目的：探討TGF-β及其下游信號(hào)Smad在糖尿病視網(wǎng)膜病變組織纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用。通過研究糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織中TGF-β、Smad2/3、以及其相關(guān)蛋白a-SMA、MMP-2、PAI-1、Col-1、VEGF、CTGF的表達(dá)變化,揭示糖尿病視網(wǎng)膜病變的TGF-β/Smad信號(hào)通路的作用機(jī)制,從分子水平完善糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機(jī)制,探討可行的基因治療或藥物防治手段。方法：1.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)（1）動(dòng)物模型建立：雄性SD大鼠,體重200±25g, STZ（美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品,pH值為4.2,劑量為55mg/kg,溶于0.1mmol/L枸櫞酸鈉與0.2mmol/L磷酸二氫鈉）一次性大量腹腔注射,在48h后采尾血測(cè)血糖,后期每2周分別測(cè)血糖和體重,將血糖濃度>16.7mmol/L定為糖尿病大鼠。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于第4、8、12周稱體重和測(cè)血糖后取材。（2）應(yīng)用RT-PCR, western blotting測(cè)定隨病程延長(zhǎng)檢測(cè)視網(wǎng)膜中TGF-β、a-SMA、MMP-2、Smad2/3、PAI-1、COL-1、 VEGF、CTGF的定位及mRNA,蛋白的動(dòng)態(tài)變化。2.體外實(shí)驗(yàn)：（1）體外培養(yǎng)大鼠... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３ｘ１００?

ＡＲＰＥ－１９細(xì)胞株傳代后２－３ｈ開始貼壁生長(zhǎng)，４８ｈ基本完全貼壁，２－３ｄ能長(zhǎng)??滿２５ｃｍ２培養(yǎng)瓶。大部分細(xì)胞呈典型長(zhǎng)梭形，長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶底后呈現(xiàn)接觸性抑制。??見圖４、５、６。??—ｉＭｉ??ｉ＾Ｍ?ｍ??圖?５?ｘ２００?圖?６?ｘ４０??２４??

相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??４對(duì)于ａ－ＳＭＡ，?７５ｍＭ糖作用時(shí)表達(dá)最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意??義，２５ｍＭ時(shí)，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??５對(duì)于ＭＭＰ－２，?７５ｍＭ糖作用時(shí)表達(dá)最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意??義；??托對(duì)于ＰＡＩ－１，?７５ｍＭ糖作用時(shí)表達(dá)達(dá)到第一個(gè)高峰，與正常組比較，ｐ＜０．０５，??有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，５０ｍＭ時(shí)表達(dá)稍有下降，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??７對(duì)于〔化－１，５０ｍＭ糖作用時(shí)表達(dá)即達(dá)到最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)??計(jì)學(xué)意義；２５ｍＭ，?ｌＯＯｍＭ時(shí)表達(dá)下降，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??８．對(duì)于ＣＴＧＦ，５０ｍＭ糖作用時(shí)表達(dá)即達(dá)到最大，之后隨糖濃度增加，表達(dá)迅速??下降，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ｌＯＯｍＭ時(shí)表達(dá)下降，與正常組??相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??＇蔓??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Crystal Structure of the MH2 domain of Drosophila Mad[J]. WANG Chong,CHEN Lei,WANG Le & WU JiaWei MOE Key Laboratory of Bioinformatics,Department of Biological Sciences and Biotechnology,Tsinghua University,Beijing 100084,China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2009(06)



本文編號(hào)：3451987