本文關(guān)鍵詞：鹽霉素對(duì)鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞放療敏感性的影響

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【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾接扄}霉素對(duì)鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞放療敏感性的影響。實(shí)驗(yàn)方法：第一部分：CNE-2細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)培養(yǎng),并鑒定CNE-2細(xì)胞微球干細(xì)胞特性鼻咽癌CNE-2細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng),鏡下觀察其細(xì)胞形態(tài)；加入SSM培養(yǎng)基觀察CNE-2-CSC分化能力：采用Transwell小室法、流式細(xì)胞術(shù)、克隆形成實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)其侵襲能力、CD133表達(dá)率、細(xì)胞增殖能力。第二部分：鹽霉素對(duì)鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞放療敏感性的影響鼻咽癌干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng),MTT檢測(cè)鹽霉素藥物劑量反應(yīng)及不同放射劑量CNE-2-CSC細(xì)胞增殖能力,MTS法檢測(cè)細(xì)胞抑制率；克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)鹽霉素對(duì)CNE-2-CSC細(xì)胞的放射增敏作用；采用RT-PCR、Western blot法檢測(cè)人鼻咽癌干細(xì)胞中Rad51、Ku70、Ku80基因及蛋白表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：第一部分：無(wú)血清培養(yǎng)的CNE-2-CSC細(xì)胞鏡下呈球狀懸浮生長(zhǎng),折光性強(qiáng)；CNE-2-SCS加入SSM培養(yǎng)基,細(xì)胞分化出與CNE-2細(xì)胞形態(tài)相似的細(xì)胞；與普通CNE-2細(xì)胞相比,CNE-2-CSC具有較強(qiáng)的侵襲能力,(142±7)／視野VS(63±8)／視野,P0.01；高表達(dá)CD133,其陽(yáng)性表達(dá)率分別為(98.29±1.28)%和(1.58±0.28)%,P0.01：CNE-2-CSC細(xì)胞具有較強(qiáng)的自我增殖能力,克隆形成數(shù)明顯高于CNE-2細(xì)胞。第二部分：MTT法檢測(cè)出鹽霉素IC50=3.026μM, SF2μM=62.4±3.3%,6MV-X射線LD50=8.226Gy, SF6Gy=75.7±1.89%.鹽霉素聯(lián)合射線處理組細(xì)胞抑制率比單用鹽霉素組、單用X射線照射組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)顯示鹽霉素降低了受照射后CNE-2-CSC細(xì)胞的克隆形成率,根據(jù)擬合存活曲線計(jì)算出放射生物學(xué)參數(shù)提示鹽霉素提高了放射敏感性,單擊多靶模型計(jì)算反射增敏比為1.345。鹽霉素聯(lián)合射線組鼻咽癌干細(xì)胞Rad51、Ku70和Ku80 mRNA表達(dá)水平明顯低于射線組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。鹽霉素聯(lián)合射線組鼻咽癌干細(xì)胞Rad51、Ku70口Ku80蛋白表達(dá)水平顯著低于單獨(dú)射線組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論： CNE-2干細(xì)胞培養(yǎng)成功,并具有較強(qiáng)的侵襲能力、增殖能力和高表達(dá)CD133。鹽霉素聯(lián)合放療能夠明顯抑制人鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞增殖、并抑制細(xì)胞中Rad51、Ku70和Ku80的基因及蛋白表達(dá),這表明鹽霉素對(duì)針對(duì)鼻咽癌干細(xì)胞放療具有協(xié)同作用,其機(jī)制可能是通過(guò)阻止DNA修復(fù)實(shí)現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：鹽霉素 鼻咽癌 干細(xì)胞 放療敏感性
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-13
• 第一部分 CNE-2細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)并鑒定CNE-2細(xì)胞微球干細(xì)胞特性13-20
• 1 材料和試劑13-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-16
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-19
• 4 討論19-20
• 第二部分 鹽霉素對(duì)鼻咽癌干細(xì)胞放療敏感性的影響20-35
• 1 材料和試劑20-21
• 2 實(shí)驗(yàn)方法21-28
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-33
• 4 討論33-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 全文總結(jié)38-39
• 文獻(xiàn)綜述 鹽霉素抗腫瘤活性研究進(jìn)展39-52
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 致謝52-53
• 碩士期間發(fā)表的論文53

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張鵬偉;儲(chǔ)消和;郭美錦;儲(chǔ)炬;莊英萍;張嗣良;;響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化鹽霉素發(fā)酵條件[J];中國(guó)抗生素雜志;2010年02期

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6 記者 陳青 通訊員 余飛;鹽霉素可抑制肝胰腺腫瘤生長(zhǎng)[N];文匯報(bào);2013年

7 ;鹽霉素的應(yīng)用及前景（未完待續(xù)）[N];中國(guó)畜牧水產(chǎn)報(bào);2000年

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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7 劉朋;鹽霉素菌種選育和補(bǔ)油發(fā)酵工藝的優(yōu)化[D];華東理工大學(xué);2011年

8 吳丹心;鹽霉素抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

9 張郭娟;鹽霉素通過(guò)調(diào)節(jié)β-catenin和mTOR信號(hào)通路抗前列腺癌干細(xì)胞的機(jī)理[D];南華大學(xué);2014年

10 蘇小康;鹽霉素對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2體外抑制作用的研究[D];南華大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：980233