本文關(guān)鍵詞：VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)再生的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過I型糖尿病小鼠模型和體外三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞模型,研究血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)對糖尿病小鼠角膜上皮和神經(jīng)再生的作用,并探討其機制。方法選取鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的I型糖尿病小鼠與同齡對照小鼠,建立角膜上皮損傷再生模型。Western blot和免疫組化檢測正常和糖尿病小鼠角膜上皮內(nèi)源性VEGF-B表達(dá)量差異;熒光素鈉染色檢測外源性VEGF-B對糖尿病小鼠角膜上皮損傷愈合速率的影響;角膜整體鋪片染色檢測VEGF-B對糖尿病小鼠角膜神經(jīng)再生的作用。體外培養(yǎng)小鼠原代三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,加入中和抗體以及小分子抑制劑,免疫熒光檢測VEGF-B對三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突生長、線粒體氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響;Western blot檢測VEGF-B對三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號通路的活化情況。結(jié)果(1)與同齡對照相比,隨著糖尿病小鼠病程的延長,糖尿病小鼠體重顯著減輕,血糖水平顯著升高,且小鼠角膜敏感度顯著降低。角膜神經(jīng)染色顯示糖尿病小鼠的角膜上皮末梢神經(jīng)纖維密度顯著減少,且基底膜神經(jīng)顯微結(jié)構(gòu)顯著改變。正常小鼠再生角膜上皮中的VEGF-B表達(dá)水平較正常角膜上皮顯著增強,而在糖尿病小鼠再生角膜上皮中,VEGF-B的表達(dá)未見顯著提高。(2)外源性添加VEGF-B可顯著促進(jìn)正常及糖尿病小鼠角膜神經(jīng)、上皮再生和角膜敏感度恢復(fù)。(3)糖尿病導(dǎo)致三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著升高,線粒體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。VEGF-B可以顯著降低三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)ROS水平,顯著降低其線粒體應(yīng)激水平,封閉VEGFR-1而非NRP-1,可以完全抵消VEGF-B對糖尿病三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體應(yīng)激水平的恢復(fù)。(4)VEGF-B可顯著促進(jìn)正常及糖尿病小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突的生長以及下游Akt、GSK3β和S6K磷酸化水平升高。封閉VEGFR-1而非NRP-1,可完全抵消VEGF-B的促進(jìn)功能。加入Akt、GSK3β、mTOR的抑制劑,可完全阻斷VEGF-B的促神經(jīng)生長作用。結(jié)論(1)隨著病程延長,糖尿病小鼠出現(xiàn)角膜上皮神經(jīng)退行,敏感度下降等糖尿病角膜病變特征,且再生角膜上皮中VEGF-B表達(dá)顯著降低。(2)外源性VEGF-B可以促進(jìn)糖尿病小鼠的角膜神經(jīng)修復(fù)及上皮愈合,促進(jìn)角膜敏感度恢復(fù)。(3)VEGF-B通過恢復(fù)線粒體應(yīng)激水平和活化VEGFR-1及其下游PI-3K/Akt-GSK-3β-m TOR信號通路促進(jìn)糖尿病三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突的生長。
【關(guān)鍵詞】：VEGF-B 糖尿病 角膜神經(jīng)再生 角膜敏感度 VEGFR-1
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R772.2
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 主要符號表10-11
• 引言11-13
• 第一部分 糖尿病小鼠角膜神經(jīng)病變的病理特征13-25
• 第1章 材料與方法13-21
• 1.1 材料與試劑13-15
• 1.2 實驗方法15-21
• 第2章 結(jié)果21-24
• 2.1 糖尿病小鼠的體征變化21
• 2.2 糖尿病小鼠角膜神經(jīng)支配的變化21-22
• 2.3 糖尿病小鼠再生角膜上皮中VEGF-B表達(dá)減少22-24
• 第3章 小結(jié)24-25
• 第二部分 VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)損傷再生及上皮愈合25-32
• 第1章 材料與方法25-28
• 1.1 材料與試劑25-26
• 1.2 實驗方法26-28
• 第2章 結(jié)果28-31
• 2.1 外源性VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)修復(fù)28-30
• 2.2 VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜上皮損傷修復(fù)30-31
• 第3章 小結(jié)31-32
• 第三部分 VEGF-B通過活化VEGFR-1 及下游PI3K-GSK3β-mTOR通路促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)再生32-43
• 第1章 材料與方法32-37
• 1.1 材料與試劑32-34
• 1.2 實驗方法34-37
• 第2章 結(jié)果37-42
• 2.1 三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞表達(dá)VEGFR-1 及NRP-137-38
• 2.2 VEGF-B促進(jìn)糖尿病環(huán)境下三叉神經(jīng)細(xì)胞軸突生長的作用及機制38-42
• 第3章 小結(jié)42-43
• 討論43-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果50-51
• 致謝51

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1 曾彥彰;饒偉;高興;周東浩;劉靜;;糖尿病小鼠組織和血液的掃描量熱學(xué)研究[J];科技導(dǎo)報;2008年19期

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3 王冰;程麗靜;劉明川;高政南;;糖尿病小鼠肝臟脂肪酸合成酶的動態(tài)表達(dá)[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年02期

4 劉倩;李霞輝;張學(xué)梅;;2型糖尿病小鼠模型的研究進(jìn)展[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2013年10期

5 王楓,龔守良;糖尿病小鼠小腸的輻射效應(yīng)[J];國外醫(yī)學(xué)(放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)分冊);2000年05期

6 王計辰,張學(xué)春,李長東,譚毓銓;糖尿病小鼠免疫狀態(tài)的實驗研究[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年02期

7 常海艷,薛長勇,朱強,方芳,陳則;糖尿病小鼠對流感病毒滅活疫苗的免疫應(yīng)答[J];中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年03期

8 王婧;菊科植物Samallanthus sonchifolius葉對遺傳性2型糖尿病小鼠的降血糖和降血脂活性[J];國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊);2005年06期

9 梁華，，肖洪彬，李秋梅，李潤征，李澤光;酸甘配伍法對正常小鼠和糖尿病小鼠血糖含量影響的實驗研究[J];中醫(yī)藥信息;1995年03期

10 趙詠梅,姬志娟,趙志煒,錢玉英,晉志高,裴進(jìn)京,盛樹力;糖尿病小鼠腦組織超磷酸化及其機理研究[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;1999年01期

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1 王冰;高政南;;糖尿病小鼠肝臟上脂肪酸合成酶的動態(tài)表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會第十六次全國學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

2 于琦;劉占文;;仙杞飲改善糖尿病小鼠血脂異常的作用[A];弘揚中華養(yǎng)生文化 共享健康新生活——中華中醫(yī)藥學(xué)會養(yǎng)生康復(fù)分會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

3 鐵璐;李學(xué)軍;陳豐原;;四氫生物蝶呤對糖尿病小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞功能的影響[A];第七屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文集[C];2009年

4 焦士蓉;王波;黃承鈺;于爽;陰文婭;;糖尿病小鼠肝組織氧化損傷研究[A];食物功效成分與健康——達(dá)能營養(yǎng)中心第九次學(xué)術(shù)年會會議論文集[C];2006年

5 徐湘;陳輝;凌冰玉;張玉秋;許嵐;曹紅;;脊髓細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶激活導(dǎo)致2型糖尿病小鼠痛覺過敏[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

6 陳建國;王茵;梅松;來偉旗;付穎;胡欣;;茶多糖對糖尿病小鼠降血糖、改善癥狀作用的研究[A];首屆長三角科技論壇——長三角生物醫(yī)藥發(fā)展論壇論文集[C];2004年

7 夏陳海;劉毅;張海峰;王汝濤;馬彥卓;賀媛;廉坤;靳溫;路曉燕;王海昌;陶凌;;GSNO在糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注損傷中的作用及其可能機制[A];中國生理學(xué)會消化內(nèi)分泌生殖代謝生理專業(yè)委員會2011年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

8 吳貽松;陸紅麗;韓燕飛;郭新;黃旭;許文燮;;NPs信號通路在糖尿病小鼠胃動力學(xué)障礙中的作用及其機制[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

9 孫亮亮;龐濤;湯瑋;鄒俊杰;寶軼;陳海燕;陳向芳;鄭驕陽;葉菲;張貝;陸文銓;石勇銓;;新型復(fù)方制劑絡(luò)寧膠囊緩解糖尿病小鼠焦慮抑郁的研究[A];中國微循環(huán)學(xué)會2014年全國學(xué)術(shù)會議大會匯編[C];2014年

10 張栩;黃波;周f^f^;陳暢;;糖尿病小鼠肝臟中內(nèi)源亞硝基化蛋白的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究及網(wǎng)絡(luò)分析[A];第十一次中國生物物理學(xué)術(shù)大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

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1 杜顯麗;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過TSG-6促進(jìn)糖尿病小鼠角膜上皮再生的機制研究[D];青島大學(xué);2015年

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3 歐陽建;同基因造血干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

4 吳劍;流感病毒全病毒滅活疫苗及疫苗佐劑在1型糖尿病小鼠中的效力研究[D];湖南師范大學(xué);2010年

5 李沁;脈沖射頻能量（PRFE）加快糖尿病小鼠傷口愈合的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

6 金志珊;糖尿病與非糖尿病小鼠子宮內(nèi)膜蛋白質(zhì)組學(xué)及LDHB的表達(dá)和功能的研究[D];華中科技大學(xué);2014年

7 王永剛;姜黃素衍生物C66對1型糖尿病小鼠心血管系統(tǒng)并發(fā)癥的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2015年

8 胡太平;Sonic Hedgehog促糖尿病小鼠傷口愈合及機制研究[D];中南大學(xué);2006年

9 張馳;低劑量電離輻射對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠炎癥因子表達(dá)的影響[D];吉林大學(xué);2009年

10 邵淑宏;烏龍茶多糖理化性質(zhì)及抗氧化、降血糖活性研究[D];浙江大學(xué);2015年

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1 黃月娥;鮑魚臟器粗多糖對糖尿病小鼠生理功能的影響[D];福建農(nóng)林大學(xué);2013年

2 徐會金;運動通過p38MAPK信號通路對2型糖尿病小鼠骨代謝的影響[D];華東師范大學(xué);2016年

3 曹月;棉籽肽的制備及其對Ⅱ型糖尿病小鼠治療作用的研究[D];吉林大學(xué);2016年

4 劉健;知母中OfficinalisininI對糖尿病小鼠降糖及神經(jīng)保護(hù)機制研究[D];西南交通大學(xué);2016年

5 倪程佩;1,25(OH)_2D_3對Ⅱ型糖尿病小鼠自噬與炎癥反應(yīng)的干預(yù)及其分子機制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

6 劉華瑜;桑皮粉添食對STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的預(yù)防和治療作用[D];蘇州大學(xué);2016年

7 李昆;利拉魯肽對一型糖尿病小鼠視網(wǎng)膜感光細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2014年

8 馬巧靈;蘋果酵素對Ⅱ型糖尿病小鼠模型作用的實驗研究[D];大理大學(xué);2016年

9 韓飛;芍藥苷對糖尿病小鼠合并心肌缺血的作用及其相關(guān)機制的研究[D];浙江大學(xué);2016年

10 馮璐;VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)再生的機制研究[D];濟(jì)南大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：VEGF-B促進(jìn)糖尿病小鼠角膜神經(jīng)再生的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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