發(fā)布時間：2024-05-06 22:49

　　[目的]驗證vIL-10通過NF-κB通路抑制MHC-I類分子抗原加工和提呈的“操縱子”表達。[方法]1.將NF-κB p65 CRISPR/Cas9 KO Plasmid(購于santa cruz)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人鼻咽癌低分化細胞CNE-2,以未轉(zhuǎn)染熒光質(zhì)粒的CNE2細胞作為對照,用流式分析儀分選出轉(zhuǎn)染NF-κB p65 CRISPR/Cas9 KO Plasmid的細胞(帶綠色熒光)。將挑選出的帶綠色熒光的單細胞克隆培養(yǎng)后收集,Western blot檢測單克隆中NF-κB p65的敲除情況,并建立NF-κB p65穩(wěn)定敲除細胞株.RT-PCR、Western blot分別檢測TAP1、 2, LMP2、7, HLA-ImRNA和蛋白質(zhì)的表達情況。2.設(shè)計與構(gòu)建BCRF-1的過表達載體。將PCMV-N-Flag質(zhì)粒以及構(gòu)建好的PCMV-N-Flag-BCRF質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染CNE-2細胞株和穩(wěn)定敲除NF-κB p65的CNE-2細胞株。RT-PCR、Western blot分別檢測TAP1、2, LMP2、7, HLA-I mRNA和蛋白質(zhì)的表達情況。3.①將CNE2組(未處理組)設(shè)為A組；...

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【學(xué)位級別】：碩士

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材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



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