發(fā)布時間：2017-09-06 13:29

  本文關(guān)鍵詞：GPR55表達(dá)與人喉鱗狀細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系

  更多相關(guān)文章： GPR55 喉鱗癌 侵襲 轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的:從mRNA和蛋白水平檢測孤兒GPR55(orphan receptor GPR55)在人喉鱗癌組織及癌旁組織的表達(dá)情況,并分析GPR55與不同患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。通過siRNA干擾GPR55的表達(dá),檢測GPR55沉默后對人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響。方法:1、采用RT-PCR、Western Blot和免疫組化方法檢測GPR55在人喉鱗癌組織及癌旁組織的表達(dá)情況,并分析GPR55蛋白表達(dá)水平與不同患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。2、設(shè)計(jì)并合成特異性siRNA,采用脂質(zhì)體法瞬時轉(zhuǎn)染人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞。通過RT-PCR方法檢測不同分組中GPR55 m RNA的水平,篩選出沉默效果最佳的片段。采用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測GPR55沉默后Hep-2細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力的變化。結(jié)果:1、GPR55在人喉鱗癌組織中以中等陽性或強(qiáng)陽性表達(dá)為主,而癌旁組織中則以陰性或弱陽性表達(dá)為主,并且GPR55的表達(dá)與喉鱗癌的分化程度和頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率有關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GPR55與患者性別、年齡、臨床分型、PS評分無關(guān)。2、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示siRNA沉默GPR55后,Hep-2細(xì)胞平均穿膜數(shù)量比對照組明顯減少,P0.05;劃痕實(shí)驗(yàn)顯示對照組12h和24h的Hep-2細(xì)胞遷移率明顯較siRNA-GPR55-3轉(zhuǎn)染組高,P0.01。結(jié)論:1、GPR55在喉鱗癌組織中高表達(dá),并且與分化程度和頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率有關(guān)。2、siRNA沉默GPR55后明顯抑制Hep-2細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。
【關(guān)鍵詞】：GPR55 喉鱗癌 侵襲 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料和方法13-30
• 2.1 材料13-18
• 2.1.1 標(biāo)本來源13
• 2.1.2 細(xì)胞來源13
• 2.1.3 主要器械與儀器13-14
• 2.1.4 主要試劑及耗材14-15
• 2.1.5 主要試劑配制15-18
• 2.2 方法18-29
• 2.2.1 RT-PCR檢測人喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55 mRNA的表達(dá)情況18-20
• 2.2.2 western blot檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55蛋白的表達(dá)情況20-22
• 2.2.3 免疫組織化學(xué)檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55的表達(dá)情況22-23
• 2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)23-26
• 2.2.5 siRNA-GPR55的設(shè)計(jì)及細(xì)胞轉(zhuǎn)染26-27
• 2.2.6 RT-PCR檢測Hep-2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染后GPR55 m RNA的表達(dá)，，篩選最佳沉默序列27-28
• 2.2.7 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測siRNA沉默GPR55對Hep-2 細(xì)胞侵襲能力的影響28-29
• 2.2.8 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測siRNA沉默GPR55對Hep-2 細(xì)胞遷移能力的影響29
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-30
• 第3章 結(jié)果30-38
• 3.1 RT-PCR檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55 m RNA的表達(dá)30-31
• 3.1.1 喉鱗癌組織及癌旁組織總RNA完整性的鑒定30
• 3.1.2 RT-PCR檢測結(jié)果30-31
• 3.2 western blot檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55蛋白的表達(dá)31-32
• 3.3 免疫組化檢測喉鱗狀細(xì)胞癌組織及癌旁組織中GPR55的表達(dá)32-33
• 3.4 siRNA轉(zhuǎn)染Hep-2 細(xì)胞后檢測轉(zhuǎn)染效率33-34
• 3.5 siRNA干擾GPR55對Hep-2 細(xì)胞GPR55 mRNA表達(dá)的影響34-35
• 3.6 siRNA沉默GPR55基因?qū)ep-2 細(xì)胞侵襲能力的影響35-36
• 3.7 siRNA沉默GPR55基因?qū)ep-2 細(xì)胞遷移能力的影響36-38
• 第4章 討論38-42
• 第5章 結(jié)論和展望42-43
• 5.1 結(jié)論42
• 5.2 展望42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果47-48
• 綜述48-59
• 參考文獻(xiàn)56-59

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王大力;楊懷安;王鐵;;尿激酶型纖溶酶原激活劑受體在喉鱗癌中的表達(dá)及意義[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年02期

2 曹峰;徐潔潔;喬明哲;陳曦;陸美萍;汪淵;;喉鱗癌中內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1的表達(dá)及臨床意義[J];江蘇醫(yī)藥;2008年05期

3 劉成;胡金旺;;手術(shù)治療晚期喉鱗癌的優(yōu)勢分析[J];貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年05期

4 張曉晴,劉世喜,周光耀,梁傳余,林代誠,喬小明;抑癌基因p53第5～8外顯子突變與喉鱗癌關(guān)系的研究[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年03期

5 杜波,王蘋,郭曉峰,杜寶東;膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1在喉鱗癌中的表達(dá)[J];耳鼻咽喉頭頸外科;2000年04期

6 張曉晴,林代誠,梁傳余;抑癌基因p53與喉鱗癌[J];華西醫(yī)學(xué);2000年03期

7 王利華,毋桂花,王斌全;P~(73)基因在喉鱗癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究[J];山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年01期

8 王中亮,陳堯,周斌,梁傳余,張林,李瑞祥;血管內(nèi)皮生長因子C在喉鱗癌中的表達(dá)[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年01期

9 馬占龍,鄧紅;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子、凋亡抑制基因蛋白的表達(dá)與喉鱗癌的關(guān)系[J];北京醫(yī)學(xué);2004年01期

10 汪照炎,王家東;喉鱗癌血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及其臨床意義[J];中國耳鼻咽喉顱底外科雜志;2004年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林山;鄭海洲;汪審清;戴利波;;喉鱗癌血管生成、凋亡的表達(dá)及其相關(guān)性研究[A];2005年浙江省耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

2 王燕;陶澤璋;陳始明;肖伯奎;;多基因共沉默治療喉鱗癌的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會議論文匯編（上）[C];2007年

3 劉勇;李果;粟忠武;邱元正;張欣;余長云;任舒靈;田勇泉;;星形膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)基因-1在喉鱗癌中的表達(dá)及其臨床意義[A];全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

4 朱卉;于振坤;黃志剛;房居高;范爾鐘;李穎;;喉鱗癌上皮間質(zhì)化現(xiàn)象動態(tài)觀察[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 曾泉;胡國華;朱江;柯霞;;喉鱗癌的中央?yún)^(qū)頸淋巴結(jié)清掃術(shù)[A];全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

6 王超;金德均;王宇;;重組人內(nèi)皮抑素抑制喉鱗癌生長作用機(jī)制的初討[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會議論文匯編（下）[C];2007年

7 呂團(tuán)偉;翟妍;劉冰;;喉鱗癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及雜合性丟失的研究[A];吉林省第六屆生命科學(xué)大型學(xué)術(shù)報(bào)告會論文集[C];2008年

8 朱剛才;蔡耿明;李果;劉勇;張欣;崔湘凝;譚浩蕾;余長云;黃東海;;泛素蛋白在轉(zhuǎn)移性喉鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義[A];全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

9 陳立;梁傳余;歐華;溫蓓;李國義;;基質(zhì)金屬蛋白酶-2活性在人喉鱗癌浸潤轉(zhuǎn)移中的作用[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

10 卓賢露;向召蘭;姜振東;李琪;袁偉;;Livin在喉癌中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李立安;KAI1基因與喉鱗癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳斌;CCL20在喉鱗癌發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)功能的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 張森;喉鱗癌中hsa-miR-193b的表達(dá)及其對腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

3 韓瑞珠;細(xì)胞凋亡相關(guān)基因在喉鱗癌中的表達(dá)及意義[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

4 張宗敏;轉(zhuǎn)錄組異常改變與喉鱗癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

5 張?jiān)倥d;喉鱗癌相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)研究及腫瘤標(biāo)志物的鑒定[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

6 李亮;區(qū)域癌化與喉鱗癌外科手術(shù)切緣的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

7 龔洪立;喉黏膜部位微生物分析及其與喉鱗癌關(guān)系的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

8 徐鷗;喉鱗癌微環(huán)境乏氧的客觀評估及有效改善乏氧對喉鱗癌化療抵抗的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

9 袁彤;BNIP3基因表達(dá)及其啟動子超甲基化與喉鱗癌發(fā)生發(fā)展的研究[D];吉林大學(xué);2008年

10 張海利;MTA1基因表達(dá)與喉鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及其調(diào)控作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 詹雅光;喉鱗癌中mir-193b的表達(dá)及其對Hep-2細(xì)胞增殖的影響[D];延邊大學(xué);2015年

2 劉騰飛;DKK1、SFRP4和Wnt1在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙穎;趨化因子CXCL12及其受體CXCR4、CXCR7在喉鱗癌組織中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 武曉龍;喉癌中VASH1與微血管密度、微淋巴管密度的關(guān)系及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 張晨;AMFR和NID-2在喉鱗癌組織的表達(dá)及臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 王紫媛;GPR55表達(dá)與人喉鱗狀細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

7 唐晨漪;HIF-1α和凋亡抑制蛋白Livin在喉鱗癌中的表達(dá)和意義[D];南華大學(xué);2015年

8 劉舟;MTA1靶向shRNA對裸鼠喉鱗癌移植瘤生長和轉(zhuǎn)移能力的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

9 李靖;長鏈非編碼RNA-IRAIN在喉鱗癌中的表達(dá)和意義[D];吉林大學(xué);2016年

10 李啟利;miR-21在人喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及對喉鱗癌細(xì)胞增殖和凋亡機(jī)制的研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

本文編號：803397