本文關(guān)鍵詞：532nm激光誘導(dǎo)形覺剝奪性高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管模型的研究

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【摘要】：目的構(gòu)建高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型,研究模型中新生血管的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,并探討micro RNA-21(miR-21)、VEGF、HIF-1α、MMP-2及TIMP-2等因子在高度近視CNV中的作用。方法(1)20只2周齡三色豚鼠隨機(jī)分為形覺剝奪組(n=12)和正常對照組(n=8),其中形覺剝奪組豚鼠右眼進(jìn)行遮蓋。于形覺剝奪前、形覺剝奪后4、6、10、14周分別對兩組豚鼠雙眼進(jìn)行屈光度和眼軸長度測量。通過眼底彩照、FFA、OCT及病理組織學(xué)檢查分析形覺剝奪14周后各組視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜厚度及其形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。(2)60只2周齡三色豚鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=30)與對照組(n=30),實(shí)驗(yàn)組右眼形覺剝奪誘導(dǎo)高度近視。兩組各選取25只豚鼠右眼采用高能量、短曝光時(shí)間的532nm激光光凝視網(wǎng)膜誘導(dǎo)CNV。兩組于激光前、光凝后7d、14d、21d、28d、35d進(jìn)行眼底彩照、FFA、OCT、HE染色檢查,觀察高度近視豚鼠CNV的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,并對兩組FFA所得4級光斑熒光素平均滲漏面積、OCT及HE染色所得平均CNV厚度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。(3)36只2周齡三色豚鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=18)與對照組(n=18),實(shí)驗(yàn)組右眼形覺剝奪誘導(dǎo)高度近視。兩組各選取15只豚鼠右眼行激光光凝視網(wǎng)膜誘導(dǎo)CNV。兩組于激光前、光凝后7d、14d、21d、28d、35d進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢查觀察光凝區(qū)域HIF-1α、VEGF的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測RPE-脈絡(luò)膜-鞏膜復(fù)合物miR-21和HIF-1α、VEGF m RNA表達(dá),并對陽性表達(dá)的積分光密度值和m RNA相對表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。(4)兩組豚鼠分別于激光前、光凝后7d、14d、21d、28d、35d進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢查觀察MMP-2和TIMP-2的表達(dá),RT-PCR檢測RPE-脈絡(luò)膜-鞏膜復(fù)合物MMP-2和TIMP-2 m RNA表達(dá),并對陽性表達(dá)的積分光密度值和m RNA相對表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果(1)豚鼠形覺剝奪后隨觀察時(shí)間延長剝奪眼近視屈光度逐漸增高,10周后可達(dá)-10.00D以上的超高度近視,14周后近視度數(shù)更高,平均屈光度為-16.48±2.14D,個(gè)別眼可達(dá)-20.00D。眼軸長度及玻璃體腔深度也相應(yīng)延長。形覺剝奪超高度近視眼視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜較對照組均明顯變薄且形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生病理性改變。(2)FFA、OCT及HE染色檢查顯示高度近視組CNV于光凝后7d出現(xiàn),21d達(dá)到高峰,35d略有減少;對照組CNV于光凝后14d形成,21d達(dá)到高峰,35d明顯減少。光凝后各觀察時(shí)間點(diǎn),高度近視組4級光斑熒光素平均滲漏面積及平均CNV厚度明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均0.05);21d與35d兩組分別組內(nèi)比較顯示,高度近視組無顯著性差異(p0.05),而對照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(3)免疫組化及PCR結(jié)果顯示光凝后高度近視組和對照組miR-21、HIF-1α、VEGF表達(dá)均明顯上調(diào),miR-21于光凝后7d、HIF-1α、VEGF于光凝后14d時(shí)分別達(dá)到表達(dá)高峰。各觀察時(shí)間點(diǎn)高度近視組HIF-1α、VEGF陽性表達(dá)的積分光密度值均明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均0.05);HIF-1α、VEGF m RNA和miR-21相對表達(dá)量也均較對照組有不同程度的升高。(4)免疫組化及PCR結(jié)果顯示光凝后高度近視組和對照組MMP-2和TIMP-2表達(dá)均明顯上調(diào),MMP-2于光凝后21d、TIMP-2于光凝后28d時(shí)表達(dá)高峰。激光前及光凝后各觀察時(shí)間點(diǎn),高度近視組MMP-2陽性表達(dá)的積分光密度值和m RNA相對表達(dá)量均明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均0.05);而激光前高度近視組TIMP-2表達(dá)較對照組明顯減少(p0.05),光凝后各時(shí)間點(diǎn)兩組TIMP-2表達(dá)無顯著性差異(p值均0.05)。結(jié)論(1)應(yīng)用遮蓋法對低齡豚鼠進(jìn)行長期單眼形覺剝奪可誘導(dǎo)超高度近視形成,10周后達(dá)-10.00D以上;超高度近視眼視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜明顯變薄,脈絡(luò)膜和鞏膜結(jié)構(gòu)紊亂,視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)中外層變薄最為顯著,感光細(xì)胞受損,推測其對超高度近視的發(fā)生起重要作用。(2)應(yīng)用532nm激光可誘導(dǎo)高度近視豚鼠CNV形成并可作為病理性高度近視的實(shí)驗(yàn)研究模型,該模型具備熒光素持續(xù)滲漏時(shí)間可達(dá)1月之久的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。高度近視CNV較對照組形成早、退變慢,新生血管發(fā)生率及發(fā)生程度更高。(3)miR-21、VEGF、HIF-1α與高度近視CNV形成密切相關(guān),且可能互相作用共同促進(jìn)高度近視CNV的形成。miR-21作為一種促血管生成基因可能通過HIF-1α-VEGF信號通路間接促進(jìn)高度近視CNV的形成。(4)MMP-2和TIMP-2與高度近視CNV形成密切相關(guān),MMP-2與TIMP-2表達(dá)平衡紊亂可能參與高度近視CNV的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：高度近視 脈絡(luò)膜新生血管 豚鼠 病理組織學(xué) microRNA-21 低氧誘導(dǎo)因子-1 血管內(nèi)皮生長因子 基質(zhì)金屬蛋白酶 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R778.11
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-13
• 英文縮寫索引13-14
• 緒論14-17
• 第一部分 豚鼠行覺剝奪性超高度近視模型的建立及形態(tài)學(xué)研究17-29
• 1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 2 實(shí)驗(yàn)方法18-21
• 3 結(jié)果21-25
• 4 討論25-28
• 5 章節(jié)小結(jié)28-29
• 第二部分 高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管模型的建立及評估29-39
• 1 實(shí)驗(yàn)材料29
• 2 實(shí)驗(yàn)方法29-31
• 3 結(jié)果31-36
• 4 討論36-38
• 5 章節(jié)小結(jié)38-39
• 第三部分 MicroR-21、HIF-1α、VEGF在高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管模型中的表達(dá)分析39-53
• 1 實(shí)驗(yàn)材料40-41
• 2 實(shí)驗(yàn)方法41-45
• 3 結(jié)果45-50
• 4 討論50-52
• 5 章節(jié)小結(jié)52-53
• 第四部分 MMP-2、TIMP-2 在高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管模型中的表達(dá)分析53-60
• 1 實(shí)驗(yàn)材料53-54
• 2 實(shí)驗(yàn)方法54
• 3 結(jié)果54-58
• 4 討論58-59
• 5 章節(jié)小結(jié)59-60
• 全文總結(jié)60
• 問題及展望60-61
• 參考文獻(xiàn)61-69
• 致謝69-70
• 攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表的論文70

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2 吳予;;如何治療兒童高度近視[J];中國眼鏡科技雜志;2009年01期

3 胡誕寧;高度近視的遺傳規(guī)律探討[J];遺傳學(xué)報(bào);1979年01期

4 胡誕寧;;高度近視的遺傳規(guī)律探討[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;1979年08期

5 張德秀，史傳衣，張林;高度近視的慢性單純性青光眼32例分析[J];西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(中文版);1996年01期

6 張健;;高度近視患者能獻(xiàn)血嗎[J];求醫(yī)問藥;2008年08期

7 寄華;高度近視 慎防失明[J];當(dāng)代礦工;1999年04期

8 孫濤,王玲,班梅,張應(yīng)進(jìn);準(zhǔn)分子激光角膜原位磨鑲術(shù)治療高度近視療效分析[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年05期

9 朱靖,張曉燕;準(zhǔn)分子激光原位角膜磨鑲術(shù)治療高度近視[J];眼科新進(jìn)展;2000年06期

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1 胡誕寧;;我國近年高度近視增加是否會導(dǎo)致近視并發(fā)征的增多[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

2 王幼生;彭躍崧;;高度近視的辯證分析[A];全國首屆中青年中醫(yī)眼科學(xué)術(shù)研討會資料匯編[C];1996年

3 谷寅;胡珊珊;;準(zhǔn)分子激光原位角膜磨鑲術(shù)治療高度近視的臨床療效觀察[A];2007年浙江省眼科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

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7 李，

本文編號：710382