目的研究白藜蘆醇（resveratrol,RES）對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）細(xì)胞凋亡的抑制作用及機(jī)制,探索該藥是否可用于干性年齡相關(guān)性黃斑變性（age-related macular degeneration,AMD）的治療。方法通過碘酸鈉誘導(dǎo)的RPE細(xì)胞模擬干性AMD。RPE細(xì)胞傳代培養(yǎng)分為空白對(duì)照組、碘酸鈉損傷組、RES+碘酸鈉損傷組,并觀察各組細(xì)胞形態(tài)。MTT法檢測(cè)RES對(duì)RPE細(xì)胞最佳保護(hù)作用的濃度以及最佳濃度下對(duì)不同濃度碘酸鈉損傷的RPE細(xì)胞的保護(hù)作用。Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)情況。Hosste33342及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡總量變化以及凋亡種類之間的差別。結(jié)果 5μmol·L^-1 RES對(duì)RPE細(xì)胞有較強(qiáng)的保護(hù)作用且此濃度下對(duì)不同損傷程度的RPE細(xì)胞都有較強(qiáng)的保護(hù)作用。RES+碘酸鈉損傷組Bax蛋白的相對(duì)表達(dá)量（0.45±0.07）明顯低于碘酸鈉損傷組（0.90±0.09）,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,與空白對(duì)照組（0.... 

【文章來源】：眼科新進(jìn)展. 2019,39(06)北大核心

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【部分圖文】：

光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)培養(yǎng)24h后的ＲPE細(xì)胞狀態(tài)

嬲??仕笮危?鮒襯芰η?ＲES+NaIO3組細(xì)胞形態(tài)良好、長(zhǎng)勢(shì)均勻、細(xì)胞略有形變、生長(zhǎng)速度尚可、細(xì)胞間偶見細(xì)胞碎片;NaIO3組有大量細(xì)胞死亡，細(xì)胞量少，形態(tài)欠佳、分布呈團(tuán)簇狀，細(xì)胞透光度增加。圖1光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)培養(yǎng)24h后的ＲPE細(xì)胞狀態(tài)。A:Control組;B:ＲES+NaIO3組;C:NaIO3組。比例尺:100μm2．2MTT檢測(cè)最佳藥物濃度MTT檢測(cè)結(jié)果經(jīng)單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，在ＲES濃度為5μmol·L－1時(shí)細(xì)胞生存率最高，且與其他濃度下細(xì)胞生存率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P＜0．05，見圖2)，此時(shí)藥物對(duì)細(xì)胞無不良影響、沒有明顯的細(xì)胞毒性，可以排除藥物的不良干擾因素。通過ＲES對(duì)各組細(xì)胞不同程度損傷的保護(hù)效果分析發(fā)現(xiàn)，無論是輕度損傷還是重度損傷，ＲES對(duì)PＲE細(xì)胞皆有很強(qiáng)的保護(hù)作用，且對(duì)中度損傷效果最佳。ＲES+NaIO3組細(xì)胞生存率均明顯優(yōu)于NaIO3各濃度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P＜0．05)。2．3Westernblot檢測(cè)結(jié)果Westernblot法檢測(cè)各組相關(guān)蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果見圖3。NaIO3組較圖2ＲES濃度為5μmol·L－1時(shí)，各NaIO3組ＲPE細(xì)胞的生存率Control組凋亡蛋白Bax的表達(dá)量顯著上升(P＜0.05)，Bcl-2的表達(dá)量顯著下降(P＜0．05)，細(xì)胞損傷嚴(yán)重。ＲES+NaIO3組相關(guān)蛋白表達(dá)量與Control組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與NaIO3組有明顯差別，其中ＲES+NaIO3組Bax蛋白的表達(dá)量明顯低于NaIO3組，Bcl-2蛋白的表達(dá)量較NaIO3組明顯下降。且兩組蛋白之間表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P＜0．05)。圖3Westernblot法檢測(cè)各組Bax(A)和Bcl-2蛋白(B)的表達(dá)量以及各組灰度值的比

Westernblot法檢測(cè)各組Bax(A)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3508533