理。 因此,本研究所篩選的兩株益生菌Lac-15和Ped-1性能優(yōu)良,為后續(xù)開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的防治肝病的益生菌制劑奠定了良好的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：益生菌 腸道菌群 急性肝損傷
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R575
【目錄】：

• 致謝6-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 縮寫、符號及術(shù)語表12-16
• 緒論16-20
• 第一章 健康人體腸道潛在益生菌的分離、鑒定及功能特性研究20-45
• 前言20-21
• 1. 材料和方法21-28
• 2. 結(jié)果28-44
• 3. 結(jié)論44-45
• 第二章 益生菌對急性肝損傷大鼠的作用及機制研究45-69
• 前言45-46
• 1. 實驗材料46-48
• 2. 實驗方法及檢測指標(biāo)48-55
• 3. 結(jié)果55-65
• 4. 討論65-69
• 第三章 菌株P(guān)ED-1和LAC-15的基因組學(xué)研究69-81
• 前言69-70
• 1. 實驗材料70-71
• 2. 實驗方法71-73
• 3. 結(jié)果73-80
• 4. 結(jié)論80-81
• 參考文獻(xiàn)81-87
• 綜述87-100
• 參考文獻(xiàn)93-100
• 作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果100-10

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本文編號：1019209