目的:探討維生素B6(VitB6)滴眼液對大氣顆粒物(PM_2.5)誘導(dǎo)的小鼠干眼(DED)的治療效果。方法:選用60只6⁸周齡的雄性Balb/c小鼠,隨機(jī)選取10只作為正常對照組,其余50只使用5mg/mL PM2.5滴眼液在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下誘導(dǎo)干眼(右眼,4次/日,連續(xù)14天)。通過Schirmer I試驗(SIT)、淚膜破裂時(TBUT)檢測、角膜熒光素染色(FL)、虎紅染色(RB)、麗絲胺綠染色(LG)及炎癥指數(shù)評分這些相應(yīng)指標(biāo),并對比正常小鼠相應(yīng)的眼表數(shù)據(jù)來評判造模效果。造模14天,篩選符合干眼標(biāo)準(zhǔn)的小鼠,隨機(jī)分為4組:A組,干眼模型組;B、C、D三組分別為PBS治療組、0.02%VitB6治療組、0.05%VitB6治療組。每日4次,連續(xù)14天。在治療前及治療第7、14天依次進(jìn)行上述淚液分泌量檢測、淚膜功能檢測、活體染色、炎癥指數(shù)評分以及角膜共聚焦顯微鏡檢查。治療第14天,摘除小鼠眼球、眼瞼、角膜組織,行蘇木精-伊紅染色(HE)、過碘酸-希夫染色(PAS)、TUNEL染色、免疫熒光染色及Western Blot檢測。結(jié)果:治療前,各組的小...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 概述
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗動物
        2.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)環(huán)境
        2.1.2 實驗動物模型制作
        2.1.3 實驗動物分組
    2.2 PM_2.5的準(zhǔn)備
    2.3 實驗試劑及制備
        2.3.1 實驗試劑
        2.3.2 常用實驗試劑的制備
    2.4 實驗儀器
    2.5 實驗方法
        2.5.1 淚液分泌量檢測
        2.5.2 淚膜破裂時間檢測
        2.5.3 熒光素染色
        2.5.4 麗絲胺綠染色和虎紅染色
        2.5.5 炎癥指數(shù)評分
        2.5.6 共聚焦顯微鏡檢查
        2.5.7 眼部組織取材法
        2.5.8 石蠟切片&HE染色
        2.5.9 石蠟切片&PAS染色
        2.5.10 角膜組織TUNEL染色
        2.5.11 冰凍切片&免疫熒光染色
        2.5.12 免疫印跡試驗(Western Blot)
    2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 VitB6對淚膜的穩(wěn)定性及角膜上皮的影響
    3.2 VitB6在角膜神經(jīng)損傷中的作用
    3.3 VitB6治療后角結(jié)膜HE染色情況
    3.4 VitB6對角膜上皮細(xì)胞凋亡的影響
    3.5 VitB6對結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)量的影響
    3.6 VitB6對角膜鱗狀上皮化生的影響
    3.7 WB檢測VitB6對角膜炎癥因子NF-κB p65、p-NF-κB p65 的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3873446