本文關(guān)鍵詞：單眼形覺剝奪弱視治療前后突觸素調(diào)節(jié)視皮質(zhì)突觸可塑性特征，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景弱視是指在視覺發(fā)育關(guān)鍵期非正常的視覺經(jīng)驗(yàn)引發(fā)的非器質(zhì)性的單眼或雙眼最佳矯正視力下降(≤0.8)。據(jù)統(tǒng)計(jì),世界上每年約有1.6%-3.6%的人遭受到弱視的損害。目前弱視的發(fā)病機(jī)制尚不明確,臨床上多以單眼遮蓋治療為主。近年來(lái),視覺發(fā)育神經(jīng)元突觸可塑性在視覺發(fā)育關(guān)鍵期所起的作用成為人們關(guān)注的焦點(diǎn),但相關(guān)研究主要集中在對(duì)突觸后致密區(qū)超微結(jié)構(gòu)及突觸后致密物-95的研究上,對(duì)于突觸前末梢形態(tài)和功能改變研究較少。突觸素(synaptophysin, SYP)是主要的突觸前末梢膜整合蛋白,占總突觸囊泡蛋白的6%-10%,它在軸突生長(zhǎng)和突觸發(fā)生、神經(jīng)遞質(zhì)釋放、學(xué)習(xí)記憶及突觸可塑性等生理活動(dòng)中具有重要作用。現(xiàn)有研究推測(cè)SYP可能在早期發(fā)育和成熟的視皮層中發(fā)揮作用,豐富環(huán)境(enriched environment, EE)重新激活成年弱視大鼠視皮層可塑性,而關(guān)鍵期內(nèi)SYP在視皮層的表達(dá)規(guī)律及反轉(zhuǎn)縫合(reverse suture, RS)與EE聯(lián)合治療對(duì)其產(chǎn)生的作用目前未見相關(guān)報(bào)道。目的本研究通過(guò)建立關(guān)鍵期內(nèi)單眼形覺剝奪弱視大鼠模型,觀察反轉(zhuǎn)縫合及豐富環(huán)境治療前后視皮質(zhì)SYP的表達(dá)規(guī)律,探討SYP與視皮質(zhì)神經(jīng)元可塑性的關(guān)系。方法1 14d健康SD大鼠72只,雌雄不限(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,清潔動(dòng)物),隨機(jī)分為6組,每組12只：NCⅠ組和NCⅡ組為正常對(duì)照組,MDⅠ組、MDⅡ組、RS組和RS+EE組為單眼剝奪組。MDⅠ組、MDⅡ組、RS組和RS+EE組分別行右眼單眼瞼縫合,MDⅠ組于28d齡、MDⅡ組于42d齡對(duì)剝奪眼行圖形視覺誘發(fā)電位(P-VEP)檢測(cè)；RS組、RS+EE組于28d打開剝奪眼并對(duì)剝奪眼行P-VEP檢測(cè),同時(shí)縫合對(duì)側(cè)眼瞼行遮蓋治療,RS組放于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境、RS+EE組放于EE中飼養(yǎng),14d后(42d齡)對(duì)剝奪眼再次行P-VEP檢測(cè)；NCⅠ組、NCⅡ組未作任何處理,NCⅠ組于28d齡、NCⅡ組于42d齡右眼行P-VEP檢測(cè)。各組經(jīng)P-VEP檢測(cè)后進(jìn)行灌注取材。2 HE染色對(duì)比觀察各組大鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元形態(tài)改變,免疫組織化學(xué)染色方法和RT-PCR檢測(cè)各組大鼠視皮質(zhì)SYP的表達(dá)和SYP mRNA轉(zhuǎn)錄水平的改變。3光學(xué)顯微鏡下觀察視皮質(zhì)SYP的表達(dá)變化,在相同光強(qiáng)度、放大倍數(shù)下采集圖像,取相同序號(hào)切片行組間觀察比較,顯微圖像分析儀檢測(cè)視皮質(zhì)SYP陽(yáng)性標(biāo)記的平均光密度值(AOD)。所得28d齡(NCⅠ組,MDⅠ組)兩組AOD值采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行分析；42d齡大鼠(NCⅡ組、MDⅡ組、RS組、RS+EE組)4樣本數(shù)據(jù)采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較、LSD檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。所用統(tǒng)計(jì)軟件均為SPSS19.0,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1 P-VEP檢測(cè)結(jié)果：NCⅠ組、NCⅡ組大鼠均具有穩(wěn)定的P-VEP波形、潛伏期和振幅均在正常范圍； 同年齡段大鼠MDⅠ組、MDⅡ組剝奪眼與NCⅠ組、NCⅡ組同側(cè)眼相比,其P-VEP的P100波潛伏期明顯延長(zhǎng),振幅降低(P0.01),而剝奪組正常眼和正常組同側(cè)眼也具有穩(wěn)定的P-VEP波形,但兩組P100波的潛伏期和振幅,無(wú)明顯差異(P0.05)。同年齡段RS組與MDⅡ組相比,P-VEP的Ploo波不穩(wěn)定程度減輕,潛伏期縮小、振幅上升(P0.05),但與同年齡段NCⅡ組相比,其P1oo波仍不穩(wěn)定,且潛伏期延長(zhǎng)、振幅下降(P0.05)；同年齡段RS+EE組與RS組、MDⅡ組相比,P-VEP的Ploo波不穩(wěn)定程度明顯減弱,且潛伏期縮小、振幅提高(P0.05),與同年齡段NCⅡ組,其差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2 HE染色結(jié)果：NCⅠ組和NCⅡ組大鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)各異,核染為藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)染為紅色,視皮質(zhì)神經(jīng)元呈層狀整齊分布；MDⅠ組、MDⅡ組、RS組、RS+EE組大鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元未見明顯異常。3免疫組化結(jié)果：大鼠視皮質(zhì)SYP陽(yáng)性產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀或點(diǎn)狀,特征性的表達(dá)于神經(jīng)元突觸末端。視皮質(zhì)17區(qū)各層均發(fā)現(xiàn)有SYP陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物,各陰性對(duì)照組未見有特異性染色。MDⅠ組大鼠視皮質(zhì)SYP的AOD平均值較NCⅠ組低,且差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.074, P0.01); MDII組大鼠視皮質(zhì)SYP的AOD平均值較NCII組低,且差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.544,P0.01)；NCⅡ組、MDⅡ組、RS組、RS+EE組大鼠視皮質(zhì)SYP的AOD值間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=25.503,P0.001),且RS+EE組AOD值較RS組高(P=0.029),RS組AOD值較MDⅡ組高(P0.001), MDII組、RS組的AOD值均低于NCⅡ組(P0.05),RS+EE組AOD值與NCⅡ組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＝0.756)。4 RT-PCR結(jié)果：各組大鼠視皮質(zhì)中均可見SYP mRNA表達(dá)。MDI組大鼠視皮質(zhì)SYP mRNA的表達(dá)量較NCI組明顯減少(t=5.608,P0.05); MDII組大鼠視皮質(zhì)SYPmRNA的表達(dá)量較NCⅡ組明顯減少(t=7.559,P0.01); NCII組、MDⅡ組、RS組、RS+EE組大鼠視皮質(zhì)SYP mRNA的表達(dá)量間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=33.556,P0.001),且RS+EE組SYP mRNA的表達(dá)量較RS組高(P=-0.003),RS組SYP mRNA的表達(dá)量較MDⅡ組高(P0.001), MDII組、RS組大鼠視皮質(zhì)SYP mRNA的表達(dá)量均較NCⅡ組減少(P0.05),而NCⅡ組和RS+EE組兩組間SYP mRNA的表達(dá)量無(wú)明顯差異(P=0.693)。結(jié)論1單眼剝奪、反轉(zhuǎn)縫合及豐富環(huán)境治療影響大鼠視皮質(zhì)SYP的表達(dá),推測(cè)SYP影響視皮質(zhì)神經(jīng)元突觸可塑性,且參與了視覺發(fā)育視皮質(zhì)可塑性的變化過(guò)程,是弱視發(fā)病的重要分子機(jī)制之一。2關(guān)鍵期內(nèi)反轉(zhuǎn)縫合及豐富環(huán)境治療突觸素對(duì)弱視大鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元可塑性的變化有一定作用,為臨床上以遮蓋健眼和刺激弱視眼治療兒童弱視提供了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：弱視 視皮質(zhì) SYP 反轉(zhuǎn)縫合 豐富環(huán)境
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R777.44
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-15
• 1 材料與方法15-23
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-25
• 3 討論25-30
• 4 結(jié)論30
• 5 小結(jié)30-31
• 參考文獻(xiàn)31-38
• 附表38-41
• 附圖41-47
• 綜述：突觸素與視覺發(fā)育的研究進(jìn)展47-61
• 參考文獻(xiàn)54-61
• 附錄61-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況62-63
• 致謝63-64
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷64

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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  本文關(guān)鍵詞：單眼形覺剝奪弱視治療前后突觸素調(diào)節(jié)視皮質(zhì)突觸可塑性特征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：383733