目的：在共培養(yǎng)模型下,觀察人視網(wǎng)膜色素上皮細胞(retinal pigment epithelial cells, RPE)中slit2基因?qū)γ}絡(luò)膜視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(RF/6A)遷移及管腔形成的影響。方法：1.將腺病毒介導(dǎo)的slit2 (Ad-slit2)及空腺病毒載體(Ad-null)轉(zhuǎn)染RPE細胞24h、48h。通過逆轉(zhuǎn)錄PCR (Reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)及Western-blot檢測轉(zhuǎn)染后的RPE細胞中slit2的表達水平。2.建立RPE & RF/6A共培養(yǎng)模型,采用Transwell小室法及Matrigel膠體外三維成型法分別檢測過表達slit2基因的RPE細胞對RF/6A細胞遷移能力及管腔形成能力的影響,并計算遷移數(shù)目及形成完整管腔個數(shù)。3.在缺氧條件下,shRNA-slit2轉(zhuǎn)染RPE細胞后,利用RT-PCR及Western-blot檢測slit2的表達變化。4.建立共培養(yǎng)體系,通過Transwell小室法檢測缺氧條件下,抑制RPE細胞中的slit2基因?qū)F/6A細胞遷移能...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染ＲＰＥ細胞后ｓｌｉｔ２?ｍＲＮＡ及蛋白表達的變化（＊Ｐ＜〇．〇５）??

１．２．７統(tǒng)計學(xué)方法??所有的實驗至少重復(fù)３次，所得結(jié)果均用Ｘ?＋?Ｓ表示。使用ＳＰＳＳ１７．?０統(tǒng)計件，采用單因素方差分析及ｔ檢驗法分析結(jié)果。??２．結(jié)果??２．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染后，Ｒ化細胞中ｓｌｉｔ２ｍＲＮＡ及蛋白表達水平??ＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染Ｒ....

圖１．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染ＲＰＥ細胞后ｓｌｉｔ２?ｍＲＮＡ及蛋白表達的變化（＊Ｐ＜〇．〇５）??

１．２．７統(tǒng)計學(xué)方法??所有的實驗至少重復(fù)３次，所得結(jié)果均用Ｘ?＋?Ｓ表示。使用ＳＰＳＳ１７．?０統(tǒng)計件，采用單因素方差分析及ｔ檢驗法分析結(jié)果。??２．結(jié)果??２．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染后，Ｒ化細胞中ｓｌｉｔ２ｍＲＮＡ及蛋白表達水平??ＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染Ｒ....

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