IL-17對脈絡(luò)膜內(nèi)皮細胞增殖、移行及小管成形的影響
本文關(guān)鍵詞:IL-17對脈絡(luò)膜內(nèi)皮細胞增殖、移行及小管成形的影響
更多相關(guān)文章: IL-17 CECs 增殖 移行 管腔形成 細胞骨架重構(gòu)
【摘要】:目的:探討白介素(interleukin, IL)-17對人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞(choroidal endothelial cells, CECs)增殖,移行及管腔形成的影響。方法:1.在傳統(tǒng)的消化法,過濾法的基礎(chǔ)上,采用CD31免疫磁珠原代分離培養(yǎng)人的CECs,倒置相差顯微鏡下觀察CECs的形態(tài)。細胞免疫熒光法檢測CECs血管性血友病因子(Von Willebrand factor,WVF)因子的表達,流式細胞術(shù)(flow cytometry, FCM)檢測CECs的CD31的表達。2.細胞免疫熒光法及FCM檢測人CECs的IL-17受體(IL-17recepter, IL-17R)A及IL-17RC的表達。3.水溶性四唑鹽(water-soluble tetrazolium, WST-1)比色實驗檢測IL-17對人CECs增值的影響。細胞Transwell趨化實驗以及細胞劃痕愈合實驗檢測IL-17對人CECs移行的影響。利用Matrigel基質(zhì)膠管腔形成實驗觀察IL-17對人CECs管腔形成的影響。4.應(yīng)用細胞免疫熒光染色觀察IL-17對人CECS細胞骨架重構(gòu)的影響。結(jié)果:1.采用CD31免疫磁珠法培養(yǎng)純化CECs,經(jīng)免疫熒光鑒定其WVF因子表達陽性,經(jīng)FCM檢測其CD31表達率達95%以上,獲得了活力強、純度高、可持續(xù)傳代的CECs。2.通過細胞免疫熒光法及FCM檢測人CECs表達低IL-17RA及高表達IL-17RC3.IL-17對人CECs增殖沒有明顯的影響。IL-17能促進CECs的移行以及管腔形成,并且磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)的抑制劑能抑制人CECs的移行及細胞骨架的重構(gòu)。結(jié)論:在體外,I1-17能通過促進人CECs的移行以及管腔形成表現(xiàn)出其促血管生成效應(yīng)。I1-17促進人CECs的移行是通過PI3K通路引起細胞骨架重構(gòu)而實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:IL-17 CECs 增殖 移行 管腔形成 細胞骨架重構(gòu)
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R774.5
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-6
- 中文摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 前言10-12
- 1. 材料和方法12-21
- 2. 結(jié)果21-25
- 3. 討論25-27
- 全文總結(jié)27-28
- 參考文獻28-32
- 文獻綜述32-45
- 參考文獻38-45
- 致謝45-46
- 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文46
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本文編號:917112
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