[目的]驗(yàn)證vIL-10通過(guò)NF-κB通路抑制MHC-I類分子抗原加工和提呈的“操縱子”表達(dá)。[方法]1.將NF-κB p65 CRISPR/Cas9 KO Plasmid(購(gòu)于santa cruz)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人鼻咽癌低分化細(xì)胞CNE-2,以未轉(zhuǎn)染熒光質(zhì)粒的CNE2細(xì)胞作為對(duì)照,用流式分析儀分選出轉(zhuǎn)染NF-κB p65 CRISPR/Cas9 KO Plasmid的細(xì)胞(帶綠色熒光)。將挑選出的帶綠色熒光的單細(xì)胞克隆培養(yǎng)后收集,Western blot檢測(cè)單克隆中NF-κB p65的敲除情況,并建立NF-κB p65穩(wěn)定敲除細(xì)胞株.RT-PCR、Western blot分別檢測(cè)TAP1、 2, LMP2、7, HLA-ImRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。2.設(shè)計(jì)與構(gòu)建BCRF-1的過(guò)表達(dá)載體。將PCMV-N-Flag質(zhì)粒以及構(gòu)建好的PCMV-N-Flag-BCRF質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染CNE-2細(xì)胞株和穩(wěn)定敲除NF-κB p65的CNE-2細(xì)胞株。RT-PCR、Western blot分別檢測(cè)TAP1、2, LMP2、7, HLA-I mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。3.①將CNE2組(未處理組)設(shè)為A組；...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



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