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去整合素echistatin對糖尿病兔晶狀體摘除術后晶體上皮細胞α-SMA蛋白、Ⅳ膠原表達的影響

發(fā)布時間:2017-08-22 14:13

  本文關鍵詞:去整合素echistatin對糖尿病兔晶狀體摘除術后晶體上皮細胞α-SMA蛋白、Ⅳ膠原表達的影響


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【摘要】:目的:后發(fā)性白內障(PCO)是糖尿病性白內障患者術后最常見的眼部并發(fā)癥,目前醫(yī)學界認為,白內障術后產生的細胞外基質(extracellular matrix, ECM)會造成囊膜的混濁。去整合素(disintegrin)是一類小分子多肽,能夠和廣泛存在于各種細胞表面的整合素特異性結合,進而阻止細胞外基質和整合素的粘附。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)糖尿病兔眼晶狀體摘除術(ECLE)后10天為PCO出現(xiàn)的最早時間,6周達到最高峰。去整合素echistatin對體外培養(yǎng)的晶狀體上皮細胞(LECs)的增值,黏附及移形有明顯的抑制作用,且10ug/ml的echistatin在對后發(fā)性白內障的發(fā)生發(fā)展具有抑制作用,且未見對眼內組織有明顯損傷。為進一步探索echistatin抑制糖尿病兔PCO發(fā)展的機制,本實驗采用Western blotting法,觀察在去整合素echistatin干預下糖尿病兔眼PCO模型中晶狀體后囊膜上a-SMA、IV膠原蛋白的改變。方法:常規(guī)建立48只大白兔糖尿病模型后,人為選擇右眼做為手術眼,并實施晶狀體囊外摘除術(extracapsular lens extraction, ECLE)。術中隨機分為兩組(對照組和實驗組)。其中,A組和B組為術后6周對照組和實驗組,C組和D組為術后10天對照組和實驗組。每組12只兔。對照組A、C兔眼囊袋內注入0.2ml蒸餾水,實驗組B、D注入等量濃度為10ug/ml的echistatin。術后每組隨機抽取4只兔子觀察PCO分級后,分別于術后第10天及第6周處死,立刻取出眼球,分離后囊膜組織,應用Western Blotting技術檢測兔后囊膜組織中α-SMA蛋白和Ⅳ膠原表達量。結果:1.PCO分級。術后10天兩組糖尿病兔PCO分級差異無統(tǒng)計學意義(p=0.273),但術后6周時實驗各組PCO分級較對照組明顯降低(p=0.049)。2.α-SMA蛋白和Ⅳ膠原均有表達。α-SMA蛋白A組的相對灰度值為0.419±0.084,B組為0.273±0.096,C組為0.122±0.026,D組為0.077±0.016。Ⅳ膠原A組的相對灰度值為341.983±0.935,B組為89.614±1.135,C組為70.392±1.046,D組為46.526±0.763。3.術后10天α-SMA實驗組和對照組均有少量蛋白表達,但是兩組間的結果并沒有統(tǒng)計學意義(P=0.267),術后6周實驗組α-SMA蛋白表達明顯低于對照組(p=0.029)。術后10天實驗組晶狀體后囊膜上Ⅳ膠原蛋白表達較對照組減少(P=0.035),術后6周實驗組較對照組明顯減少(p=0.007)。結論:去整合素可以有效的抑制α-SMA蛋白和Ⅳ膠原蛋白的表達,其機制可能是去整合素和整合素受體特異性結合,從而抑制了α-SMA蛋白,Ⅳ膠原蛋白的表達,從而抑制了PCO的發(fā)生和發(fā)展。
【關鍵詞】:去整合素 后囊膜渾濁 Ⅳ膠原 α-SMA蛋白 晶狀體摘除術 免疫印跡法
【學位授予單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R587.2;R776.1
【目錄】:
  • 個人簡歷3-5
  • 主要英文縮略詞5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-11
  • 前言11-13
  • 技術路線13-14
  • 1. 材料與方法14-18
  • 1.1 主要材料與試劑14-15
  • 1.2 建模方法15-18
  • 2. 結果18-21
  • 2.1 術后觀察18
  • 2.2 糖尿病兔眼PC0分級18-19
  • 2.3 α-SMA蛋白的蛋白表達19-20
  • 2.4 IV膠原蛋白的表達20-21
  • 3. 討論21-24
  • 結論24-25
  • 參考文獻25-28
  • 綜述28-38
  • 參考文獻34-38
  • 致謝38-39
  • 已發(fā)論文39-53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前10條

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本文編號:719581

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