本文關(guān)鍵詞：質(zhì)膜鈣ATP酶異構(gòu)體1~3在新生大鼠耳蝸基底膜的表達(dá)

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【摘要】：目的通過Western blot方法檢測質(zhì)膜鈣ATP酶異構(gòu)體1~3(plasma membrane Ca2+-ATPase isoforms 1~3,PMCA1~3)在新生大鼠耳蝸基底膜(basilar membrane,BM)的表達(dá),并檢測PMCA2在單個新生大鼠耳蝸毛細(xì)胞纖毛的表達(dá)量。方法 1取出生后2天(P2)和8天(P8)健康SD大鼠各4只,斷頭后分離出BM,提取總蛋白,分別取20μg,通過Western blot法檢測BM的PMCA1~3表達(dá)。2取P2和P8大鼠BM總蛋白3μg,通過Western blot方法檢測BM的PMCA2的表達(dá)。3取4只P8大鼠,分離出BM,提取總蛋白,分別取5、10、20μg總蛋白并取100、400和800ng牛血清白蛋白(BSA)作為對照組,跑完電泳后將膠分為2部分,部分泳道用于SYPRO染膠,其余泳道用于Western blot檢測PMCA2的表達(dá)。結(jié)果 1在20μg的P2和P8大鼠BM總蛋白中,PMCA1僅有微弱的表達(dá)(分別為0.126±0.024、0.131±0.012),PMCA2表達(dá)水平較高(分別為4.16±0.528、4.25±0.319),PMCA3幾乎沒有表達(dá)(均為0),三者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2在3μg的P2和P8大鼠BM總蛋白中,P8大鼠PMCA2的表達(dá)水平(4.571±0.336)高于P2大鼠(3.622±0.285),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3PMCA2在單個P8大鼠BM的含量約為2.5ng。結(jié)論 PMCA1~3在新生大鼠耳蝸BM的表達(dá)水平不同,PMCA2表達(dá)量最大,這可能是由于耳蝸毛細(xì)胞對這幾種PMCA亞型有不同的Ca2+調(diào)節(jié)需求。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;湖北文理學(xué)院附屬襄陽市中心醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;
【關(guān)鍵詞】： 質(zhì)膜鈣ATP酶異構(gòu)體 質(zhì)膜鈣ATP酶異構(gòu)體 質(zhì)膜鈣ATP酶異構(gòu)體 基底膜 耳蝸
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(81300827)資助
【分類號】：R764
【正文快照】：

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