本文關(guān)鍵詞：鹽霉素對鼻咽癌CNE-2干細胞放療敏感性的影響

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【摘要】：實驗?zāi)康模禾接扄}霉素對鼻咽癌CNE-2干細胞放療敏感性的影響。實驗方法：第一部分：CNE-2細胞無血清培養(yǎng)培養(yǎng),并鑒定CNE-2細胞微球干細胞特性鼻咽癌CNE-2細胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng),鏡下觀察其細胞形態(tài)；加入SSM培養(yǎng)基觀察CNE-2-CSC分化能力：采用Transwell小室法、流式細胞術(shù)、克隆形成實驗分別檢測其侵襲能力、CD133表達率、細胞增殖能力。第二部分：鹽霉素對鼻咽癌CNE-2干細胞放療敏感性的影響鼻咽癌干細胞無血清培養(yǎng),MTT檢測鹽霉素藥物劑量反應(yīng)及不同放射劑量CNE-2-CSC細胞增殖能力,MTS法檢測細胞抑制率；克隆形成實驗檢測鹽霉素對CNE-2-CSC細胞的放射增敏作用；采用RT-PCR、Western blot法檢測人鼻咽癌干細胞中Rad51、Ku70、Ku80基因及蛋白表達水平。實驗結(jié)果：第一部分：無血清培養(yǎng)的CNE-2-CSC細胞鏡下呈球狀懸浮生長,折光性強；CNE-2-SCS加入SSM培養(yǎng)基,細胞分化出與CNE-2細胞形態(tài)相似的細胞；與普通CNE-2細胞相比,CNE-2-CSC具有較強的侵襲能力,(142±7)／視野VS(63±8)／視野,P0.01；高表達CD133,其陽性表達率分別為(98.29±1.28)%和(1.58±0.28)%,P0.01：CNE-2-CSC細胞具有較強的自我增殖能力,克隆形成數(shù)明顯高于CNE-2細胞。第二部分：MTT法檢測出鹽霉素IC50=3.026μM, SF2μM=62.4±3.3%,6MV-X射線LD50=8.226Gy, SF6Gy=75.7±1.89%.鹽霉素聯(lián)合射線處理組細胞抑制率比單用鹽霉素組、單用X射線照射組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)�？寺⌒纬蓪嶒烇@示鹽霉素降低了受照射后CNE-2-CSC細胞的克隆形成率,根據(jù)擬合存活曲線計算出放射生物學參數(shù)提示鹽霉素提高了放射敏感性,單擊多靶模型計算反射增敏比為1.345。鹽霉素聯(lián)合射線組鼻咽癌干細胞Rad51、Ku70和Ku80 mRNA表達水平明顯低于射線組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。鹽霉素聯(lián)合射線組鼻咽癌干細胞Rad51、Ku70口Ku80蛋白表達水平顯著低于單獨射線組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論： CNE-2干細胞培養(yǎng)成功,并具有較強的侵襲能力、增殖能力和高表達CD133。鹽霉素聯(lián)合放療能夠明顯抑制人鼻咽癌CNE-2干細胞增殖、并抑制細胞中Rad51、Ku70和Ku80的基因及蛋白表達,這表明鹽霉素對針對鼻咽癌干細胞放療具有協(xié)同作用,其機制可能是通過阻止DNA修復(fù)實現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：鹽霉素 鼻咽癌 干細胞 放療敏感性
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-13
• 第一部分 CNE-2細胞無血清培養(yǎng)并鑒定CNE-2細胞微球干細胞特性13-20
• 1 材料和試劑13-14
• 2 實驗方法14-16
• 3 實驗結(jié)果16-19
• 4 討論19-20
• 第二部分 鹽霉素對鼻咽癌干細胞放療敏感性的影響20-35
• 1 材料和試劑20-21
• 2 實驗方法21-28
• 3 實驗結(jié)果28-33
• 4 討論33-35
• 參考文獻35-38
• 全文總結(jié)38-39
• 文獻綜述 鹽霉素抗腫瘤活性研究進展39-52
• 參考文獻46-52
• 致謝52-53
• 碩士期間發(fā)表的論文53

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本文編號：980233