目的:前期研究中發(fā)現(xiàn),circFIP1L1-miR-1253-SFN信號(hào)軸在鼻咽癌(NPC)放療中起著重要作用,本課題擬研究circFIP1L1-miR-1253-SFN信號(hào)軸通路在NPC轉(zhuǎn)移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)中的具體作用機(jī)制,為臨床鼻咽癌轉(zhuǎn)移治療研究提供有效的靶點(diǎn)。方法:(1)收集鼻咽癌患者和正常人血清,qRT-PCR檢測(cè)血清中circFIP1L1和miR-1253的表達(dá)水平;(2)qRT-PCR檢測(cè)鼻咽部永生化上皮細(xì)胞NP69、NPC細(xì)胞株5-8F及6-10B中circFIP1L1、miR-1253、SFN的表達(dá)水平;(3)構(gòu)建circFIP1L1、circFIP1L1 NC載體轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞株5-8F及6-10B,qRT-PCR檢測(cè)circFIP1L1、miR-1253、SFN表達(dá)水平;(4)NPC細(xì)胞株5-8F、6-10B瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-1253-mimic,miR-1253-inhibitor及其空載體組,經(jīng)qRT-PCR檢測(cè)circFIP1L1、SFN表達(dá)水平;(5)NPC細(xì)胞6-10B瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-1253-mimic,miR-1253-inhibitor,Wes...

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞索引
第1章 前言
    1.1 鼻咽癌病因及與治療現(xiàn)狀
    1.2 14-3-3σ蛋白與腫瘤
    1.3 miRNA與腫瘤
    1.4 circRNA與腫瘤
    1.5 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)與腫瘤
    1.6 前期工作基礎(chǔ)
    1.7 研究?jī)?nèi)容
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 質(zhì)粒載體的構(gòu)建
        2.2.3 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        2.2.4 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 蛋白免疫印跡(Western blot)實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第3章 結(jié)果
    3.1 circFIP1L1/miR-1253/SFN的表達(dá)情況
        3.1.1 血清中circFIP1L1/miR-1253 的表達(dá)情況
        3.1.2 鼻咽部永生化上皮細(xì)胞(NP69)、鼻咽癌細(xì)胞5-8F、6-10B中circFIP1L1、miR-1253、SFN mRNA的表達(dá)情況
        3.1.3 circFIP1L1對(duì)miR-1253、SFN表達(dá)水平的影響
    3.2 .miR-1253與SFN的關(guān)系
        3.2.1 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-1253與SFN結(jié)合情況
        3.2.2 miR-1253對(duì)SFN表達(dá)水平的影響
        3.2.3 miR-1253與鼻咽癌EMT關(guān)系
    3.3 circFIP1L1和miR-1253對(duì)SFN表達(dá)
    3.4 circFIP1L和 miR-1253對(duì)14-3-3σ及鼻咽癌EMT的影響
    3.5 circFIP1L1、miR-1253 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移侵襲的影響
        3.5.1 鼻咽癌細(xì)胞遷移侵襲與miR-1253的關(guān)系
        3.5.2 circFIP1L1 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移侵襲的影響
        3.5.3 circFIP1L1和miR-1253 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移侵襲的影響
    3.6 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探究circFIP1L1 對(duì)鼻咽癌的影響
第4章 討論
    4.1 circFIP1L1 與鼻咽癌
    4.2 miR-1253與腫瘤
    4.3 circFIP1L1與miR-1253及SFN的關(guān)系
    4.4 circFIP1L1/miR-1253/SFN對(duì)鼻咽癌EMT表達(dá)的調(diào)控作用
    4.5 circFIP1L1/miR-1253/SFN對(duì)鼻咽癌遷移侵襲的影響
    4.6 研究不足之處
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    References
本研究基金資助項(xiàng)目
攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3795820