發(fā)布時(shí)間：2017-06-02 22:09

  本文關(guān)鍵詞：大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜CXCR3及CCR5的表達(dá)變化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]利用SD大鼠視神經(jīng)夾挫傷模型,研究視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)趨化因子受體CXCR3及CCR5在大鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)變化趨勢,探討CXCR3、CCR5在視神經(jīng)挫傷后對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的作用,為進(jìn)一步了解外傷性視神經(jīng)病變后繼發(fā)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的機(jī)制提供新的思路。[方法]健康成年SPF級(jí)雌性SD大鼠120只,雙眼正常。將大鼠隨機(jī)分組,分為視神經(jīng)損傷組(60只),視神經(jīng)假損傷組(60只),在相同條件下進(jìn)行飼養(yǎng)。兩組按視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)分為5個(gè)亞組,即損傷后12h組、24h組、3d組、5d組、7d組。損傷組大鼠左眼設(shè)為損傷眼,用夾持力為50g的反向夾持鑷于球后2mm處,夾持視神經(jīng)10s,建立視神經(jīng)挫傷模型；假損傷組大鼠左眼設(shè)為假損傷組,僅暴露視神經(jīng),不進(jìn)行夾持。于損傷后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)摘取眼球。用FITC-lectin標(biāo)記視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞,GFAP標(biāo)記視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞,觀察大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞的分布及活化情況；同時(shí)通過免疫組織化學(xué)技術(shù),檢測CXCR3、CCR5在大鼠視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)的視網(wǎng)膜上的蛋白定位情況；采用Real-Time PCR及Western Blot法分別檢測大鼠視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜組織中CXCR3、CCR5 mRNA及蛋白含量的變化。結(jié)果采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。[結(jié)果]1.FITC-lectin標(biāo)記小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)假損傷組視網(wǎng)膜lectin陽性細(xì)胞主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層、內(nèi)網(wǎng)狀層,少量位于外網(wǎng)狀層,在內(nèi)核層及外核層分布較少,且呈靜息形態(tài)。視神經(jīng)挫傷后3d可觀察到少量激活態(tài)的小膠質(zhì)細(xì)胞。視神經(jīng)挫傷后5d視網(wǎng)膜各層出現(xiàn)明顯增多的lectin陽性細(xì)胞,呈激活態(tài)。2. GFAP標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)假損傷組視網(wǎng)膜僅在視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層見少量的GFAP陽性表達(dá)。視神經(jīng)挫傷后GFAP表達(dá)隨損傷時(shí)間的延長逐漸增多增強(qiáng)。在視神經(jīng)挫傷后5d視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)狀層、內(nèi)核層、外網(wǎng)狀層出現(xiàn)GFAP表達(dá)明顯增多,且可見向外延伸的線性表達(dá)。3. CXCR3、CCR5免疫組化結(jié)果：假損傷組視網(wǎng)膜上僅在視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層發(fā)現(xiàn)極少量散在分布有CXCR3/CCR5的陽性細(xì)胞。而視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜開始出現(xiàn)明顯增多的著色細(xì)胞。在視神經(jīng)挫傷后5d視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層、外核層陽性染色細(xì)胞顯著增多。4. Real-Time PCR方法檢測視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜中CXCR3、CCR5 mRNA表達(dá)水平的變化發(fā)現(xiàn)：在損傷后24h,CXCR3 mRNA表達(dá)即升高(P0.05),而CCR5 mRNA表達(dá)也升高,但與假損傷組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；損傷后3d,CXCR3與CCR5的mRNA表達(dá)量均大幅度降低,低于正常水平,與假損傷組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。損傷后5d, CXCR3、CCR5 mRNA表達(dá)量均大幅度升高至峰值(P0.05)；損傷后7d,CXCR3 mRNA表達(dá)較損傷后5d略有下降,與假損傷組相比仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),而CCR5 mRNA表達(dá)基本回復(fù)至正常水平,和假損傷組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5. Western Blot方法檢測視神經(jīng)挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜中CXCR3、CR5蛋白表達(dá)水平,結(jié)果與RT-PCR檢測結(jié)果基本一致：損傷后3d, CXCR3與CCR5的蛋白表達(dá)量均降低至正常水平以下,與假損傷組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；損傷后5d, CXCR3、CCR5蛋白表達(dá)量大幅度升高至峰值(P0.05)；損傷后7d, CXCR3蛋白表達(dá)水平略有下降,而CCR5蛋白表達(dá)基本回復(fù)至正常水平(P0.05)。[結(jié)論]大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜出現(xiàn)小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞的增生、活化現(xiàn)象；大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜CXCR3及CCR5表達(dá)升高時(shí)間與視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞大量活化時(shí)間一致,二者表達(dá)增強(qiáng)可能與視神經(jīng)挫傷后膠質(zhì)活化有關(guān),可能參與并加重視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：視神經(jīng)損傷 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 CXCR3 CCR5
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R779.12
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-15
• 材料與方法15-28
• 結(jié)果28-32
• 討論32-37
• 結(jié)論37
• 問題與展望37-38
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 綜述43-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 在讀期間發(fā)表文章51-52
• 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曹海靜;朱鴻;施彩虹;;CXC族趨化因子受體在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)研究[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年05期

2 易少華;吳紅色;鄧偉連;饒廣勛;張玲莉;陳曉瑞;;視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)和Bcl-2/Bax表達(dá)[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志.附眼科手術(shù);2006年05期

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  本文關(guān)鍵詞：大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜CXCR3及CCR5的表達(dá)變化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：416628