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IL-17對(duì)脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖、移行及小管成形的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-25 11:43

  本文關(guān)鍵詞:IL-17對(duì)脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖、移行及小管成形的影響


  更多相關(guān)文章: IL-17 CECs 增殖 移行 管腔形成 細(xì)胞骨架重構(gòu)


【摘要】:目的:探討白介素(interleukin, IL)-17對(duì)人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(choroidal endothelial cells, CECs)增殖,移行及管腔形成的影響。方法:1.在傳統(tǒng)的消化法,過(guò)濾法的基礎(chǔ)上,采用CD31免疫磁珠原代分離培養(yǎng)人的CECs,倒置相差顯微鏡下觀察CECs的形態(tài)。細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)CECs血管性血友病因子(Von Willebrand factor,WVF)因子的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry, FCM)檢測(cè)CECs的CD31的表達(dá)。2.細(xì)胞免疫熒光法及FCM檢測(cè)人CECs的IL-17受體(IL-17recepter, IL-17R)A及IL-17RC的表達(dá)。3.水溶性四唑鹽(water-soluble tetrazolium, WST-1)比色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-17對(duì)人CECs增值的影響。細(xì)胞Transwell趨化實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-17對(duì)人CECs移行的影響。利用Matrigel基質(zhì)膠管腔形成實(shí)驗(yàn)觀察IL-17對(duì)人CECs管腔形成的影響。4.應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光染色觀察IL-17對(duì)人CECS細(xì)胞骨架重構(gòu)的影響。結(jié)果:1.采用CD31免疫磁珠法培養(yǎng)純化CECs,經(jīng)免疫熒光鑒定其WVF因子表達(dá)陽(yáng)性,經(jīng)FCM檢測(cè)其CD31表達(dá)率達(dá)95%以上,獲得了活力強(qiáng)、純度高、可持續(xù)傳代的CECs。2.通過(guò)細(xì)胞免疫熒光法及FCM檢測(cè)人CECs表達(dá)低IL-17RA及高表達(dá)IL-17RC3.IL-17對(duì)人CECs增殖沒(méi)有明顯的影響。IL-17能促進(jìn)CECs的移行以及管腔形成,并且磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)的抑制劑能抑制人CECs的移行及細(xì)胞骨架的重構(gòu)。結(jié)論:在體外,I1-17能通過(guò)促進(jìn)人CECs的移行以及管腔形成表現(xiàn)出其促血管生成效應(yīng)。I1-17促進(jìn)人CECs的移行是通過(guò)PI3K通路引起細(xì)胞骨架重構(gòu)而實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:IL-17 CECs 增殖 移行 管腔形成 細(xì)胞骨架重構(gòu)
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R774.5
【目錄】:
  • 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
  • 中文摘要6-8
  • ABSTRACT8-10
  • 前言10-12
  • 1. 材料和方法12-21
  • 2. 結(jié)果21-25
  • 3. 討論25-27
  • 全文總結(jié)27-28
  • 參考文獻(xiàn)28-32
  • 文獻(xiàn)綜述32-45
  • 參考文獻(xiàn)38-45
  • 致謝45-46
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文46

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3 于s,

本文編號(hào):917112


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