本文關(guān)鍵詞：黃芪多糖對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE-19抗氧化保護(hù)作用的研究

  更多相關(guān)文章： 黃芪多糖 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 氧化應(yīng)激 過(guò)氧化氫 凋亡 caspase-3

【摘要】：目的應(yīng)用過(guò)氧化氫建立體外人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE-19細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型,并應(yīng)用黃芪多糖(APS)干預(yù),觀察APS對(duì)ARPE-19的抗氧化保護(hù)作用,并通過(guò)細(xì)胞凋亡途徑研究黃芪多糖對(duì)ARPE-19細(xì)胞抗氧化保護(hù)作用的機(jī)制。方法實(shí)驗(yàn)共分三個(gè)部分。第一部分是ARPE-19細(xì)胞的培養(yǎng)以及研究黃芪多糖的安全濃度,體外培養(yǎng)ARPE-19細(xì)胞,給予不同濃度的黃芪多糖干預(yù),通過(guò)MTT檢測(cè)細(xì)胞存活率,并確定合適的黃芪多糖安全濃度。第二部分是應(yīng)用過(guò)氧化氫處理ARPE-19細(xì)胞,制造細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷模型,并確定合適的過(guò)氧化氫濃度。第三部分是應(yīng)用黃芪多糖干預(yù)過(guò)氧化氫處理的ARPE-19細(xì)胞,并應(yīng)用MTT檢測(cè)細(xì)胞存活率,DAPI染色觀察細(xì)胞核的狀態(tài),實(shí)時(shí)細(xì)胞電子分析系統(tǒng)實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),caspase-3檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組caspase-3的表達(dá)水平。結(jié)果1.250μg/ml、500μg/ml和1000μg/ml為黃芪多糖的安全濃度。2.外源性過(guò)氧化氫處理下,ARPE-19細(xì)胞存活率逐漸下降,提示過(guò)氧化氫可以誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷,過(guò)氧化氫的合適作用濃度為200μM。3.過(guò)氧化氫損傷組細(xì)胞皺縮,懸浮細(xì)胞增多,APS干預(yù)后細(xì)胞狀態(tài)改善。過(guò)氧化氫損傷組細(xì)胞存活率比正常對(duì)照組顯著降低(P0.05),不同濃度黃芪多糖干預(yù)后,細(xì)胞存活率升高,與過(guò)氧化氫損傷組相比差異具有顯著地統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。DAPI染色顯示正常細(xì)胞核均勻淡染,過(guò)氧化氫損傷組出現(xiàn)強(qiáng)熒光點(diǎn)和致密的細(xì)胞核,APS處理后凋亡程度減輕。RT-CES顯示APS處理可以減少過(guò)氧化氫造成的細(xì)胞損傷。Caspase-3檢測(cè)發(fā)現(xiàn)過(guò)氧化氫造成細(xì)胞caspase-3水平升高(P0.05),APS處理后caspase-3水平下降(P0.05)。結(jié)論外源性過(guò)氧化氫可誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮ARPE-19氧化應(yīng)激,造成細(xì)胞損傷。APS可降低細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平,減少ARPE-19細(xì)胞損傷,發(fā)揮保護(hù)作用。過(guò)氧化氫誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞凋亡可能與caspase-3有關(guān),可能是通過(guò)降低caspase-3水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：黃芪多糖 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 氧化應(yīng)激 過(guò)氧化氫 凋亡 caspase-3
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R774.1
【目錄】：

• 提要3-4
• ABSTRACT4-8
• 引言8-11
• 第一部分 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的培養(yǎng)和黃芪多糖安全濃度的測(cè)定11-21
• 第一節(jié) 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的培養(yǎng)11-16
• 材料與方法11-14
• 1 主要材料和試劑11
• 2 主要儀器11-12
• 3 方法12-14
• 結(jié)果14
• 討論14-16
• 第二節(jié) 黃芪多糖安全濃度的測(cè)定16-21
• 材料與方法16-19
• 1 主要材料和試劑16
• 2 主要儀器16-17
• 3.方法17-19
• 結(jié)果19-20
• 討論20-21
• 第二部分 過(guò)氧化氫誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡21-28
• 材料與方法21-24
• 1 主要材料和試劑21
• 2 主要儀器21-22
• 3 方法22-24
• 結(jié)果24
• 討論24-28
• 第三部分 黃芪多糖對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡的抗氧化保護(hù)作用28-38
• 材料與方法28-32
• 1 主要材料和試劑28-29
• 2 主要儀器29
• 3.方法29-32
• 結(jié)果32-36
• 討論36-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-49
• 附錄49-50
• 致謝50-51
• 發(fā)表論文51-53
• 附件53-60

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 隆雪明;劉湘新;文利新;;黃芪多糖及其應(yīng)用[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2007年02期

2 蔡莉;朱江;;黃芪多糖研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[J];中國(guó)腫瘤臨床;2007年15期

3 王華付;;黃芪中黃芪多糖含量的測(cè)定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年34期

4 黃東杰;翟翠云;;黃芪多糖的提取方法綜述[J];企業(yè)科技與發(fā)展;2008年22期

5 李淑梅;楊帆;湯波;韓明廣;;太行山黃芪中黃芪多糖的提取工藝[J];光譜實(shí)驗(yàn)室;2008年03期

6 桂紅艷;;黃芪多糖的應(yīng)用[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2008年04期

7 ;‘普瑞森杯’注射用黃芪多糖臨床應(yīng)用有獎(jiǎng)?wù)魑耐ㄖ猍J];中國(guó)腫瘤臨床;2008年10期

8 ;‘普瑞森杯’注射用黃芪多糖臨床應(yīng)用有獎(jiǎng)?wù)魑耐ㄖ猍J];中國(guó)腫瘤臨床;2008年12期

9 張佳蘭;張水鷗;;微波輔助浸提黃芪多糖的工藝研究[J];陜西農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年04期

10 張佳蘭;;超聲波輔助浸提黃芪多糖的工藝研究[J];農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊);2008年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宋淑珍;田亞平;汪德清;王玲;姜輝;董矜;張陽(yáng)東;;黃芪多糖提高免疫力機(jī)理探討[A];第6次全國(guó)微生物學(xué)與免疫學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

2 宋淑珍;田亞平;汪德清;王玲;姜輝;董矜;張陽(yáng)東;;黃芪多糖提高免疫力機(jī)理探討[A];第六屆全國(guó)自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議和海峽兩岸自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

3 宋淑珍;田亞平;汪德清;王玲;姜輝;董矜;張陽(yáng)東;;黃芪多糖對(duì)健康體檢者淋巴細(xì)胞亞群的作用[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 張敬芳;吳勇;王光浩;歐陽(yáng)靜萍;;黃芪多糖對(duì)胰島素信號(hào)調(diào)節(jié)分子蛋白酪氨酸磷酸酶1B的影響[A];全國(guó)血栓/止血與微循環(huán)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 劉立民;柴曄;張連生;;黃芪多糖對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病患者漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞功能的影響[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

6 邵鵬;趙魯杭;;黃芪多糖對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞表型及功能成熟的影響[A];浙江省生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2005年

7 林t，

本文編號(hào)：718237