發(fā)布時間：2022-07-13 15:12

　　目的探討新型光遺傳學工具Channelrhodopsin-XXM2.0 （XXM2.0）、Channelrhodopsin-PsCatCh2.0 （PsCatCh2.0）的光敏感性及動力學特征,分析其是否可用于光遺傳學視覺功能的恢復。方法通過分子生物學技術(shù)將XXM2.0和PsCatCh2.0的基因片段連接到包含抗氨芐青霉素篩選基因和報告基因的載體pCIG （c）-msFoxn3上,形成新質(zhì)粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0、pCIG （c）-msFoxn3-PsCatCh2.0。將構(gòu)建的新質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到HEK 293T細胞上,用HEKA膜片鉗系統(tǒng)行全細胞模式記錄對光反應。在2.7×1016、4.7× 1015、6.4×1014 photons/ （cm2·s）的光強下記錄電流大小;在2.7×1016 photons/ （cm2·s）光強下刺激XXM2.0、PsCatCh2.0并讓其充分恢復,在Clampfit 10.6軟件中分析開放和關(guān)閉時間常數(shù);在相同光強下,設置2～ 32 Hz的光脈沖刺激,記錄XXM2.0、PsCatCh2.0的響應情況,并在重復光刺激后間隔4000 m... 

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【參考文獻】：
期刊論文
[1]光遺傳學在視網(wǎng)膜色素變性治療中的研究進展[J]. 張軼,黃熙,張軍軍.  中華眼底病雜志. 2018 (06)
[2]光遺傳學技術(shù)及其在視網(wǎng)膜變性性疾病治療中的應用[J]. 沈雨濛,邢怡橋,沈吟.  中華眼底病雜志. 2016 (03)



本文編號：3660269