研究背景:視網(wǎng)膜變性疾�。≧etinal degeneration,RD）是一類由遺傳、光損傷、老化等多種原因?qū)е碌闹旅ば匝鄄?這類疾病以感光細(xì)胞變性和進(jìn)行性丟失為共同的病理特征。其中感光細(xì)胞變性可引起視覺信息傳入降低,進(jìn)一步導(dǎo)致視網(wǎng)膜各級神經(jīng)元以及膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能改變,進(jìn)而觸發(fā)包括外層視網(wǎng)膜和內(nèi)層視網(wǎng)膜在內(nèi)的整個(gè)視網(wǎng)膜重塑反應(yīng)。視網(wǎng)膜重塑,尤其是內(nèi)層視網(wǎng)膜重塑是目前大部分治療措施療效有限的重要原因。內(nèi)層視網(wǎng)膜重塑與視網(wǎng)膜變性起始因素?zé)o關(guān),主要是內(nèi)層視網(wǎng)膜喪失外層視網(wǎng)膜信號傳入后的代償反應(yīng)。在視網(wǎng)膜變性早期通過調(diào)控外層視網(wǎng)膜重塑維持外層視網(wǎng)膜信息傳入的穩(wěn)定,對于抑制內(nèi)層視網(wǎng)膜重塑和治療視網(wǎng)膜變性疾病具有重要意義。外層視網(wǎng)膜包括感光細(xì)胞層（視網(wǎng)膜下腔（Subretinal space,SRS）和外核層（Outer nuclear layer,ONL））和外叢狀層（Outer plexiform layer,OPL）。感光細(xì)胞層的視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞感知光刺激,將光刺激轉(zhuǎn)換為電信號,并通過OPL的突觸結(jié)構(gòu)將這些反應(yīng)傳遞到內(nèi)層視網(wǎng)膜。在視網(wǎng)膜變性疾病中,感光細(xì)胞變性是引起外層視網(wǎng)膜重塑的關(guān)鍵... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

RCS大鼠變性過程中外層視網(wǎng)膜重塑反應(yīng)特征的研究示意圖

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文26可以用來標(biāo)記凋亡的細(xì)胞核。我們通過觀察RCS大鼠ONL中細(xì)胞核的數(shù)量來研究感光細(xì)胞數(shù)量的變化規(guī)律。結(jié)果顯示，TUNEL陽性信號都集中在ONL，而INL和GCL上均沒有TUNEL信號。P15時(shí)ONL中沒有觀察到TUNEL陽性的細(xì)胞核；P20時(shí)ONL出現(xiàn)少量TUNEL陽性的細(xì)胞核；P30-P50，大量TUNEL陽性的細(xì)胞核分布于ONL中（表2-1；圖2-2A和B）。我們對存活的感光細(xì)胞（TUNEL陰性，DAPI陽性）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)隨著變性天齡的增加，存活的感光細(xì)胞數(shù)量逐漸減少；到P50存活的感光細(xì)胞數(shù)只有對照組的35.26%（表2-1；圖2-2C）。結(jié)果提示：在RCS大鼠變性過程中，感光細(xì)胞凋亡導(dǎo)致感光細(xì)胞大量丟失。圖2-2RCS大鼠感光細(xì)胞數(shù)量和凋亡的變化規(guī)律。圖A為對照組和RCS大鼠視網(wǎng)膜DAPI和TUNEL的染色；圖B為大鼠ONL中TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)的統(tǒng)計(jì)；圖C為大鼠存活感光細(xì)胞（TUNEL陰性，DAPI陽性）數(shù)的統(tǒng)計(jì)。圖中統(tǒng)計(jì)值：平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，*p<0.05，**p<0.01，****p<0.0001；標(biāo)尺50μm。

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文28圖2-3RCS大鼠視錐細(xì)胞變性的特征。圖A為對照組和RCS大鼠視網(wǎng)膜中DAPI和Arrestin的染色，圖B為大鼠視錐細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)。圖中統(tǒng)計(jì)值：平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，*p<0.05；標(biāo)尺50μm。表2-2不同天齡RCS大鼠視錐細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)P15P20P30P40P50視錐細(xì)胞個(gè)數(shù)（213μm×213μm）Control20.91±1.0818.86±1.7918.13±0.5019.13±0.6516.17±1.69RCS17.83±2.8616.17±1.6915.83±1.0914.00±1.4811.33±0.93P值0.33320.50410.69920.01460.0244（雙因素方差分析；n=3）以上結(jié)果表明，RCS大鼠外層視網(wǎng)膜在P15-P50出現(xiàn)大量感光細(xì)胞變性、凋亡和丟失，其中視錐細(xì)胞變性晚于視桿細(xì)胞。2.4.2RCS大鼠OPL突觸重塑的特點(diǎn)。2.4.2.1RCS大鼠OPL突觸蛋白的變化趨勢。我們采用CtBP2標(biāo)記突觸前膜的Ribbon結(jié)構(gòu)，mGluR6標(biāo)記突觸后結(jié)構(gòu)。通過免疫熒光染色我們觀察到正常視網(wǎng)膜中OPL視桿細(xì)胞突觸前膜的CtBP2呈馬蹄形，包繞著視桿雙極細(xì)胞突觸后膜上點(diǎn)狀的mGluR6，形成了共定位關(guān)系（圖2-4A）。由于共聚

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]RCS大鼠視網(wǎng)膜色素變性過程中視網(wǎng)膜免疫微環(huán)境的改變[J]. 唐環(huán)宇,盧紫陽,何軍材,郜原,陰正勤.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2018 (11)



本文編號：3537136