【目的】觀察三嵌段聚合物搭載藻藍蛋白PPP-PC對2,2-偶氮（2-甲基丙基咪）二鹽酸鹽（AAPH）誘導的人晶狀體上皮細胞氧化損傷后細胞形態(tài)及活力的影響,探索三嵌段聚合物搭載藻藍蛋白對人晶狀體上皮細胞氧化損傷的保護作用并初步探討其機制。【方法】構(gòu)建并純化三嵌段聚合物搭載藻藍蛋白,并建立AAPH誘導人晶狀體上皮細胞氧化損傷模型;實驗分為正常對照組、AAPH損傷組、PPP-PC+AAPH處理組,分別進行相應處理后,通過熒光倒置顯微鏡觀察各組細胞形態(tài)及活力;應用Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞儀檢測各組細胞凋亡比例;蛋白免疫印跡法檢測各組細胞Bax、Bcl-2和Caspase-3凋亡相關蛋白的表達水平�！窘Y(jié)果】熒光顯微鏡下顯示PPP-PC+AAPH處理組細胞形態(tài)與正常對照組細胞相似,細胞活力較AAPH損傷組有所提高;PPP-PC+AAPH處理組凋亡細胞比例為11.70%（10.63%,12.17%）,比AAPH損傷組細胞凋亡比例32.35%（30.17%,33.42%）明顯下降（P <0.05）;與AAPH損傷組相比,PPP-PC+AAPH處理組Bcl-2表達增加而Ba... 

【文章來源】：中山大學學報(醫(yī)學科學版). 2020,41(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

PPP-PC減輕SRA01/04細胞氧化損傷后細胞活性及形態(tài)改變

MTT法檢測各組SRA01/04細胞氧化損傷后存活率，結(jié)果顯示，0.625和1.25μg/mL的PPP-PC對SRA01/04細胞存活率與陰性對照組相比無統(tǒng)計學意義（P>0.05；表2);PPP-PC濃度為2.5和5μg/mL時SRA01/04細胞存活率明顯提高（P<0.05；表2）；而2.5與5μg/mL兩組間的細胞存活率無明顯統(tǒng)計學意義（P>0.05；表2）。因此，本實驗選取的PPP-PC最佳作用濃度為2.5μg/mL。2.4 PPP-PC減輕AAPH對SRA01/04細胞氧化損傷后形態(tài)及活性改變

流式細胞儀檢測Annexin V-FITC/PI熒光染色，分析結(jié)果顯示，AAPH損傷組凋亡細胞比例為32.35%(30.17%～33.42%），與空白對照組3.58%(2.90%～3.81%）相比明顯增高，組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05；圖3）。而PPP-PC+AAPH處理組細胞凋亡比例降至11.70%(10.63%～12.17%），與AAPH損傷組相比明顯降低，組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05；圖3）。所以，PPP-PC可顯著抑制AAPH所誘導的SRA01/04細胞凋亡。2.6 PPP-PC影響AAPH誘導SRA01/04細胞損氧化傷后凋亡相關蛋白表達


本文編號：3401647