本文關(guān)鍵詞：利用內(nèi)源性感光蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)給光雙極細(xì)胞治療視網(wǎng)膜退行性疾病

  更多相關(guān)文章： 視網(wǎng)膜退行性疾病 基因治療 內(nèi)源性感光蛋白 黑視素 視紫質(zhì) 給光型雙極細(xì)胞

【摘要】：視網(wǎng)膜退行性疾病包括視網(wǎng)膜色素變性、年齡相關(guān)性黃斑變性等,嚴(yán)重威脅人類視力健康。這類疾病中,感光細(xì)胞變性凋亡,最終導(dǎo)致視覺喪失。雖然目前有不少方案來試圖減緩視網(wǎng)膜退變或恢復(fù)患者的視覺,在臨床上仍無長(zhǎng)期有效的防治辦法。近期的研究將Ch R2和Np HR等外源性感光蛋白導(dǎo)入退變視網(wǎng)膜的剩余神經(jīng)元中,使其直接對(duì)光照產(chǎn)生反應(yīng),在一定程度上恢復(fù)了視網(wǎng)膜退變動(dòng)物模型rd1小鼠的視覺功能,但在光感受蛋白和下級(jí)靶神經(jīng)元的選擇上仍有明顯不足。本研究采用光敏度更高的內(nèi)源性感光蛋白黑視素或視紫質(zhì),通過在體電穿孔技術(shù),將這些基因定向轉(zhuǎn)導(dǎo)至給光雙極細(xì)胞。建立穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率后,我們通過電生理和視覺行為學(xué)的方法檢測(cè)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后rd1小鼠的對(duì)光反應(yīng)及視覺行為的恢復(fù)情況。結(jié)果表明:黑視素蛋白或視紫質(zhì)蛋白均能特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)入給光雙極細(xì)胞中并表達(dá)。當(dāng)rd1小鼠轉(zhuǎn)導(dǎo)黑視素后,視網(wǎng)膜電位中來自給光雙極細(xì)胞的b波以及rd1小鼠對(duì)明暗辨識(shí)的能力均有所恢復(fù)。雖然目前在基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的給光雙極細(xì)胞上還未記錄到光反應(yīng),但在多個(gè)節(jié)細(xì)胞上記錄到了明顯的來自上游雙極細(xì)胞的光反應(yīng)。因此,我們的結(jié)果提示基因轉(zhuǎn)導(dǎo)黑視素至給光雙極細(xì)胞可以有效地恢復(fù)視網(wǎng)膜退變小鼠的視覺功能�；蜣D(zhuǎn)導(dǎo)視紫質(zhì)的初步實(shí)驗(yàn)未見明顯治療效果。
【關(guān)鍵詞】：視網(wǎng)膜退行性疾病 基因治療 內(nèi)源性感光蛋白 黑視素 視紫質(zhì) 給光型雙極細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R774.1
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• 英文摘要4-7
• 1 前言7-19
• 1.1 視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)及視覺傳導(dǎo)通路7-9
• 1.2 視網(wǎng)膜退行性疾病9-11
• 1.3 感光蛋白11-14
• 1.4 在體電穿孔技術(shù)14-15
• 1.5 視網(wǎng)膜電生理記錄15-16
• 1.6 視覺行為學(xué)16-17
• 1.7 研究?jī)?nèi)容和意義17-19
• 2 材料與方法19-33
• 2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線19-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備20-21
• 2.4 主要實(shí)驗(yàn)材料和試劑21-22
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法和步驟22-33
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-45
• 3.1 黑視素基因成功轉(zhuǎn)導(dǎo)給光雙極細(xì)胞并表達(dá)黑視素蛋白33-34
• 3.2 黑視素基因治療的rd1 小鼠視覺行為有部分恢復(fù)34-36
• 3.3 黑視素基因治療的rd1 小鼠在較高光刺激強(qiáng)度下b波有部分恢復(fù)36-37
• 3.4 膜片鉗未記錄到黑視素基因轉(zhuǎn)導(dǎo)給光雙極細(xì)胞的光反應(yīng)37-39
• 3.5 黑視素基因治療的rd1 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞恢復(fù)光反應(yīng)39-42
• 3.6 視紫質(zhì)基因成功轉(zhuǎn)導(dǎo)至給光雙極細(xì)胞并表達(dá)42-45
• 4 討論45-49
• 4.1 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)給光雙極細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)45-46
• 4.2 內(nèi)源性黑視素蛋白的特異性表達(dá)46
• 4.3 Rd1 小鼠視覺行為的恢復(fù)46-47
• 4.4 Rd1 小鼠視網(wǎng)膜對(duì)光反應(yīng)的恢復(fù)47-48
• 4.5 存在的問題及展望48-49
• 5 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 英文縮略詞表索引54-56
• 在學(xué)期間發(fā)表論文清單56-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 沈燁宇;侯立杰;呂帆;;閱讀障礙與視覺功能的研究進(jìn)展[J];國(guó)際眼科雜志;2007年02期

2 張歆;任百超;;年齡相關(guān)性黃斑變性的治療研究新進(jìn)展[J];國(guó)際眼科雜志;2007年06期

3 黃文志;唐羅生;;神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)治療視網(wǎng)膜退行性疾病[J];國(guó)際眼科雜志;2007年06期

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本文編號(hào)：596815