目的探討新型光遺傳學(xué)工具Channelrhodopsin-XXM2.0 （XXM2.0）、Channelrhodopsin-PsCatCh2.0 （PsCatCh2.0）的光敏感性及動(dòng)力學(xué)特征,分析其是否可用于光遺傳學(xué)視覺(jué)功能的恢復(fù)。方法通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)將XXM2.0和PsCatCh2.0的基因片段連接到包含抗氨芐青霉素篩選基因和報(bào)告基因的載體pCIG （c）-msFoxn3上,形成新質(zhì)粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0、pCIG （c）-msFoxn3-PsCatCh2.0。將構(gòu)建的新質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到HEK 293T細(xì)胞上,用HEKA膜片鉗系統(tǒng)行全細(xì)胞模式記錄對(duì)光反應(yīng)。在2.7×1016、4.7× 1015、6.4×1014 photons/ （cm2·s）的光強(qiáng)下記錄電流大小;在2.7×1016 photons/ （cm2·s）光強(qiáng)下刺激XXM2.0、PsCatCh2.0并讓其充分恢復(fù),在Clampfit 10.6軟件中分析開(kāi)放和關(guān)閉時(shí)間常數(shù);在相同光強(qiáng)下,設(shè)置2～ 32 Hz的光脈沖刺激,記錄XXM2.0、PsCatCh2.0的響應(yīng)情況,并在重復(fù)光刺激后間隔4000 m... 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]光遺傳學(xué)在視網(wǎng)膜色素變性治療中的研究進(jìn)展[J]. 張軼,黃熙,張軍軍.  中華眼底病雜志. 2018 (06)
[2]光遺傳學(xué)技術(shù)及其在視網(wǎng)膜變性性疾病治療中的應(yīng)用[J]. 沈雨濛,邢怡橋,沈吟.  中華眼底病雜志. 2016 (03)



本文編號(hào)：3660269