目的探討siRNA沉默單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白1（MCT1）增強鼻咽癌細胞HNE1/DDP對順鉑誘導(dǎo)凋亡的敏感性及其可能機制。方法 Western blot檢測HNE1和HNE1/DDP細胞中MCT1的表達及siRNA轉(zhuǎn)染沉默MCT1在HNE1/DDP細胞中MCT1的表達;MTT法檢測不同濃度順鉑和MCT1 siRNA聯(lián)合順鉑對HNE1/DDP細胞的增殖抑制作用;PI單染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）檢測細胞線粒體膜電位;Western blot檢測Mcl-1、Bak、Bcl-2、Bax蛋白的表達。結(jié)果 MCT1在HNE1/DDP細胞中高表達,抑制MCT1的表達可增加HNE1/DDP細胞對順鉑的敏感性（P<0.05）,部分逆轉(zhuǎn)鼻咽癌細胞對順鉑的耐藥。此外,抑制MCT1的表達可增強HNE1/DDP細胞對順鉑誘導(dǎo)凋亡的作用,MCT1 siRNA與8μmol/L順鉑聯(lián)合作用于HNE1/DDP細胞24 h的凋亡率為（51.23±2.86）%,較單用MCT1 siRNA、順鉑的凋亡率明顯升高（P<0.05）。同時使細胞線粒體膜電位降低,下調(diào)Mcl-1、Bcl-2的表... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2017,37(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

MCT1在HNE1和HNE1/DDP細胞中的表達Fig.1ExpressionofMCT1inHNE1andHNE1/DDPcells.β-actin

輟Ｓ?庀暈⒕倒鄄煒杉??MCT1siRNA聯(lián)合DDP作用于HNE1/DDP細胞后，紅色熒光減弱，而綠色熒光增強，較對照組和單獨處理組變化明顯（圖5），提示MCT1siRNA聯(lián)合DDP作用于細胞后，細胞發(fā)生了早期凋亡。2.6MCT1siRNA對HNE1/DDP細胞中DDP誘導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白表達的影響MCT1siRNA、DDP及二者聯(lián)合作用于HNE1/圖1MCT1在HNE1和HNE1/DDP細胞中的表達Fig.1ExpressionofMCT1inHNE1andHNE1/DDPcells.MCT1β-actinHNE1HNE1/DDPMCT1β-actinsiRNA-NC-+---MCT1siRNA-1--+--MCT1siRNA-2---+-MCT1siRNA-3----+HNE1/DDP圖2MCT1siRNA對HNE1/DDP細胞中MCT1蛋白表達的影響Fig.2Effectsof3MCT1siRNAsontheexpressionofMCT1proteininHNE1/DDPcellsdetectedbyWesternblotting.*P<0.05vscontrolorsiRNA-NCgroup.圖3DDP對轉(zhuǎn)染MCT1siRNA后HNE1/DDP細胞存活率的影響Fig.3EffectsofdifferentconcentrationsofDDPonviabilityofHNE1/DDPcellstransfectedwithMCT1siRNA.*P<0.05vsDDPgroup.Celvaibiltiy%()DDPDDP+MCT1siRNA****02481632DDP(μmol/L)120100806040200ControlsiRNA-MCT1MCT1MCT1NCsiRNA-1siRNA-2siRNA-30.90.80.70.60.50.40.30.20.10***Rletaviexerpesoinforptoien·885·

期凋亡。2.6MCT1siRNA對HNE1/DDP細胞中DDP誘導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白表達的影響MCT1siRNA、DDP及二者聯(lián)合作用于HNE1/圖1MCT1在HNE1和HNE1/DDP細胞中的表達Fig.1ExpressionofMCT1inHNE1andHNE1/DDPcells.MCT1β-actinHNE1HNE1/DDPMCT1β-actinsiRNA-NC-+---MCT1siRNA-1--+--MCT1siRNA-2---+-MCT1siRNA-3----+HNE1/DDP圖2MCT1siRNA對HNE1/DDP細胞中MCT1蛋白表達的影響Fig.2Effectsof3MCT1siRNAsontheexpressionofMCT1proteininHNE1/DDPcellsdetectedbyWesternblotting.*P<0.05vscontrolorsiRNA-NCgroup.圖3DDP對轉(zhuǎn)染MCT1siRNA后HNE1/DDP細胞存活率的影響Fig.3EffectsofdifferentconcentrationsofDDPonviabilityofHNE1/DDPcellstransfectedwithMCT1siRNA.*P<0.05vsDDPgroup.Celvaibiltiy%()DDPDDP+MCT1siRNA****02481632DDP(μmol/L)120100806040200ControlsiRNA-MCT1MCT1MCT1NCsiRNA-1siRNA-2siRNA-30.90.80.70.60.50.40.30.20.10***Rletaviexerpesoinforptoien·885·

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Molecular mechanisms of apoptosis in hepatocellular carcinoma cells induced by ethanol extracts of Solanum lyratum Thumb through the mitochondrial pathway[J]. Xiao-Qiang Mo,Hong-Yu Wei,Gan-Rong Huang,Ling-Yuan Xu,Yu-Li Chen,Jiang Qi,Wei Xian,Yan-Chun Qin,Lian-Deng Wei,Li-Juan Zhao,Yan-Qiang Huang,Wei Xing,Hong-Qin Pu,Peng-Ya Wei,Chao-Gan Li,Qiu-Chun Liang.  World Journal of Gastroenterology. 2017(06)



本文編號：3383972