本文關(guān)鍵詞：煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及機(jī)制的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變是否具有保護(hù)作用,并探索其相關(guān)的機(jī)制。方法:建立氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變模型:出生第7天(P7)C57 BL/6J新生小鼠80只隨機(jī)均分為常氧對(duì)照組(RA)、常氧煙酸干預(yù)組(RA+Niacin)、單純氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變組(OIR)和OIR煙酸干預(yù)組(OIR+Niacin),每組20只。兩組OIR新生小鼠P7連同母鼠放入75%±1%氧濃度的氧艙中,P12取出放回正�？諝庵性亠曫B(yǎng)5天,煙酸干預(yù)組母鼠飼以含質(zhì)量比0.5%煙酸的飼料,從幼鼠P7時(shí)開始喂食母鼠至P17。煙酸為水溶性維生素,可通過乳汁分泌,幼鼠按需吸允含有煙酸的乳汁。各組新生小鼠均于P17深度麻醉后經(jīng)含肝素PBS心臟灌注去除視網(wǎng)膜血管中血液后取右眼提取完整視網(wǎng)膜凍于-80℃冰箱保存,取左眼固定后行石蠟包埋、OCT包埋、視網(wǎng)膜鋪片Isolectin IB4染色。免疫熒光檢測各組新生小鼠視網(wǎng)膜中3-硝基酪氨酸(3-NT)、對(duì)氧磷酶2(PON2)和膠質(zhì)細(xì)胞纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá);熒光探針CellROX?Green氧化應(yīng)激試劑檢測各組活性氧自由基(ROS)水平;石蠟切片HE染色定量突破內(nèi)界膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)目;熒光標(biāo)記的Isolectin IB4視網(wǎng)膜鋪片染色觀察各組小鼠全視網(wǎng)膜中央缺血無灌注區(qū)(VO)和病理性新生血管區(qū)(NV)變化;TUNEL染色檢測視網(wǎng)膜組織細(xì)胞凋亡情況;Western blot測定各組視網(wǎng)膜組織中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1a)、PON2和GFAP的表達(dá),并通過檢測白蛋白Albumin的表達(dá)評(píng)判各組視網(wǎng)膜血管滲漏情況。結(jié)果:免疫熒光染色顯示OIR組視網(wǎng)膜GFAP標(biāo)記的müller細(xì)胞活化,煙酸可逆轉(zhuǎn)GFAP表達(dá)的增加;同樣熒光顯示,PON2在視網(wǎng)膜müller細(xì)胞上有表達(dá),煙酸可進(jìn)一步上調(diào)PON2的表達(dá)起到抗氧化作用;HE染色和IB4血管染色結(jié)果表明,煙酸可抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜血管異常;從蛋白水平上看,煙酸同樣可以逆轉(zhuǎn)單純氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變組VEGF、HIF-1a、GFAP和Albumin的升高,而抗氧化酶PON2蛋白水平因煙酸的干預(yù)較未干預(yù)組進(jìn)一步升高;Cell ROX和3-NT檢測結(jié)果表明,活性氧自由基和蛋白硝基化水平在單純OIR組均增加,煙酸干預(yù)后可減少ROS/RNS的產(chǎn)生;TUNEL檢測結(jié)果顯示OIR組視網(wǎng)膜TUNEL(+)核細(xì)胞數(shù)增加,而喂食煙酸的OIR小鼠視網(wǎng)膜陽性染色數(shù)有所下降,以內(nèi)核層下降最明顯。結(jié)論:本研究表明煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過抗氧化應(yīng)激來抑制新生血管生成和實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù),其中HIF-1a/VEGF信號(hào)通路可能參與其中。
【關(guān)鍵詞】：煙酸 氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變 氧化應(yīng)激 神經(jīng)血管保護(hù)
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R774.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-14
• 第2章 材料和方法14-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料14-18
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 2.1.2 抗體14
• 2.1.3 主要試劑14-15
• 2.1.4 主要儀器15-16
• 2.1.5 溶液配制16-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-27
• 2.2.1 建立新生小鼠氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變動(dòng)物模型18-19
• 2.2.2 小鼠心臟灌注19-20
• 2.2.3 小鼠視網(wǎng)膜石蠟切片制備及HE染色20-21
• 2.2.4 小鼠視網(wǎng)膜鋪片制備Isolectin GS-IB4染色21-22
• 2.2.5 小鼠視網(wǎng)膜冰凍切片制備及免疫熒光染色22
• 2.2.6 小鼠視網(wǎng)膜冰凍切片TUNEL染色22-23
• 2.2.7 小鼠視網(wǎng)膜熒光探針Cell ROX染色23
• 2.2.8 視網(wǎng)膜蛋白提取及SDS-PAGE電泳23-26
• 2.2.9 統(tǒng)計(jì)分析26-27
• 第3章 結(jié)果27-34
• 3.1 煙酸抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜病理性血管生成27-29
• 3.1.1 煙酸減少突破OIR小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)界膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)27
• 3.1.2 煙酸減少OIR幼鼠全視網(wǎng)膜中央缺血無灌注區(qū)（VO）和病理性新生血管區(qū)（NV）的面積27-29
• 3.2 煙酸抑制氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變小鼠視網(wǎng)膜中活性氧自由基（ROS）和 3-硝基酪氨酸（ 3-NT）的表達(dá)29-30
• 3.3 煙酸抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜HIF-1a和VEGF蛋白的表達(dá)，并通過抑制Albumin蛋白水平而減輕缺氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜滲漏30-31
• 3.4 對(duì)氧磷酶2在各組小鼠視網(wǎng)膜定位和表達(dá)，煙酸上調(diào)其表達(dá)水平。31-32
• 3.5 煙酸抑制高氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）的表達(dá)32-33
• 3.6 煙酸可減少 OIR 小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡33-34
• 第4章 討論34-39
• 第5章 結(jié)論與展望39-40
• 5.1 結(jié)論39
• 5.2 進(jìn)一步工作的方向39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述45-53
• 參考文獻(xiàn)49-53

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1 付靖婷,劉濤,劉在琴,其木格;糖尿病慢性并發(fā)癥視網(wǎng)膜病變92例[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

2 Hatsukawa Y;Ueki N;Yamagishi T;Kitajima H.;邢詠新;;早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變中度3期初始階段早期治療對(duì)重度視網(wǎng)膜病變的作用[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊;2006年02期

3 曹秀貞;;激光治療常見視網(wǎng)膜病變的療效觀察[J];華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年04期

4 王志軍;;糖友孕期需高度警惕視網(wǎng)膜病變[J];醫(yī)藥與保健;2012年04期

5 趙志剛,,馬書平,,張菱,,田清芬,,文世林,,付曉英,,李全忠,,魯平,,周焰,,張春玲,大石まリこ,葛谷英嗣;2型糖尿病初診時(shí)視網(wǎng)膜病變的調(diào)查分析及中日比較[J];眼科研究;2000年05期

6 劉穎,王艷玲;大泡性視網(wǎng)膜病變[J];中國實(shí)用眼科雜志;2000年06期

7 鄭賢龍;擠壓胸腹致遠(yuǎn)達(dá)性視網(wǎng)膜病變1例[J];中國法醫(yī)學(xué)雜志;2000年04期

8 洪俊,劉嫣芬,梁曉文,肖劍暉;妊娠高血壓綜合征視網(wǎng)膜病變的臨床分析[J];眼科學(xué)報(bào);2000年04期

9 趙莉;遠(yuǎn)達(dá)性外傷性視網(wǎng)膜病變一例報(bào)告[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志(附眼科手術(shù));2001年06期

10 夏云開;遠(yuǎn)達(dá)性視網(wǎng)膜病變1例[J];臨床眼科雜志;2001年06期

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1 吳正正;;遠(yuǎn)達(dá)性外傷性視網(wǎng)膜病變1例[A];第六屆全國中醫(yī)中西醫(yī)結(jié)合眼科學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2007年

2 楊彩云;王振東;孟宇;莊輝;姜華;鞏蕾;;從預(yù)防到治療--糖尿病視網(wǎng)膜病變[A];中國微循環(huán)學(xué)會(huì)2011年全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

3 儲(chǔ)昭節(jié);王雨生;;脂多糖對(duì)氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變的影響[A];第十四屆西北五省眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2013年

4 李方都;褚俏梅;;Ⅱ型糖尿病視網(wǎng)膜病變血清Ⅳ型膠原、層黏蛋白含量變化及意義[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊）[C];2001年

5 張小玲;孫文濤;;糖尿病性視網(wǎng)膜病變患者房水中血管內(nèi)皮生長因子與胰島素樣生長因子—1的定量測定及分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

6 孫侃;張晨;常向云;周婷;;2型糖尿病視網(wǎng)膜病變相關(guān)危險(xiǎn)因素分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

7 喻京生;黃俊s

本文編號(hào)：439542