本文關(guān)鍵詞：GPR55表達與人喉鱗狀細胞癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系

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【摘要】：目的:從mRNA和蛋白水平檢測孤兒GPR55(orphan receptor GPR55)在人喉鱗癌組織及癌旁組織的表達情況,并分析GPR55與不同患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。通過siRNA干擾GPR55的表達,檢測GPR55沉默后對人喉鱗癌Hep-2細胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響。方法:1、采用RT-PCR、Western Blot和免疫組化方法檢測GPR55在人喉鱗癌組織及癌旁組織的表達情況,并分析GPR55蛋白表達水平與不同患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。2、設(shè)計并合成特異性siRNA,采用脂質(zhì)體法瞬時轉(zhuǎn)染人喉鱗癌Hep-2細胞。通過RT-PCR方法檢測不同分組中GPR55 m RNA的水平,篩選出沉默效果最佳的片段。采用Transwell侵襲實驗和劃痕實驗檢測GPR55沉默后Hep-2細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力的變化。結(jié)果:1、GPR55在人喉鱗癌組織中以中等陽性或強陽性表達為主,而癌旁組織中則以陰性或弱陽性表達為主,并且GPR55的表達與喉鱗癌的分化程度和頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率有關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。GPR55與患者性別、年齡、臨床分型、PS評分無關(guān)。2、Transwell侵襲實驗顯示siRNA沉默GPR55后,Hep-2細胞平均穿膜數(shù)量比對照組明顯減少,P0.05;劃痕實驗顯示對照組12h和24h的Hep-2細胞遷移率明顯較siRNA-GPR55-3轉(zhuǎn)染組高,P0.01。結(jié)論:1、GPR55在喉鱗癌組織中高表達,并且與分化程度和頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率有關(guān)。2、siRNA沉默GPR55后明顯抑制Hep-2細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。
【關(guān)鍵詞】：GPR55 喉鱗癌 侵襲 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料和方法13-30
• 2.1 材料13-18
• 2.1.1 標本來源13
• 2.1.2 細胞來源13
• 2.1.3 主要器械與儀器13-14
• 2.1.4 主要試劑及耗材14-15
• 2.1.5 主要試劑配制15-18
• 2.2 方法18-29
• 2.2.1 RT-PCR檢測人喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55 mRNA的表達情況18-20
• 2.2.2 western blot檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55蛋白的表達情況20-22
• 2.2.3 免疫組織化學(xué)檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55的表達情況22-23
• 2.2.4 細胞培養(yǎng)23-26
• 2.2.5 siRNA-GPR55的設(shè)計及細胞轉(zhuǎn)染26-27
• 2.2.6 RT-PCR檢測Hep-2 細胞轉(zhuǎn)染后GPR55 m RNA的表達，，篩選最佳沉默序列27-28
• 2.2.7 Transwell侵襲實驗檢測siRNA沉默GPR55對Hep-2 細胞侵襲能力的影響28-29
• 2.2.8 劃痕實驗檢測siRNA沉默GPR55對Hep-2 細胞遷移能力的影響29
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析29-30
• 第3章 結(jié)果30-38
• 3.1 RT-PCR檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55 m RNA的表達30-31
• 3.1.1 喉鱗癌組織及癌旁組織總RNA完整性的鑒定30
• 3.1.2 RT-PCR檢測結(jié)果30-31
• 3.2 western blot檢測喉鱗癌組織及癌旁組織中GPR55蛋白的表達31-32
• 3.3 免疫組化檢測喉鱗狀細胞癌組織及癌旁組織中GPR55的表達32-33
• 3.4 siRNA轉(zhuǎn)染Hep-2 細胞后檢測轉(zhuǎn)染效率33-34
• 3.5 siRNA干擾GPR55對Hep-2 細胞GPR55 mRNA表達的影響34-35
• 3.6 siRNA沉默GPR55基因?qū)ep-2 細胞侵襲能力的影響35-36
• 3.7 siRNA沉默GPR55基因?qū)ep-2 細胞遷移能力的影響36-38
• 第4章 討論38-42
• 第5章 結(jié)論和展望42-43
• 5.1 結(jié)論42
• 5.2 展望42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻44-47
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果47-48
• 綜述48-59
• 參考文獻56-59

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