由角膜病引發(fā)的角膜混濁是致盲的重要原因之一。Mycn是Myc原癌基因家族的一員,主要參與細(xì)胞增殖、凋亡、分化等多種細(xì)胞過程。國內(nèi)外對Mycn基因的研究重點(diǎn)圍繞腫瘤的發(fā)生。在先前的研究中,本實(shí)驗(yàn)室使用化學(xué)誘變劑乙烷基亞硝基脲（ENU）誘導(dǎo)小鼠突變獲得一例Mycn基因點(diǎn)突變角膜混濁小鼠模型。隨后從美國杰克遜實(shí)驗(yàn)室引入MycntmlPsk/J（Mycnflox/+）鼠以及廣泛表達(dá)Cre重組酶的EIIa-Cre工具鼠,進(jìn)一步確定了Mycn基因突變與角膜混濁的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)部分角膜混濁小鼠在初生時(shí)呈眼瞼開放表型,故將角膜混濁小鼠分為初生時(shí)眼瞼閉合型及開放型兩種,并已對眼瞼開放型角膜病的發(fā)生原因進(jìn)行研究。本研究主要目的是確定Mycn基因上皮特異性敲除是否也可以獲得類似的角膜病表型并進(jìn)一步對其中眼瞼閉合型角膜病的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行初探。1.Mycn基因上皮特異性敲除角膜病小鼠的獲得將從美國杰克遜實(shí)驗(yàn)室引入的Mycntm1Psk/J(Mycnflox/+小鼠以及皮膚特異性表達(dá)Cre重組酶的K14-Cre工具鼠兩種小鼠配種,最終獲得上皮特異性Mycn基因敲除小鼠（Mycn-/+）,該小鼠出生后表現(xiàn)為角膜混濁... 

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
文獻(xiàn)綜述
    一 MYC的研究進(jìn)展
        1 MYC的發(fā)現(xiàn)
        2 MYC蛋白結(jié)構(gòu)及功能
        3 MYC的生物學(xué)功能
            3.1 MYC與細(xì)胞分化
            3.2 MYC與細(xì)胞周期
            3.3 MYC與細(xì)胞凋亡
            3.4 MYC與細(xì)胞代謝
        4 Myc家族基因
            4.1 c-Myc
            4.2 l-Myc
            4.3 Mycn
                4.3.1 Mycn與腫瘤
                4.3.2 Mycn在發(fā)育中的研究
    二 角膜與角膜病
        1 角膜的結(jié)構(gòu)與功能
            1.1 上皮細(xì)胞層(Epithelium)
            1.2 前彈性層(Bowman's membrane)
            1.3 基質(zhì)層(Stroma)
            1.4 后彈性層(Descemet's membrane)
            1.5 內(nèi)皮層(Endothelium)
        2 角膜病
            2.1 peters'異常(PA)
            2.2 先天性內(nèi)皮營養(yǎng)不良(CHED)
            2.3 后部多形性營養(yǎng)不良(PPMD)
    三 晶狀體泡及角膜的發(fā)生
        1 胚眼的發(fā)生概況
        2 與晶狀體泡脫離相關(guān)的部分基因
            2.1 E-cadherin、N-cadherin (E-和N-鈣粘基因)
            2.2 FoxE3
            2.3 AP-2α
            2.4 Pax6
            2.5 c-Myc
    四 本研究目的與意義
實(shí)驗(yàn)部分
    第一章 Mycn基因上皮特異性敲除角膜病小鼠的獲得
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
                1.2.1 上皮特異性Mycn基因敲除小鼠的獲得
                1.2.2 基因型鑒定
        2 結(jié)果
            2.1 Mycn基因上皮特異性敲除小鼠繁殖與分型
            2.2 Mycn~(-/+)小鼠眼部表型
            2.3 遺傳實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果
        3 討論
    第二章 Mycn~(-/+)小鼠角膜病理組織學(xué)觀察
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
                1.2.1 小鼠獲得
                1.2.2 小鼠角膜組織HE染色
                1.2.3 小鼠角膜組織免疫組織化學(xué)染色
        2 結(jié)果
            2.1 小鼠眼球HE染色結(jié)果
            2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
                2.2.1 細(xì)胞角蛋白K12、K14及K10免疫組化結(jié)果
                2.2.2 整合素亞單位beta4免疫組化結(jié)果
        3 討論
    第三章 Mycn~(-/+)小鼠晶狀體泡分離缺陷及其機(jī)制的研究
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
                1.2.1 胚胎期小鼠的獲得
                1.2.2 小鼠胚胎眼免疫組織化學(xué)分析
        2 結(jié)果
            2.1 HE染色結(jié)果
            2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
                2.2.1 E-cadherin免疫組化結(jié)果
                2.2.2 N-cadherin免疫組化結(jié)果
                2.2.3 FOXE3免疫組化結(jié)果
        3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Map3k1調(diào)控小鼠眼瞼閉合的研究進(jìn)展[J]. 吳劉成,邵義祥.  動物學(xué)雜志. 2011(03)

碩士論文
[1]Mycn突變角膜混濁小鼠角膜病變特點(diǎn)及機(jī)制的研究[D]. 漆重陽.揚(yáng)州大學(xué) 2019
[2]Mycn基因敲除引起小鼠角膜混濁及其機(jī)制的初步研究[D]. 陳瑞.揚(yáng)州大學(xué) 2019
[3]角膜混濁小鼠模型獲得及其分子基礎(chǔ)研究[D]. 倪俊達(dá).揚(yáng)州大學(xué) 2015



本文編號：3679231