本文關(guān)鍵詞：NMDA受體過度激活介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣超載在慢性間歇低氧誘導(dǎo)小鼠認(rèn)知功能損傷中的作用探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立慢性間歇低氧(chronic intermittent hypoxia, CIH)小鼠模型,觀察慢性間歇低氧對(duì)小鼠神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶能力的影響,探討海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣超載在其中發(fā)揮的作用,以及NMDA受體拮抗劑鹽酸美金剛的干預(yù)效果。方法選取ICR雄性小鼠45只,體重(30±2)g,隨機(jī)分為常氧對(duì)照組(UC組)、慢性間歇低氧組(CIH組)和慢性間歇低氧+鹽酸美金剛干預(yù)組(MEM組),每組各15只。CIH組小鼠和MEM組小鼠予間歇低氧環(huán)境中(8 h/d,共4周),同一時(shí)間UC組小鼠予常氧環(huán)境中。MEM組小鼠每日間歇低氧前15 min,腹腔注射鹽酸美金剛,用藥劑量5 mg/kg,UC組和CIH組小鼠同樣時(shí)間腹腔注射等體積生理鹽水。4周造模結(jié)束后,利用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組小鼠的行為和學(xué)習(xí)記憶能力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠海馬細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度([Ca2+]i),Western blot檢測(cè)小鼠海馬組織凋亡蛋白活化型半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、活化型半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶-9(cleaved caspase-9)及活化型聚(ADP-核糖)聚合酶(cleaved PARP)的表達(dá)水平。結(jié)果(1)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與UC組比較,CIH組小鼠自發(fā)活動(dòng)明顯增強(qiáng),即總路程(m)和平均速度(m/s)明顯升高(19.87±4.86 vs.14.89±3.37,P0.05；0.066±0.016vs.0.049±0.011,P0.05),MEM組小鼠與UC組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與CIH組比較,MEM組小鼠自發(fā)活動(dòng)明顯減少,即總路程(m)和平均速度(m/s)降低(15.34±3.34vs.19.87±4.86,P0.05：0.051±0.011 vs.0.066±0.016,P0.05)。(2)Morris水迷宮測(cè)試結(jié)果顯示：定位航行實(shí)驗(yàn)中,隨訓(xùn)練天數(shù)的延長(zhǎng),各組小鼠的逃避潛伏期及游泳路程逐漸縮短,而游泳速度差異不大。與UC組比較,CIH組小鼠第三天和第四天逃避潛伏期(8)明顯延長(zhǎng)(分別為40.91±16.13 vs.31.55±15.24,P0.05；37.49±17.55 vs.22.48±15.18,P0.01),此外CIH組小鼠第三天和第四天游泳路程(cm)也明顯增加(分別為1045.1±462.3 vs.751.3±371.7,P0.01；922.4±468.1vs.579.6±398.2,P0.01)；與CIH組比較,MEM組小鼠第四天逃避潛伏期(s)和游泳路程(cm)明顯縮短(分別為26.37±15.59 vs.37.49±17.55,P0.01；647.3±398.2vs.922.4±468.1,P0.05),而與UC組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異�？臻g探索實(shí)驗(yàn)中,CIH組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)(次)以及目的象限時(shí)間百分率(%)與UC組比較顯著減少(1.13±0.83vs.2.47±1.19,P0.01；21.06±5.29 vs.38.87±15.20,P0.01),MEM組較CIH組兩個(gè)指標(biāo)成績(jī)均有所改善(穿越平臺(tái)次數(shù)：2.07±0.96次vs.1.13±0.83次,P0.01；目的象時(shí)間百分率：30.85±15.20% vs.21.06±5.29%,P0.01),而MEM組小鼠與UC組比較兩個(gè)指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(3)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示：CIH組小鼠海馬細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i濃度明顯高于UC組(155.00±12.25 vs.91.90±8.28,P0.01)；MEM組小鼠海馬細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i與CIH組小鼠比較顯著降低(90.13±7.56 vs.155.00±12.25,P0.01),而與UC組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(4) Western blot結(jié)果顯示：與UC組比較,CIH組小鼠海馬組織凋亡相關(guān)蛋白cleaved caspase-3、caspase-9和PARP灰度值明顯升高(分別為0.66±0.09 vs.0.23±0.09,P0.01；0.61±0.12 vs.0.30±0.15,P0.01；0.71±0.18 vs.0.21±0.02,P0.05)；與CIH組比較,MEM組小鼠cleaved caspase-3、caspase-9和PARP灰度值顯著低于CIH組小鼠(分別為0.29±0.20 vs.0.66±0.09,P0.01；0.30±0.12 vs.0.61±0.12,P0.01；0.32±0.10 vs.0.71±0.18,P0.01)；MEM組與UC組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論CIH誘導(dǎo)小鼠自發(fā)活動(dòng)增強(qiáng),空間學(xué)習(xí)、記憶能力的損傷,介導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)鈣超載,引起細(xì)胞凋亡；而鹽酸美金剛通過抑制NMDA受體過度激活,逆轉(zhuǎn)海馬細(xì)胞鈣超載,抑制細(xì)胞凋亡,改善CIH誘導(dǎo)的神經(jīng)行為和認(rèn)知異常。結(jié)果提示NMDA受體過度激活及其介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣超載參與了CIH導(dǎo)致的認(rèn)知功能損傷過程,該結(jié)果為OSAHS認(rèn)知障礙的機(jī)制探討以及進(jìn)一步的治療干預(yù)研究,提出了一個(gè)值得關(guān)注的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：慢性間歇低氧 認(rèn)知功能 鈣超載 細(xì)胞凋亡 鹽酸美金剛
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R766
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-15
• 參考文獻(xiàn)11-15
• 材料和方法15-22
• 結(jié)果22-29
• 討論29-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述37-47
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 中英文對(duì)照縮略詞表47-48
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文及課題48-49
• 致謝49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉輝國;張志鋒;張珍祥;高永平;牛汝楫;;間歇缺氧大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及其機(jī)制[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2007年05期

  本文關(guān)鍵詞：NMDA受體過度激活介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣超載在慢性間歇低氧誘導(dǎo)小鼠認(rèn)知功能損傷中的作用探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：422268