目的:在體外實驗中探明二甲雙胍對順鉑耳毒性的保護作用,并從SIRT3-自噬信號的角度初步探明其可能的產(chǎn)生機制。方法:1、首先在HEI-OC1細胞中建立順鉑耳毒性的細胞模型。分組為對照組(C組)、順鉑組(CP組)、二甲雙胍組(M組)、順鉑+二甲雙胍組(CPM組)這四組。CP組給予順鉑處理24小時,CPM組在給予順鉑處理前給予二甲雙胍預處理24h,M組僅給予二甲雙胍作用24小時,C組不做處理,于造模終點收集細胞用于后續(xù)實驗。提取細胞總蛋白應用Western Blot技術(shù)檢測組間SIRT3蛋白表達水平的差異,采用PCR技術(shù)檢測組間SIRT3 mRNA水平上的差異。用Western Blot和免疫熒光技術(shù)通過對組間自噬相關(guān)蛋白LC3II和P62的蛋白表達水平差異的檢測,探明順鉑及二甲雙胍對自噬的影響。我們進一步用流式細胞技術(shù)(FITC/PI檢測法)來檢測組間細胞的凋亡比例的差異。2、我們進一步應用干擾SIRT3的慢病毒轉(zhuǎn)染HEI-OC1細胞,建立干擾SIRT3的細胞模型,并分為:對照組(C組)、順鉑組(CP組)、二甲雙胍組(M組)、順鉑+二甲雙胍組(CPM組)、干擾SIRT3組(sh-lv-S...

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
材料和方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
綜述 順鉑耳中毒損傷與自噬：現(xiàn)狀與展望
    參考文獻
致謝



本文編號：3976174