20s蛋白酶體在年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體前囊膜及核中表達(dá)的初步研究
本文關(guān)鍵詞:20s蛋白酶體在年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體前囊膜及核中表達(dá)的初步研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過檢測隨著晶狀體核硬度改變20s蛋白酶體(20s proteasome)在晶狀體前囊膜及核中的表達(dá)水平,探討20s蛋白酶體降解凋亡因子及氧化蛋白的作用與ARC發(fā)病的相關(guān)性。方法:選取2014年1月-2014年7月在皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院眼科病房中確診為年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者,除外伴眼部其他疾病及全身性疾病。收集行小切口白內(nèi)障囊外摘除術(shù)中的白內(nèi)障晶狀體核30例,根據(jù)核硬度分為A(Ⅱ級軟核)、B(Ⅲ級中等硬度核)、C(Ⅳ級硬核、Ⅴ級極硬核)三組,比較晶狀體核三組間性別、年齡、眼別、發(fā)病時間等一般臨床資料無差異后,應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western-blot)法檢測20s proteasome在三組ARC晶狀體核中的含量;收集行小切口白內(nèi)障囊外摘除術(shù)中的白內(nèi)障晶狀體前囊膜30例,根據(jù)核硬度分為A(Ⅱ級軟核)、B(Ⅳ級硬核、Ⅴ級極硬核)兩組,比較晶狀體前囊膜兩組間性別、年齡、眼別、發(fā)病時間等一般臨床資料無差異后,應(yīng)用蛋白免疫印跡(western-blot)法檢測20s proteasome在兩組ARC晶狀體前囊膜中的含量;應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對所得數(shù)據(jù)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:性別、年齡、眼別、發(fā)病時間在晶狀體核各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);性別、年齡、眼別、發(fā)病時間在晶狀體前囊膜各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);應(yīng)用Western-blot法檢測20s proteasome含量在晶狀體核各組間差異顯著,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);晶狀體兩組前囊膜樣本中可見20s proteasome在軟核中含量明顯高于硬核、極硬核。結(jié)論:ARC患者晶狀體核及前囊膜中20s蛋白酶體含量隨著晶狀體混濁度及核硬度的加深而降低。而20s蛋白酶體是體內(nèi)降解凋亡因子及氧化損傷蛋白的重要酶體,它的減少關(guān)系到晶狀體蛋白的異常改變,提示20s蛋白酶體含量的改變與年齡相關(guān)性白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:年齡相關(guān)性白內(nèi)障 20s蛋白酶體 蛋白免疫印跡法
【學(xué)位授予單位】:皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R776.1
【目錄】:
- 摘要8-10
- ABSTRACT10-12
- 前言12-17
- 實驗材料與方法17-28
- 1 實驗材料17-20
- 1.1 實驗對象17
- 1.2 實驗主要儀器17-18
- 1.3 實驗主要藥物與試劑18-19
- 1.4 主要試劑的配制19-20
- 2 實驗方法20-28
- 2.1 一般臨床資料分析20
- 2.2 western-blot實驗檢測年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體核中20s蛋白酶體的表達(dá)20-26
- 2.2.1 患者晶狀體核標(biāo)本的收集20-21
- 2.2.2 患者晶狀體核標(biāo)本中總蛋白的提取21
- 2.2.3 患者晶狀體核標(biāo)本中總蛋白濃度測定21-23
- 2.2.4 western-blot實驗步驟及Bandscan灰度值測定23-26
- 2.3 western blot實驗檢測年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體前囊膜中 20s白酶體的表達(dá)26-27
- 2.3.1 患者晶狀體前囊膜的收集、總蛋白提取及濃度測定26-27
- 2.3.2 western-blot實驗步驟及Bandscan灰度值測定27
- 2.4 統(tǒng)計分析27-28
- 結(jié)果28-34
- 1 年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體核的相關(guān)研究結(jié)果28-30
- 1.1 臨床資料對比28-29
- 1.2 western-blot法檢測 20s蛋白酶體在三組晶狀體核中的表達(dá)29-30
- 1.2.1 對A、B、C三組進(jìn)行顯色照片照相結(jié)果29
- 1.2.2 對各組晶狀體核中蛋白樣品進(jìn)行Bandscan灰度值測定29-30
- 2 年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體前囊膜的相關(guān)研究結(jié)果30-34
- 2.1 臨床資料對比30-31
- 2.2 western-blot法檢測 20s蛋白酶體在兩組晶狀體前囊膜中的表達(dá)31-34
- 2.2.1 對A、B兩組進(jìn)行顯色照片照相結(jié)果31-32
- 2.2.2 對兩組晶狀體前囊膜中蛋白樣品進(jìn)行Bandscan灰度值測定32-34
- 討論34-40
- 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-46
- 綜述46-55
- 參考文獻(xiàn)53-55
- 作者簡介及讀研期間主要科研成果55-56
- 致謝56
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