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利用內(nèi)源性感光蛋白轉導給光雙極細胞治療視網(wǎng)膜退行性疾病

發(fā)布時間:2017-07-31 01:11

  本文關鍵詞:利用內(nèi)源性感光蛋白轉導給光雙極細胞治療視網(wǎng)膜退行性疾病


  更多相關文章: 視網(wǎng)膜退行性疾病 基因治療 內(nèi)源性感光蛋白 黑視素 視紫質(zhì) 給光型雙極細胞


【摘要】:視網(wǎng)膜退行性疾病包括視網(wǎng)膜色素變性、年齡相關性黃斑變性等,嚴重威脅人類視力健康。這類疾病中,感光細胞變性凋亡,最終導致視覺喪失。雖然目前有不少方案來試圖減緩視網(wǎng)膜退變或恢復患者的視覺,在臨床上仍無長期有效的防治辦法。近期的研究將Ch R2和Np HR等外源性感光蛋白導入退變視網(wǎng)膜的剩余神經(jīng)元中,使其直接對光照產(chǎn)生反應,在一定程度上恢復了視網(wǎng)膜退變動物模型rd1小鼠的視覺功能,但在光感受蛋白和下級靶神經(jīng)元的選擇上仍有明顯不足。本研究采用光敏度更高的內(nèi)源性感光蛋白黑視素或視紫質(zhì),通過在體電穿孔技術,將這些基因定向轉導至給光雙極細胞。建立穩(wěn)定的轉導效率后,我們通過電生理和視覺行為學的方法檢測基因轉導后rd1小鼠的對光反應及視覺行為的恢復情況。結果表明:黑視素蛋白或視紫質(zhì)蛋白均能特異性轉導入給光雙極細胞中并表達。當rd1小鼠轉導黑視素后,視網(wǎng)膜電位中來自給光雙極細胞的b波以及rd1小鼠對明暗辨識的能力均有所恢復。雖然目前在基因轉導的給光雙極細胞上還未記錄到光反應,但在多個節(jié)細胞上記錄到了明顯的來自上游雙極細胞的光反應。因此,我們的結果提示基因轉導黑視素至給光雙極細胞可以有效地恢復視網(wǎng)膜退變小鼠的視覺功能;蜣D導視紫質(zhì)的初步實驗未見明顯治療效果。
【關鍵詞】:視網(wǎng)膜退行性疾病 基因治療 內(nèi)源性感光蛋白 黑視素 視紫質(zhì) 給光型雙極細胞
【學位授予單位】:暨南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R774.1
【目錄】:
  • 中文摘要3-4
  • 英文摘要4-7
  • 1 前言7-19
  • 1.1 視網(wǎng)膜組織結構及視覺傳導通路7-9
  • 1.2 視網(wǎng)膜退行性疾病9-11
  • 1.3 感光蛋白11-14
  • 1.4 在體電穿孔技術14-15
  • 1.5 視網(wǎng)膜電生理記錄15-16
  • 1.6 視覺行為學16-17
  • 1.7 研究內(nèi)容和意義17-19
  • 2 材料與方法19-33
  • 2.1 實驗技術路線19-20
  • 2.2 實驗動物20
  • 2.3 主要實驗儀器和設備20-21
  • 2.4 主要實驗材料和試劑21-22
  • 2.5 實驗方法和步驟22-33
  • 3 實驗結果33-45
  • 3.1 黑視素基因成功轉導給光雙極細胞并表達黑視素蛋白33-34
  • 3.2 黑視素基因治療的rd1 小鼠視覺行為有部分恢復34-36
  • 3.3 黑視素基因治療的rd1 小鼠在較高光刺激強度下b波有部分恢復36-37
  • 3.4 膜片鉗未記錄到黑視素基因轉導給光雙極細胞的光反應37-39
  • 3.5 黑視素基因治療的rd1 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞恢復光反應39-42
  • 3.6 視紫質(zhì)基因成功轉導至給光雙極細胞并表達42-45
  • 4 討論45-49
  • 4.1 基因轉導給光雙極細胞的優(yōu)勢45-46
  • 4.2 內(nèi)源性黑視素蛋白的特異性表達46
  • 4.3 Rd1 小鼠視覺行為的恢復46-47
  • 4.4 Rd1 小鼠視網(wǎng)膜對光反應的恢復47-48
  • 4.5 存在的問題及展望48-49
  • 5 結論49-50
  • 參考文獻50-54
  • 英文縮略詞表索引54-56
  • 在學期間發(fā)表論文清單56-57
  • 致謝57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 沈燁宇;侯立杰;呂帆;;閱讀障礙與視覺功能的研究進展[J];國際眼科雜志;2007年02期

2 張歆;任百超;;年齡相關性黃斑變性的治療研究新進展[J];國際眼科雜志;2007年06期

3 黃文志;唐羅生;;神經(jīng)干細胞移植術治療視網(wǎng)膜退行性疾病[J];國際眼科雜志;2007年06期

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本文編號:596815

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