本文關(guān)鍵詞：糖尿病大鼠病程不同階段角膜上皮緊密連接蛋白claudin-1表達(dá)的變化

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【摘要】：目的動(dòng)態(tài)觀察不同階段糖尿病大鼠和正常大鼠角膜上皮緊密連接蛋白claudin-1的表達(dá)變化。方法雄性SD大鼠80只,隨機(jī)均等分為糖尿病組和正常對(duì)照組各40只,以高脂飲食聯(lián)合小劑量STZ腹腔注射建立Ⅱ型糖尿病模型,分別于造模后4周、8周、16周處死大鼠,取角膜組織,以HE染色法比較糖尿病組和正常對(duì)照組大鼠角膜形態(tài)學(xué)變化,以免疫熒光染色和Western blot法檢測(cè)并分析大鼠角膜上皮緊密連接蛋白claudin-1的表達(dá)變化。結(jié)果1.正常對(duì)照組大鼠與糖尿病組大鼠體質(zhì)量的比較。高脂喂養(yǎng)8周后(注射STZ之前),正常對(duì)照組大鼠的平均體質(zhì)量(381g)較糖尿病組大鼠(412g)低7.5%(P0.01),但在造模成功后正常對(duì)照組大鼠維持正常體質(zhì)量增長(zhǎng),而糖尿病組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢。造模成功后第4周時(shí),糖尿病組大鼠平均體質(zhì)量(418g)較正常對(duì)照組大鼠(447g)低6.4%(P0.01),第8周時(shí),糖尿病組大鼠平均體質(zhì)量(422g)較正常對(duì)照組(509g)低17.1%(P0.01),第16周時(shí),糖尿病組大鼠平均體質(zhì)量(428g)較正常對(duì)照組(566g)低24.4%(P0.01)。2.正常對(duì)照組大鼠與糖尿病組大鼠空腹血糖的比較。高脂喂養(yǎng)8周后(注射STZ之前),正常對(duì)照組大鼠的空腹血糖值約為5mmol/L,糖尿病組約為6mmol/L(P0.01),造模成功后糖尿病組大鼠空腹血糖濃度升高并維持在約21mmol/L,而正常對(duì)照組大鼠的空腹血糖仍為5mmol/L,兩組間造模后第4周、8周、16周空腹血糖值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.造模成功后,HE染色分別觀察并比較兩組大鼠角膜形態(tài)學(xué)變化。任一時(shí)間點(diǎn)的正常對(duì)照組大鼠角膜形態(tài)無明顯變化,各層清晰可見,排列整齊,均無水腫,角膜上皮細(xì)胞輪廓清楚,細(xì)胞核呈圓形,基質(zhì)層排列緊密;糖尿病組大鼠角膜在第8周和第16周時(shí),角膜上皮細(xì)胞排列疏松,細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞數(shù)量較正常減少,基質(zhì)層水腫,膠原纖維排列不規(guī)則。4.角膜上皮通透性分析。染色結(jié)果顯示造模后第4周、第8周和第16周,正常對(duì)照組和糖尿病組角膜屏障功能均正常,未觀察到角膜上皮通透性有明顯差別。5.免疫熒光染色分別檢測(cè)并比較正常對(duì)照組與糖尿病組角膜上皮claudin-1蛋白的表達(dá)。染色發(fā)現(xiàn)claudin-1蛋白主要在角膜上皮的表層細(xì)胞和翼狀細(xì)胞層表達(dá)。造模成功后第4周和第8周,未觀察到兩組間有明顯差別。造模成功后第16周,染色結(jié)果顯示糖尿病組的角膜上皮claudin-1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組明顯更弱且不規(guī)則。6.Western blot檢測(cè)大鼠角膜上皮claudin-1蛋白的表達(dá)量。分析造模后第4周和第8周正常對(duì)照組和糖尿病組大鼠角膜上皮claudin-1蛋白的表達(dá),發(fā)現(xiàn)兩組之間的表達(dá)量沒有明顯的區(qū)別(p0.05)。在造模后第16周可明顯觀察到糖尿病組大鼠角膜上皮claudin-1的表達(dá)量明顯低于正常對(duì)照組的表達(dá)量(p0.05)。結(jié)論隨糖尿病病程延長(zhǎng),Ⅱ型糖尿病可能導(dǎo)致大鼠角膜上皮緊密連接蛋白claudin-1表達(dá)降低。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病角膜上皮緊密連接蛋白 claudin-1 免疫熒光染色 Western blot
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.2;R772.2
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 1. 前言10-13
• 2. 材料與方法13-21
• 3. 結(jié)果21-26
• 4. 討論26-28
• 5. 結(jié)論28
• 6. 參考文獻(xiàn)28-33
• 附錄33-34
• 致謝34-35
• 綜述35-49
• 參考文獻(xiàn)41-49

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本文編號(hào)：544513