目的探討微小RNA-124-3p（miR-124-3p）對(duì)H₂O₂誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其靶向調(diào)控Krüppel樣因子6（Krüppel like factor 6,KLF6）的機(jī)制。方法按HLE-B3細(xì)胞處理方式的不同,將其分為HLE-B3組、HLE-B3+H₂O₂組、HLE-B3+H₂O₂+miR-NC組、HLE-B3+H₂O₂+miR-124-3p組、HLE-B3+H₂O₂+si-NC組、HLE-B3+H₂O₂+si-KLF6組、miR-124-3p+pcDNA3.1組、miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6組。利用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組HLE-B3細(xì)胞增殖活性,流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組HLE-B3細(xì)胞凋亡。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-124-3p與KLF6的靶向關(guān)系。Western blot檢測(cè)... 

【文章來源】：眼科新進(jìn)展. 2020,40(02)北大核心

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過表達(dá)miR-124-3p對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞HLE-B3凋亡蛋白表達(dá)的影響

si-KLF6轉(zhuǎn)染至HLE-B3細(xì)胞后用H2O2誘導(dǎo)處理結(jié)果顯示,HLE-B3+H2O2+si-KLF6組HLE-B3細(xì)胞中KLF6蛋白表達(dá)水平較HLE-B3+H2O2+si-NC組顯著降低(P<0.05),細(xì)胞增殖活性顯著增強(qiáng)(P<0.05),細(xì)胞凋亡率顯著降低(P<0.05),Cyclin D1、Bcl-2蛋白表達(dá)水平均顯著升高(均為P<0.05),P21、Bax蛋白表達(dá)水平均顯著降低(均為P<0.05),見圖2、表6、表7。表6 抑制KLF6的表達(dá)對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞HLE-B3增殖、凋亡的影響 ( x ˉ ±s,n=30) 組別 A值 12 h 24 h 36 h HLE-B3組 1.57±0.15 1.02±0.10 0.77±0.07 HLE-B3+H2O2組 0.86±0.08a 0.45±0.04a 0.23±0.02a HLE-B3+H2O2+si-NC組 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.02 HLE-B3+H2O2+si-KLF6組 1.19±0.10b 0.70±0.07b 0.41±0.04b 注:與HLE-B3組比較,aP<0.05;與HLE-B3+H2O2+si-NC組比較,bP<0.05

表7 抑制KLF6的表達(dá)對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞HLE-B3增殖、凋亡蛋白的表達(dá)及細(xì)胞凋亡率的影響 ( x ˉ ±s,n=30) 組別 KLF6蛋白 Cyclin D1蛋白 P21蛋白 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 細(xì)胞凋亡率/% HLE-B3 0.15±0.01 0.97±0.09 0.16±0.01 0.24±0.02 0.87±0.09 7.36±0.74 HLE-B3+H2O2 0.66±0.06a 0.40±0.04a 0.81±0.08a 0.84±0.08a 0.27±0.03a 19.17±1.30a HLE-B3+H2O2+si-NC 0.64±0.06 0.39±0.04 0.79±0.07 0.86±0.08 0.29±0.03 19.29±1.33 HLE-B3+H2O2+si-KLF6 0.29±0.02a 0.74±0.07b 0.33±0.03b 0.51±0.05b 0.60±0.06b 11.46±1.02b 注:與HLE-B3組比較,aP<0.05;與HLE-B3+H H2O2+HLE-B3+H2O2+miR-NC組比較,bP<0.05表8 過表達(dá)KLF6環(huán)境下miR-124-3p對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞HLE-B3增殖的影響 ( x ˉ ±s,n=36) 組別 細(xì)胞活性(A值) 12 h 24 h 36 h miR-NC組 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.03 miR-124-3p組 1.28±0.11a 0.75±0.07a 0.44±0.04a miR-124-3p+pcDNA3.1組 1.26±0.12 0.78±0.07 0.45±0.04 miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6組 1.10±0.11b 0.60±0.05b 0.35±0.03b 注:與miR-NC組比較,aP<0.05;與miR-124-3p+pcDNA3.1組比較,bP<0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Krüppel樣因子6經(jīng)活化轉(zhuǎn)錄因子4通路對(duì)晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用[J]. 田芳,趙今稚,滕賀,黃亮瑜,劉勛,蘇睿虹,高美子,張曉敏,李筱榮,東莉潔,張紅.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2018 (03)
[2]枸杞多糖對(duì)H2O2誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用[J]. 俞茜,季青山,孫思勤.  眼科新進(jìn)展. 2016(06)
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