發(fā)布時間：2021-11-21 02:00

　　目的研究白藜蘆醇（resveratrol,RES）對碘酸鈉誘導的人視網膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）細胞凋亡的抑制作用及機制,探索該藥是否可用于干性年齡相關性黃斑變性（age-related macular degeneration,AMD）的治療。方法通過碘酸鈉誘導的RPE細胞模擬干性AMD。RPE細胞傳代培養(yǎng)分為空白對照組、碘酸鈉損傷組、RES+碘酸鈉損傷組,并觀察各組細胞形態(tài)。MTT法檢測RES對RPE細胞最佳保護作用的濃度以及最佳濃度下對不同濃度碘酸鈉損傷的RPE細胞的保護作用。Western blot檢測各組細胞的凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達情況。Hosste33342及流式細胞術檢測各組細胞的凋亡總量變化以及凋亡種類之間的差別。結果 5μmol·L^-1 RES對RPE細胞有較強的保護作用且此濃度下對不同損傷程度的RPE細胞都有較強的保護作用。RES+碘酸鈉損傷組Bax蛋白的相對表達量（0.45±0.07）明顯低于碘酸鈉損傷組（0.90±0.09）,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,與空白對照組（0.... 

【文章來源】：眼科新進展. 2019,39(06)北大核心

【文章頁數】：5 頁

【部分圖文】：

光學顯微鏡下檢測培養(yǎng)24h后的ＲPE細胞狀態(tài)

嬲??仕笮危?鮒襯芰η?ＲES+NaIO3組細胞形態(tài)良好、長勢均勻、細胞略有形變、生長速度尚可、細胞間偶見細胞碎片;NaIO3組有大量細胞死亡，細胞量少，形態(tài)欠佳、分布呈團簇狀，細胞透光度增加。圖1光學顯微鏡下檢測培養(yǎng)24h后的ＲPE細胞狀態(tài)。A:Control組;B:ＲES+NaIO3組;C:NaIO3組。比例尺:100μm2．2MTT檢測最佳藥物濃度MTT檢測結果經單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，在ＲES濃度為5μmol·L－1時細胞生存率最高，且與其他濃度下細胞生存率差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05，見圖2)，此時藥物對細胞無不良影響、沒有明顯的細胞毒性，可以排除藥物的不良干擾因素。通過ＲES對各組細胞不同程度損傷的保護效果分析發(fā)現(xiàn)，無論是輕度損傷還是重度損傷，ＲES對PＲE細胞皆有很強的保護作用，且對中度損傷效果最佳。ＲES+NaIO3組細胞生存率均明顯優(yōu)于NaIO3各濃度組，差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05)。2．3Westernblot檢測結果Westernblot法檢測各組相關蛋白的表達情況，結果見圖3。NaIO3組較圖2ＲES濃度為5μmol·L－1時，各NaIO3組ＲPE細胞的生存率Control組凋亡蛋白Bax的表達量顯著上升(P＜0.05)，Bcl-2的表達量顯著下降(P＜0．05)，細胞損傷嚴重。ＲES+NaIO3組相關蛋白表達量與Control組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與NaIO3組有明顯差別，其中ＲES+NaIO3組Bax蛋白的表達量明顯低于NaIO3組，Bcl-2蛋白的表達量較NaIO3組明顯下降。且兩組蛋白之間表達差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05)。圖3Westernblot法檢測各組Bax(A)和Bcl-2蛋白(B)的表達量以及各組灰度值的比

Westernblot法檢測各組Bax(A)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]白藜蘆醇在年齡相關性眼病中的研究進展[J]. 李曄,李麗萍,賴玉清,張旭.  國際眼科雜志. 2017(11)
[2]干性年齡相關性黃斑變性的發(fā)病機制研究進展[J]. 張古沐陽,陳有信.  中華眼科雜志. 2014 (06)
[3]熱量限制與白藜蘆醇抗衰老的研究進展[J]. 郭燕世.  生理科學進展. 2011(03)
[4]培養(yǎng)人視網膜色素上皮細胞脂褐素形成對胞內鈣離子和細胞活力的影響[J]. 張樂,惠延年,馬麗娜,王靜波,劉曉娟,王雨生.  國際眼科雜志. 2007(02)



本文編號：3508533