本文關(guān)鍵詞：bFGF及TGF-β1對(duì)鼻-鼻竇炎伴鼻息肉黏膜中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本課題擬觀察體外堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor betel,TGF-β1)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人鼻息肉成纖維細(xì)胞(human nasal polyps fibroblasts,NPFs)增殖及III型膠原合成的影響。方法:采用組織塊原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),將取自慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者的鼻息肉摘除標(biāo)本作為來(lái)源進(jìn)行人鼻息肉成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng),使用免疫組化技術(shù)鑒定培養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源。將不同濃度的b FGF(l00ngml,50ng/ml,l0ng/ml,lng/ml四個(gè)濃度)、TGF-β1(l00ngml,50ng/ml,l0ng/ml,lng/ml四個(gè)濃度)分別作用于體外培養(yǎng)的NPFs,并將濃度均為l0ng/ml的b FGF及TGF-β1聯(lián)合作用于體外培養(yǎng)的NPFs,于第24、72、120小時(shí)采用比色法檢測(cè)活性細(xì)胞增殖情況(四唑化合物([3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt;MTS(a)])比色法),并收集上清液采用ELISA法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中III型膠原的含量。結(jié)果:(1)組織塊貼壁3天可見細(xì)胞向周圍伸出,12天左右爬滿,免疫組化鑒定波形蛋白表達(dá)陽(yáng)性,細(xì)胞培養(yǎng)穩(wěn)定。(2)24小時(shí)后實(shí)驗(yàn)組各濃度組的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞增殖的情況與對(duì)照組相比變化不明顯,統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性差異(P0.05)。在72小時(shí)及120小時(shí)時(shí),TGF-β1在1~100 ng/ml范圍內(nèi)隨濃度增加對(duì)NPFs細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng),具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);b FGF在1~100 ng/ml濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)為明顯的促進(jìn)NPF細(xì)胞增殖作用,具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);濃度為10 ng/ml的TGF-β1和10ng/ml的b FGF聯(lián)合作用于人NPF,產(chǎn)生較明顯的拮抗作用,與單獨(dú)作用時(shí)比較,具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(3)當(dāng)b FGF、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合左右,誘導(dǎo)NPFs增殖發(fā)生變化時(shí),NPFs分泌的III型膠原的含量產(chǎn)生明顯的濃度差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:TGF-β1具有抑制人鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖及III型膠原的分泌的作用,b FGF具有促進(jìn)人鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖及III型膠原的分泌作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖具有拮抗作用,可能在鼻息肉的發(fā)生,鼻-鼻竇炎組織重塑中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：慢性鼻鼻-竇炎 成纖維細(xì)胞 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R765.41;R765.25
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-20
• 1. 材料12-13
• 1.1 研究對(duì)象12
• 1.2 主要儀器設(shè)備與材料12
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑12-13
• 2. 方法13-19
• 2.1 NPF原代細(xì)胞培養(yǎng)13
• 2.2 NPF細(xì)胞傳代培養(yǎng)13-14
• 2.3 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇14-15
• 2.4 NPF細(xì)胞鑒定15-16
• 2.5 實(shí)驗(yàn)組對(duì)NPF細(xì)胞增殖的影響16-17
• 2.6 聯(lián)合使用時(shí)影響NPF細(xì)胞的時(shí)間劑量效應(yīng)17-18
• 2.7 ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中Ⅲ型膠原含量18-19
• 3．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 結(jié)果20-24
• 1. 鼻息肉成纖維細(xì)胞鑒定20-21
• 2. 實(shí)驗(yàn)組對(duì)NPF細(xì)胞增殖的影響21-22
• 3. 聯(lián)合使用時(shí)影響NPF細(xì)胞的時(shí)間劑量效應(yīng)22-23
• 4. ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液Ⅲ型膠原含量23-24
• 討論24-26
• 小結(jié)26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 綜述29-39
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 致謝39

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：bFGF及TGF-β1對(duì)鼻-鼻竇炎伴鼻息肉黏膜中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：345064