目的:探討自噬對慢性鼻-鼻竇炎(CRS)患者中人嗜中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)誘導的MUC5AC過表達產生的影響和作用。方法:1.QRT-PCR、IHC、ELISA檢測CRSsNP、CRSwNP和對照組的鼻竇黏膜中的HNE、LC3B、JNK、AP-1和MUC5AC表達;2.體外培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細胞(HNECs),用自噬體與溶酶體融合的抑制劑Bafilomycin A1處理HNE刺激的細胞,檢測LC3BII的蛋白含量和MUC5AC的表達;透射電鏡觀察HNE處理后HNECs中的自噬體;3.自噬基因BECN1、ATG5的siRNA慢病毒載體和AP-1的siRNA慢病毒載體作用后,HNE刺激HNECs,qrt-pcr、WB、ELISA檢測JNK、P-JNK、AP-1、P-AP-1、MUC5AC蛋白和MUC5AC mRNA的表達情況;JNK特異性阻斷劑作用后,用重組HNE刺激,qrt-pcr、WB、ELISA檢測AP-1、P-AP-1和MUC5AC蛋白及mRNA的表達情況。結果:1.與對照相比,通過qRT-PCR、IHC、ELISA發(fā)現(xiàn)CRSwNP和CRSsNP組的HNE、LC3B、JNK、A...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻粘膜組織）中JNK、c-Jun的表達（×400）

16圖3.三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻粘膜組織）中JNK、c-Jun的表達（×400）。圖A為免疫組織化學染色的圖片，B為免疫組織化學結果用平均光密度值來表示。數(shù)據(jù)以點圖的形式顯示，包含中位數(shù)和四分位數(shù)范圍，采用t檢....

圖4.酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）顯示三組（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常）

第2章CRSsNP、CRSwNP患者鼻黏膜組織中HNE、ATG5、BECN1、JNK、AP-1和MUC5AC的表達情況2.2.2鼻黏膜組織中HNE蛋白的表達30例的CRS和15例正常組的鼻黏膜組織行酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）實驗：HNE蛋白的表達。....

圖5.HNE，ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻黏膜組織中mRNA的相對表達水平

ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常組的鼻黏膜組織中mRNA的相對表達水平。數(shù)據(jù)以點圖的形式顯示，包含中位數(shù)和四分位數(shù)范圍，采用t檢驗，#P>0.05，*P<0.05，***P<0.001，****P....

圖6原代鼻黏膜上皮細胞（×100）

第3章體外原代鼻黏膜上皮細胞培養(yǎng)及實驗3.2結果3.2.1原代鼻黏膜上皮細胞培養(yǎng)酶消化法獲取細胞，將細胞接種于培養(yǎng)瓶后，顯微鏡觀察見細胞呈圓形，折光性好，散在或呈小細胞團分布于培養(yǎng)基中，部分細胞可見纖毛擺動，24h后可見部分細胞貼壁，呈多角型，少部分細胞仍可見纖毛擺動....

本文編號：3915019