AMPA受體在新生大鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元興奮毒性中的表達
發(fā)布時間:2024-03-08 19:39
目的觀察水楊酸鈉(sodium salicylate, SS)作用新生SD大鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元(spiral ganglion neuron, SGN)后,SGN中α-氨-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid receptors, AMPAR)在分子水平的表達改變。方法實驗動物為10只新生3天的SD大鼠,分為免疫熒光染色組、正常對照組、水楊酸鈉組、AMPAR激動劑組及AMPAR拮抗劑組,每組2只大鼠;采用免疫熒光染色技術(shù)檢測各組大鼠SGN中AMPA受體GluA2的表達;采用FQ-PCR技術(shù)檢測SGN和大腦皮層神經(jīng)元中AMPAR各亞單位mRNA的表達;采用Western Blot技術(shù)檢測SGN中GluA2的蛋白表達。結(jié)果免疫熒光染色顯示,新生SD大鼠SGN胞體和軸突上均有AMPA受體GluA2的表達。FQ-PCR發(fā)現(xiàn),①SGN及大腦皮層神經(jīng)元中均有AMPAR亞單位GluA1、GluA2、GluA3和GluA4的表達(簡稱A1、A2、A3、A4),其中SGN中AMPAR各亞單位之...
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圖1熒光顯微鏡下SGN中AMPARGluA2亞單位免疫熒光顯示
SGN原代培養(yǎng)48h呈現(xiàn)出胞體橢圓形或圓形、細胞表面光亮等特征。采用βⅢ-Tubulin陽性染色,SGN呈現(xiàn)出紅色熒光,胞體和軸突均可見明顯的紅色熒光(圖1a);AMPARGluA2陽性染色,呈現(xiàn)綠色熒光,胞體染色較軸突更為明顯(圖1b);將圖1a和圖1b進行融合,呈現(xiàn)出黃色....
圖25mMSS作用SGN30min后AMPA受體A2亞單位膜蛋白及總蛋白表達量變化(±s)(n=6)
與正常對照組(SS處理0min)相比較,5mMSS作用SGN30min后,A2膜蛋白表達明顯降低(P<0.05),而A2總蛋白無明顯改變(圖2及表5)。與正常對照組比較,AMPA(AMPAR激動劑)組、5mMSS組、5mMSS+AMPA組A2膜蛋白相對表達量均....
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