BAMBI過表達(dá)抑制缺氧誘導(dǎo)的恒河猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移
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【摘要】:目的探討過表達(dá)激活素膜結(jié)合抑制劑(bmp and activin membrane-bound inhibitor,BAMBI)對(duì)缺氧誘導(dǎo)的恒河猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A)增殖和遷移的影響。方法將RF/6A細(xì)胞分為四組:正常對(duì)照組、缺氧組、缺氧+pF LAG組和缺氧+BAMBI組。Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中BAMBI的表達(dá),倒置顯微鏡觀察各組細(xì)胞形態(tài)和密度,CCK-8法和流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖和周期情況,Transwell檢測(cè)細(xì)胞的遷移,Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比,缺氧組細(xì)胞數(shù)目明顯增多,增殖增加,培養(yǎng)120 h后,對(duì)照組細(xì)胞增殖倍數(shù)為5.00±0.28,缺氧組為7.64±0.32(P0.001);缺氧組S期進(jìn)程顯著加快,占(10.44±2.61)%,對(duì)照組S期占(20.79±2.23)%(P0.05);細(xì)胞遷移增加,缺氧組細(xì)胞數(shù)目為33.80±4.20,對(duì)照組為8.35±2.50(P0.05),TGF-β1和VEGF的表達(dá)明顯增加(P0.05)。缺氧+BAMBI組:缺氧處理的細(xì)胞轉(zhuǎn)染pF LAG-BAMBI后,與缺氧組相比,BAMBI蛋白表達(dá)顯著上調(diào),細(xì)胞數(shù)目明顯減少,增殖顯著降低,培養(yǎng)120 h后,增殖倍數(shù)為5.53±0.27(P0.001),細(xì)胞S期受到阻滯,占(18.75±2.92)%,遷移顯著下降,數(shù)目為13.00±2.80(P0.05),TGF-β1和VEGF的表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論過表達(dá)BAMBI可抑制缺氧誘導(dǎo)的RF/6A細(xì)胞的增殖和遷移,進(jìn)而有望抑制視網(wǎng)膜血管新生。
【作者單位】: 陜西省眼科診療中心 西安市第四醫(yī)院眼科 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬廣仁醫(yī)院眼科;
【關(guān)鍵詞】: 視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 缺氧 BAMBI 增殖 遷移
【分類號(hào)】:R774.1
【正文快照】: 年齡相關(guān)性黃斑變性所致的脈絡(luò)膜新生血管是I雙酶切PCR擴(kuò)增產(chǎn)物以及p FLAG質(zhì)粒,收集目的老年人視力受損的主要原因[1],而由糖尿病視網(wǎng)膜片段后進(jìn)行連接、篩選、質(zhì)粒提取,并進(jìn)行雙酶切鑒病變導(dǎo)致的視網(wǎng)膜新生血管是年輕人致盲的首要原定與測(cè)序鑒定。LipofectamineTM-2000與DNA
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,本文編號(hào):867996
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