目的:探討自噬對(duì)慢性鼻-鼻竇炎(CRS)患者中人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)誘導(dǎo)的MUC5AC過表達(dá)產(chǎn)生的影響和作用。方法:1.QRT-PCR、IHC、ELISA檢測(cè)CRSsNP、CRSwNP和對(duì)照組的鼻竇黏膜中的HNE、LC3B、JNK、AP-1和MUC5AC表達(dá);2.體外培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細(xì)胞(HNECs),用自噬體與溶酶體融合的抑制劑Bafilomycin A1處理HNE刺激的細(xì)胞,檢測(cè)LC3BII的蛋白含量和MUC5AC的表達(dá);透射電鏡觀察HNE處理后HNECs中的自噬體;3.自噬基因BECN1、ATG5的siRNA慢病毒載體和AP-1的siRNA慢病毒載體作用后,HNE刺激HNECs,qrt-pcr、WB、ELISA檢測(cè)JNK、P-JNK、AP-1、P-AP-1、MUC5AC蛋白和MUC5AC mRNA的表達(dá)情況;JNK特異性阻斷劑作用后,用重組HNE刺激,qrt-pcr、WB、ELISA檢測(cè)AP-1、P-AP-1和MUC5AC蛋白及mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1.與對(duì)照相比,通過qRT-PCR、IHC、ELISA發(fā)現(xiàn)CRSwNP和CRSsNP組的HNE、LC3B、JNK、A...

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圖3.三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻粘膜組織）中JNK、c-Jun的表達(dá)（×400）

16圖3.三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻粘膜組織）中JNK、c-Jun的表達(dá)（×400）。圖A為免疫組織化學(xué)染色的圖片，B為免疫組織化學(xué)結(jié)果用平均光密度值來表示。數(shù)據(jù)以點(diǎn)圖的形式顯示，包含中位數(shù)和四分位數(shù)范圍，采用t檢....

圖4.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）顯示三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常）

第2章CRSsNP、CRSwNP患者鼻黏膜組織中HNE、ATG5、BECN1、JNK、AP-1和MUC5AC的表達(dá)情況2.2.2鼻黏膜組織中HNE蛋白的表達(dá)30例的CRS和15例正常組的鼻黏膜組織行酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）實(shí)驗(yàn)：HNE蛋白的表達(dá)。....

圖5.HNE，ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻黏膜組織中mRNA的相對(duì)表達(dá)水平

ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻黏膜組織中mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。數(shù)據(jù)以點(diǎn)圖的形式顯示，包含中位數(shù)和四分位數(shù)范圍，采用t檢驗(yàn)，#P>0.05，*P<0.05，***P<0.001，****P....

圖6原代鼻黏膜上皮細(xì)胞（×100）

第3章體外原代鼻黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)3.2結(jié)果3.2.1原代鼻黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)酶消化法獲取細(xì)胞，將細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶后，顯微鏡觀察見細(xì)胞呈圓形，折光性好，散在或呈小細(xì)胞團(tuán)分布于培養(yǎng)基中，部分細(xì)胞可見纖毛擺動(dòng)，24h后可見部分細(xì)胞貼壁，呈多角型，少部分細(xì)胞仍可見纖毛擺動(dòng)....

本文編號(hào)：3915019