目的：在共培養(yǎng)模型下,觀察人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(retinal pigment epithelial cells, RPE)中slit2基因?qū)γ}絡(luò)膜視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A)遷移及管腔形成的影響。方法：1.將腺病毒介導(dǎo)的slit2 (Ad-slit2)及空腺病毒載體(Ad-null)轉(zhuǎn)染RPE細(xì)胞24h、48h。通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR (Reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)及Western-blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的RPE細(xì)胞中slit2的表達(dá)水平。2.建立RPE & RF/6A共培養(yǎng)模型,采用Transwell小室法及Matrigel膠體外三維成型法分別檢測(cè)過(guò)表達(dá)slit2基因的RPE細(xì)胞對(duì)RF/6A細(xì)胞遷移能力及管腔形成能力的影響,并計(jì)算遷移數(shù)目及形成完整管腔個(gè)數(shù)。3.在缺氧條件下,shRNA-slit2轉(zhuǎn)染RPE細(xì)胞后,利用RT-PCR及Western-blot檢測(cè)slit2的表達(dá)變化。4.建立共培養(yǎng)體系,通過(guò)Transwell小室法檢測(cè)缺氧條件下,抑制RPE細(xì)胞中的slit2基因?qū)F/6A細(xì)胞遷移能...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染ＲＰＥ細(xì)胞后ｓｌｉｔ２?ｍＲＮＡ及蛋白表達(dá)的變化（＊Ｐ＜〇．〇５）??

１．２．７統(tǒng)計(jì)學(xué)方法??所有的實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)３次，所得結(jié)果均用Ｘ?＋?Ｓ表示。使用ＳＰＳＳ１７．?０統(tǒng)計(jì)件，采用單因素方差分析及ｔ檢驗(yàn)法分析結(jié)果。??２．結(jié)果??２．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染后，Ｒ化細(xì)胞中ｓｌｉｔ２ｍＲＮＡ及蛋白表達(dá)水平??ＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染Ｒ....

圖１．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染ＲＰＥ細(xì)胞后ｓｌｉｔ２?ｍＲＮＡ及蛋白表達(dá)的變化（＊Ｐ＜〇．〇５）??

１．２．７統(tǒng)計(jì)學(xué)方法??所有的實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)３次，所得結(jié)果均用Ｘ?＋?Ｓ表示。使用ＳＰＳＳ１７．?０統(tǒng)計(jì)件，采用單因素方差分析及ｔ檢驗(yàn)法分析結(jié)果。??２．結(jié)果??２．１?Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染后，Ｒ化細(xì)胞中ｓｌｉｔ２ｍＲＮＡ及蛋白表達(dá)水平??ＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示Ａｄ－ｓｌｉｔ２轉(zhuǎn)染Ｒ....

本文編號(hào)：3938257