目的:探討MEK/ERK信號(hào)通路對(duì)人結(jié)膜上皮細(xì)胞增殖的影響及其可能的機(jī)制。方法:采用不同濃度(0、12.5、25、50、100μmol/L)的MEK抑制劑PD98059處理人結(jié)膜上皮細(xì)胞(HConEpiC),通過(guò)CCK-8法檢測(cè)不同濃度PD98059作用不同時(shí)間(0、12、24、48 h)對(duì)人結(jié)膜上皮細(xì)胞增殖的影響,Western blot檢測(cè)不同濃度PD98059對(duì)人結(jié)膜上皮細(xì)胞ERK1/2、P-ERK1/2表達(dá)的影響。結(jié)果:相比對(duì)照組(0μmol/L),不同濃度(12.5、25、50、100μmol/L)PD98059處理后的人結(jié)膜上皮細(xì)胞增殖率明顯下降,呈劑量-效應(yīng)關(guān)系,且隨處理時(shí)間增加(12、24、48 h)其抑制作用也顯著增強(qiáng),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。不同濃度PD98059處理人結(jié)膜上皮細(xì)胞24 h后,其ERK及p-ERK1/2表達(dá)隨處理濃度增加而降低,與對(duì)照組(0μmol/L)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且二者表達(dá)量與細(xì)胞增值抑制率均呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.995、r=-0.968,P<0.05)。結(jié)論:PD98059可抑制人結(jié)膜上皮...

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圖2不同濃度PD98059(mol/L)對(duì)HconEpiCERK1/2、p-ERK1/2蛋白表達(dá)的影響

圖1不同濃度PD98059(mol/L)處理不同時(shí)間對(duì)HconEpiC增殖的影響Fig.1Effectsofdifferentconcentrations(mol/L)ofPD98059fordifferent

再置于相應(yīng)稀釋比例的一抗孵育液(ERK1/2為1:1000；p-ERK為1:2000；GAPDH為1:5000)中4℃下孵育過(guò)夜，次日TBST液充分洗滌后(15min3次)將對(duì)應(yīng)種屬及稀釋比例的HRP標(biāo)記二抗室溫下孵育1h，TBST液充分洗滌后(5min3次)于暗室經(jīng)ECL超敏試....

圖4p-ERK蛋白表達(dá)量與HconEpiC增值抑制率呈顯著負(fù)相關(guān)（r-0.968,P<0.05）

現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展www.shengwuyixue.comProgressinModernBiomedicineVol.16NO.11APR.2016圖3ERK蛋白表達(dá)量與HconEpiC增值抑制率呈顯著負(fù)相關(guān)（r-0.995,P<0.05）Fig.3Theexpressionso....

圖3ERK蛋白表達(dá)量與HconEpiC增值抑制率呈顯著負(fù)相關(guān)（r-0.995,P<0.05）

現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展www.shengwuyixue.comProgressinModernBiomedicineVol.16NO.11APR.2016圖3ERK蛋白表達(dá)量與HconEpiC增值抑制率呈顯著負(fù)相關(guān)（r-0.995,P<0.05）Fig.3Theexpressionso....

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