目的本課題組前期研究首次發(fā)現(xiàn),抑癌基因wwox在鼻咽癌組織中表達降低,且隨患者病情進展而逐步下降,并與淋巴結轉移相關,提示抑癌基因wwox與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展有關。鼻咽癌與EB病毒（EBV）感染密切相關,而AKT/mTOR信號通路被視為癌細胞存活的首要通路,本研究以EBV的主要致癌基因LMP1為切入點,初步探討EBV主要致癌基因LMP1是否通過AKT/mTOR信號通路調(diào)控抑癌基因WWOX的表達。方法1.LMP分別與AKT/mTOR通路、抑癌基因WWOX關系的研究應用Western blot、qPCR檢測鼻咽癌細胞株CNE1和CNE1-LMP1 AKT/mTOR通路（Akt、p-Akt、p70S6K和p-p70S6K）以及WWOX的表達情況,探討LMP1與/AKT/mTOR通路和WWOX的關系。2.初步驗證LMP1通過AKT/mTOR通路調(diào)控WWOX表達的研究以AKT/mTOR信號通路靶向抑制劑（雷帕霉素）抑制CNE1-LMP1細胞株,Western blot、qPCR檢測抑制前后VKT/mTOR通路重要表達蛋白（Akt、 p-Akt、p70S6K和p-p70S6K）、WWOX的表達情況,... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＬＭＰｌ結構功能??巧ｇ．ｌ?ＬＭＰｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｆｕｎｃｔｉｏｎ??

在ＣＮＥ１－ＬＭＰ１細胞中，ＷＷＯＸ基因ｍＲＮＡ、蛋白的表達水平較??ＣＮＥ１細胞均下降，戶分別為０．０２５，化００２，有統(tǒng)計學意義，提示ＬＭＰ１??與ＷＷＯＸ表達相關，如圖９所示。??在鼻咽癌細胞株ＣＮＥ１與ＣＮＥ１－ＬＭＰ１中，ＡＫＴ／ｍＴＯ民通路中關鍵??蛋白Ａｋｔ、ｐ－Ａｋｔ、ｐ７０％Ｋ?和ｐ－ｐ７０％Ｋ表達，各戶值分別為０．０７５，?０．００８，??０．１２４，?０．０３４，其中Ａｋｔ、ｐ７０％Ｋ在ＣＮＥ１?與ＣＮＥ１－ＬＭＰ１?中的蛋白表達??水平未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學差異，而鱗酸化ｐ－Ａｋｔ、Ｐ－Ｐ７０Ｓ６Ｋ在ＣＮＥ１－ＬＭＰ１中??表達水平高于ＣＮＥ１，差異具有統(tǒng)計學意義，如圖９所示，提示??ＡＫＴ／ｍＴＯＲ信號通路受ＬＭＰ１調(diào)控。??Ａ?Ｂ??ＣＮＥ１?ＣＮＥ１－ＬＭＰ１??■７?不一?■??ＡＫ下?１．０－１?畫?ＣＮＥ１??ＣＮＥ１－ＬＭＰ１??Ｐ－ＡＫＴ?????過?０．８－曲?ｉＳ?????＾?；：：：：?ｉ?巧??。，。。。＂?一?０．６－?＞：：；?凝田??Ｐ７０Ｓ６Ｋ?呈?｜ｇ；?＿??Ｐ－Ｐ７０Ｓ６Ｋ?書０．４－＾顧負誦占??麗。Ｘ???—?ＪＩ?問?＾?［ｐ??ＧＡＰＤＨ?聲。聲成來成少公。七??怒Ｖ馬�！簞┝辏�?戶＾々??圖９?ＬＭＰ１與ＡＫＴ／ｍＴＯ民通路、ＷＷＯＸ的關系研究??Ｆｉｇ．９?ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ＬＭＰ１?ａｎｄ?ＡＫＴ?／?ｍＴＯ民?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｒ

使用通路祀向抑制劑（雷帕霉素）抑制ＣＮＥ１－ＬＭＰ１細胞株后，??ＷＷＯＸ基因ｍＲＮＡ、蛋白的表達水平均升高，戶值分別為０．０３６，?０．０４４，??提示ＡＫＴ／ｍＴＯ民信號通路可調(diào)控ＷＷＯＸ基因表達相關，如圖１０所示。??同時，ＡＫＴ／ｍＴＯ民信號通路的關鍵蛋白Ａｋｔ、ｐ－Ａｋｔ、ｐ７０Ｓ化和??ｐ－ｐ７０％Ｋ表達在使用抑制劑作用前后，各ｆ值分別為０．１３６，０．３５４，??０．１０３，０．０４５，其中Ａｋｔ、ｐ－Ａｋｔ、Ｐ７０Ｓ６Ｋ在用藥處理前后的蛋白表達??水平未見統(tǒng)計學差異，而ｐ－ｐ７０％Ｋ在用藥處理ＣＮＥ１－ＬＭＰ１細胞后??的表達水平低于用藥處理前，差異具有統(tǒng)計學意義，如圖１０所示，說??明雷帕霉素抑制ＡＫＴ／ｍＴＯＲ通路的蛋白表達，ＥＢ－ＬＭＰ１可通過??ＡＫＴ／ｍＴＯ民通路調(diào)控ＷＷＯＸ基因的表達。??Ａ?Ｂ??處理前處理后??ＡＫＴ?１．０］?畫婦Ｓ?前??８－ｐｌｌ?巧處理后??Ｌ——Ｊ?ｇ?圓貿(mào)?＾??Ｐ７０Ｓ６Ｋ?ｐｉ．刖…畫ＩＩ＾?客０．６－讓堅?圓怒?＊??去ｎ?４盤曲?溶巧?ｔｉｌ??Ｐ－Ｐ７０Ｓ６Ｋ?Ｓ?圓ｉ?工誦器?Ｔ?度??ＷＷＯＸ????ｏｑＩＩｓＩ?｜｜＾?ｍｍ?ｌｉＳ：??ＯＡＰＯＨ?＿?＿?－本＇／?／％滬?／■??圖１０使用雷

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]mTOR靶向抑制劑雷帕霉素對慢性粒細胞白血病細胞的作用及機制[D]. 李杰.河北醫(yī)科大學 2012
[2]mTOR靶向抑制劑雷帕霉素對人急性T淋巴細胞白血病細胞的作用及機理研究[D]. 趙妍敏.浙江大學 2009
[3]EB病毒LMP1調(diào)控Op18/stathmin信號傳導機制的研究[D]. 林雪遲.中南大學 2008

碩士論文
[1]PI3K/AKT/mTOR信號通路與鼻咽癌CNE1-LMP1細胞原發(fā)吉非替尼耐藥關系的研究[D]. 冉俊.華中科技大學 2012



本文編號：3583569