目的研究在紫外線誘導(dǎo)的小鼠白內(nèi)障模型與人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡模型中微小RNA-125b （miR-125b）靶向調(diào)控BAK1的作用機(jī)制。方法利用LipofectamineTM RNAiMAX分別轉(zhuǎn)染miR-125b模擬物（mimic）、模擬物陰性對(duì)照（mimic control）、miR-125b抑制物（inhibitor）、抑制物陰性對(duì)照（inhibitor control）至人晶狀體上皮細(xì)胞系SRA01/04,分別上調(diào)和下調(diào)細(xì)胞中miR-125b的表達(dá),48 h后用紫外線UVB （360μW/cm²）照射25 min,構(gòu)建細(xì)胞凋亡模型。用UVB （360μW/cm²）照射小鼠左眼,制作白內(nèi)障模型,收集小鼠晶狀體囊膜。用實(shí)時(shí)qPCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率,并檢測(cè)miR-125b及其預(yù)測(cè)靶基因BAK1 mRNA的表達(dá)。用Western blotting檢測(cè)BAK1蛋白的表達(dá),用TUNEL凋亡檢測(cè)法檢測(cè)人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡率。結(jié)果與正常人晶狀體上皮細(xì)胞比較,人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡模型中miR-125b的表達(dá)顯著降低,BAK1表達(dá)顯著升高,細(xì)胞凋亡增加;與轉(zhuǎn)染... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,49(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

miR-125b對(duì)人晶狀體上皮細(xì)胞系凋亡的調(diào)控

人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡模型中miR-125b m RNA表達(dá)水平顯著低于正常人晶狀體上皮細(xì)胞系（0.452±0.126 5 vs 1.000±0.000 1,t=7.504,P=0.017),BAK1 mRNA的表達(dá)水平顯著高于正常人晶狀體上皮細(xì)胞系（3.858±0.488 8 vs 1.0±0.001 0,t=10.13,P=0.009 6),BAK1蛋白的表達(dá)水平顯著高于正常人晶狀體上皮細(xì)胞系（0.68±0.019 vs0.45±0.017,t=15.34,P<0.001），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.2 小鼠白內(nèi)障模型晶狀體囊膜中miR-125b與Bak1的表達(dá)（圖2)

TUNEL結(jié)果顯示，人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡模型細(xì)胞凋亡率顯著高于正常人晶狀體上皮細(xì)胞[（49.37±5.121)%vs(35.20±3.000)%,t=4.135,P=0.001 4]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.4 miR-125b對(duì)BAK1表達(dá)的調(diào)控

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Expression of lens-related microRNAs in transparent infant lenses and congenital cataract[J]. Chang-Rui Wu,Min Ye,Li Qin,Yue Yin,Cheng Pei.  International Journal of Ophthalmology. 2017(03)



本文編號(hào)：3454536