目的:觀察舒洛地特(SDX)在糖尿病狀態(tài)下對視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。方法:(1)采用高脂喂養(yǎng)及腹腔注射鏈脲佐菌素的方法構(gòu)建C57BL/6小鼠的2型糖尿病模型,對小鼠腹腔注射SDX或等體積生理鹽水治療12周。用伊文思藍(lán)法檢測視網(wǎng)膜微血管滲漏及微血管密度改變;用Western blot、免疫熒光等方法檢測各組小鼠視網(wǎng)膜中NLRP3炎癥小體成分、緊密連接蛋白1(ZO-1)及NADPH氧化酶4(NOX4)的表達(dá)情況。(2)用高糖處理人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HRMECs),并與梯度濃度的SDX共處理;用腺病毒感染HRMECs以過表達(dá)NOX4或者用siRNA轉(zhuǎn)染HRMECs以敲減NOX4,觀察NLRP3炎癥小體成分、NOX4、ZO-1和VE-鈣黏著蛋白(VE-Cad)的表達(dá)情況,以及活性氧簇(ROS)的生成情況。結(jié)果:(1)SDX處理增加糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中ZO-1蛋白的表達(dá),抑制糖尿病小鼠視網(wǎng)膜微血管滲漏,增加糖尿病小鼠視網(wǎng)膜微血管密度和節(jié)細(xì)胞數(shù)量,并抑制NLRP3炎癥小體的活化(P<0. 05)。(2)在高糖刺激的HRMECs中,SDX處理增加ZO-1和VE-Cad蛋白的表達(dá),顯著...

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 動物與細(xì)胞
    2 主要試劑
    3 主要方法
        3.1 實驗動物模型建立
        3.2 舒洛地特治療
        3.3 伊文思藍(lán)尾靜脈注射
        3.4 HRMECs處理
        3.5 Western blot
        3.6 免疫熒光技術(shù)
        3.7 ROS檢測
    4 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1 SDX減輕糖尿病小鼠視網(wǎng)膜微血管滲漏
    2 SDX減輕糖毒性引起的內(nèi)皮細(xì)胞損傷
    3舒洛地特在體內(nèi)抑制高糖導(dǎo)致的NLRP3炎癥小體激活
    4 SDX在HRMECs中抑制高糖導(dǎo)致的NLRP3炎癥小體激活
    5 SDX在HRMECs中減少NOX4誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化
    6 SDX在HRMECs中抑制NOX4介導(dǎo)的ROS生成
    7 SDX在HRMECs中抑制NOX4誘導(dǎo)的連接蛋白降解
討論



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