本文關(guān)鍵詞：Smad1在小鼠屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視形成中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究C57BL/6小鼠屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視(form-deprivation myopia,FDM)模型中BMP/TGF-β信號通路下游因子Smad1的表達(dá)情況,探究Smad1在屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視形成過程中的作用及機(jī)制。方法:取21日齡實(shí)驗(yàn)小鼠96只,分為實(shí)驗(yàn)組(n=48只)和正常對照組(n=48只)。實(shí)驗(yàn)組右眼采用遮蓋法進(jìn)行形覺剝奪,左眼自然暴露作為自身對照組,正常對照組雙眼均不予任何處理。實(shí)驗(yàn)組和正常對照組分別以7d、21d、28d建立動物近視模型。在各實(shí)驗(yàn)時間點(diǎn)對各組小鼠分別進(jìn)行以下檢測:帶狀光檢影測量屈光度;電子游標(biāo)卡尺測量眼軸長度;蘇木素-伊紅(HE)染色聯(lián)合光鏡觀察眼球后壁形態(tài)學(xué)變化;免疫熒光染色法及免疫組織化學(xué)法檢測眼球后壁Smad1蛋白表達(dá)情況;實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(QRT-PCR)檢測眼球后壁中Smad1 m RNA表達(dá)情況。結(jié)果:(1)形覺剝奪7d時,實(shí)驗(yàn)眼屈光度、眼軸長度與自身對照眼、正常對照眼相比無顯著性差異(P0.05);形覺剝奪21d、28d后,實(shí)驗(yàn)眼分別誘導(dǎo)出(-4.65±0.13)D及(-7.40±0.27)D的相對近視,眼軸分別拉長(16±12)um及(21±13)um,與自身對照組及正常對照組相比,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05),且近視漂移程度隨著剝奪時間的延長而加深(P0.05);(2)相比自身對照組及正常對照組,眼球后壁形態(tài)學(xué)觀察可見形覺剝奪21d、28d時實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜(尤其是內(nèi)層區(qū))明顯變薄、細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列稀疏,鞏膜變薄、膠原纖維排列紊亂;(3)免疫熒光法結(jié)果示Smad1表達(dá)于鞏膜和視網(wǎng)膜(尤其是內(nèi)層區(qū)和外核層);免疫組織化學(xué)染色法及QRT-PCR結(jié)果顯示,在正常對照組中Smad1的表達(dá)并沒有隨著鼠齡的增長而增加,而在形覺剝奪實(shí)驗(yàn)眼中Smad1 m RNA及蛋白表達(dá)量較自身對照組及正常對照組均明顯減少,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。自身對照組的上述所有檢測指標(biāo)與正常對照組相比均無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:(1)正常C57BL/6小鼠屈光發(fā)育呈遠(yuǎn)視化進(jìn)展,Smad1未參與小鼠遠(yuǎn)視屈光的調(diào)節(jié);(2)FDM誘導(dǎo)過程中,Smad1的表達(dá)隨著剝奪時間的延長而呈下調(diào)趨勢,提示Smad1在近視形成過程中具有保護(hù)性作用,其可能通過影響視網(wǎng)膜-BMP/TGF-β信號通路參與FDM的形成。
【關(guān)鍵詞】：Smad1 視網(wǎng)膜 形覺剝奪性近視 C57BL/6小鼠
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R778.11
【目錄】：

• 中文摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第一章 材料與方法8-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料8-11
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)主要試劑8-9
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材9-10
• 1.1.3 動物形覺剝奪性近視模型的建立10-11
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法11-17
• 1.2.1 檢測指標(biāo)與組織學(xué)標(biāo)本的制作11-12
• 1.2.2 眼球后壁HE形態(tài)學(xué)觀察12-13
• 1.2.3 免疫熒光法檢測Smad1的表達(dá)13
• 1.2.4 免疫組織化學(xué)染色法檢測 Smad1 的表達(dá)13-14
• 1.2.5 實(shí)時熒光定量PCR檢測Smad1mRNA表達(dá)14-17
• 1.3 統(tǒng)計學(xué)處理17-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-27
• 2.1 屈光度、眼軸長度結(jié)果18-20
• 2.2 光鏡下眼球后壁的改變20-22
• 2.3 免疫熒光染色結(jié)果22-23
• 2.4 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果23-25
• 2.5 QRT-PCR 結(jié)果25-27
• 第三章 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 綜述35-51
• 參考文獻(xiàn)44-51
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果51-52
• 致謝52-53

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：Smad1在小鼠屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視形成中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：471282