應(yīng)用流式細(xì)胞分選技術(shù)高效純化大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及其鑒定
發(fā)布時(shí)間:2017-09-05 10:50
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【摘要】:目的探索一種高效、穩(wěn)定的純化視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC)方法。方法結(jié)合免疫抗體吸附方法,利用流式細(xì)胞儀分離新生大鼠RGC,并采用流式細(xì)胞及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測分選RGC的純度。結(jié)果新生SD大鼠視網(wǎng)膜混合細(xì)胞為(4.37±0.22)×10~6個(gè)/視網(wǎng)膜,通過流式細(xì)胞儀分離出Thy1.1陽性的RGC為(5.70±0.21)×10~3個(gè)/視網(wǎng)膜;熒光定量PCR及流式細(xì)胞分析結(jié)果均顯示此方法分離的RGC細(xì)胞純度高,可達(dá)90.11%,且純度高低可控。結(jié)論通過流式細(xì)胞分選技術(shù)可獲得較高純度的RGC。該方法分選速度快、穩(wěn)定,為深入開展RGC的體外研究,提供了一種理想的、基于流式細(xì)胞儀的細(xì)胞快速分離純化方法。
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心上海市視覺損害與重建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生部近視眼重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 細(xì)胞純化 流式細(xì)胞分選 細(xì)胞鑒定
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81470624)
【分類號】:R774.1
【正文快照】: 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cell,RGC)是視網(wǎng)膜內(nèi)唯一連接腦部并將視網(wǎng)膜信息傳遞到大腦的神經(jīng)元[1]。許多疾病可造成RGC的損傷和死亡而導(dǎo)致永久性失明,如青光眼、糖尿病視網(wǎng)膜病變、脫髓鞘性疾病、腫瘤、視神經(jīng)病變、缺血和外傷等[2-4]。盡管目前大量研究致力于RGC損
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1 于鋒;艾毛毛;;喉癌細(xì)胞株Hep-2中側(cè)群細(xì)胞分選條件優(yōu)化[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2014年15期
,本文編號:797553
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