本文關(guān)鍵詞：人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶通過(guò)腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶—表皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路誘導(dǎo)慢性鼻—鼻竇炎高分泌的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:利用人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)刺激小鼠鼻腔黏膜,建立鼻腔高分泌模型,探索腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶(TACE)-表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)信號(hào)通路在體內(nèi)黏蛋白MUC5AC高分泌中的作用研究。方法:1.選取6周雌性C57BL/6小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組和HNE組。采用HNE滴鼻方法建立小鼠鼻腔高分泌模型,在最后一次滴鼻后取小鼠鼻腔固定,通過(guò)HE及PAS染色觀察每組鼻黏膜的病理改變情況。2.模型建立成功后,以TACE抑制劑(TAPI-2)及EGFR抑制劑(AG1478)為干預(yù)因素,取鼻黏膜行HE及PAS染色觀察每組鼻黏膜的病理變化,TACE、EGFR和MUC5AC在黏膜上皮層中的分布情況是利用免疫組化的方法檢測(cè),采用蛋白印跡(Western Blot)法檢測(cè)小鼠鼻黏膜中p-EGFR、EGFR、TACE蛋白表達(dá)情況,各組鼻黏膜中MUC5AC蛋白的變化通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)來(lái)檢測(cè),實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測(cè)TACE、EGFR和MUC5AC m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1.成功建立了HNE誘導(dǎo)下小鼠鼻腔高分泌模型。HE染色結(jié)果顯示,HNE組可見(jiàn)黏膜上皮排列不整齊,杯狀細(xì)胞及黏膜下腺體增生,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);對(duì)照組則見(jiàn)黏膜上皮排列規(guī)則,可見(jiàn)少量杯狀細(xì)胞,黏膜下腺體未見(jiàn)增生。HNE組鼻黏膜上皮層及黏膜下腺體PAS染色可見(jiàn)紫紅色的強(qiáng)陽(yáng)性染色顆粒,對(duì)照組見(jiàn)弱陽(yáng)性表達(dá)。2.在TAPI-2及AG1478的干預(yù)下,與HNE組相比,HE染色見(jiàn)小鼠鼻黏膜杯狀細(xì)胞及腺體增生不明顯,上皮排列較整齊;PAS染色見(jiàn)黏膜下腺體中紫紅色染色明顯減少。免疫組化法檢測(cè)小鼠鼻黏膜組織中MUC5AC表達(dá)在黏膜上皮層的杯狀細(xì)胞及黏膜下腺體中,TACE和EGFR主要表達(dá)于黏膜上皮層中,結(jié)果顯示MUC5AC、TACE和EGFR在HNE組中表達(dá)均明顯高于對(duì)照組(P0.05);在HNE+TAPI-2組中以上各指標(biāo)與HNE組相比均下調(diào)(P0.05);而HNE+AG1478組中TACE的表達(dá)與HNE組相近(P0.05),EGFR和MUC5AC的表達(dá)均明顯下調(diào)(P0.05)。蛋白印跡法見(jiàn)HNE組中TACE、EGFR和P-EGFR蛋白的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.01);HNE+TAPI-2組中以上三個(gè)指標(biāo)的表達(dá)與HN E組相比均明顯下調(diào)(P0.01);而在HNE+AG1478組中TACE蛋白的表達(dá)情況與HNE組相比無(wú)明顯變化(P0.05),EGFR和P-EGFR蛋白的表達(dá)情況與HNE組相比均明顯下調(diào)(P0.01)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果表明HNE組MUC5AC蛋白表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高(P0.01),HNE+TAPI-2組和HNE+AG1478組的表達(dá)與HNE組相比明顯下調(diào)(P0.01)。熒光定量PCR結(jié)果顯示HNE組鼻黏膜組織中TACE、EGFR和MUC5AC m RNA的表達(dá)量與對(duì)照組相比均增加(P0.01);與HNE組相比,HNE+TAPI-2組中各指標(biāo)m RNA的表達(dá)量均下調(diào)(P0.01);而HNE+AG1478組中TACE m RNA的表達(dá)量與HNE組比較無(wú)明顯變化(P0.05),EGFR和MUC5AC m RNA的表達(dá)量較HNE組均減少(P0.01)。結(jié)論:1.HNE作為刺激物可誘導(dǎo)小鼠鼻黏膜呈現(xiàn)高分泌狀態(tài)。2.在TAPI-2或AG1478的干預(yù)下,黏膜中MUC5AC表達(dá)明顯下調(diào),表明HNE-TACE-EGFR信號(hào)通路在鼻黏膜高分泌中具有重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：人嗜中性細(xì)胞彈性蛋白酶 腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶 表皮生長(zhǎng)因子受體 黏蛋白MUC5AC
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R765.41
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 鼻黏膜高分泌模型的建立12-17
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法12-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器12
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑12-13
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制13
• 2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法13-15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-17
• 2.2.1 HE染色結(jié)果15-16
• 2.2.2 PAS染色結(jié)果16-17
• 第3章 TACE、EGFR對(duì)MUC5AC表達(dá)的影響17-36
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法17-26
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器17-18
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑18-19
• 3.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制19-20
• 3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法20-26
• 3.1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析26
• 3.2 結(jié)果26-36
• 3.2.1 HE染色及PAS染色結(jié)果26-28
• 3.2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果28-32
• 3.2.3 免疫印跡結(jié)果32-33
• 3.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果33-34
• 3.2.5 熒光定量PCR結(jié)果34-36
• 第4章 討論36-41
• 4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇37-38
• 4.2 鼻腔高分泌模型的建立及評(píng)判38-39
• 4.3 TAPI-2、AG1478的干預(yù)作用39-40
• 4.4 總結(jié)與展望40-41
• 第5章 結(jié)論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果46-47
• 綜述 黏蛋白與鼻腔炎癥性疾病的研究進(jìn)展47-53
• 參考文獻(xiàn)51-53

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 湯凌浩;洪嶺;呂梅;別旭;何桂麗;;重組人表皮生長(zhǎng)因子對(duì)鼻黏膜結(jié)構(gòu)的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2007年12期

2 周莉妤;鄂淑云;周莉婷;楊麗佳;;鼻黏膜給藥的研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2009年04期

3 潘嘉;鼻黏膜毒性研究進(jìn)展[J];西北藥學(xué)雜志;2005年02期

4 高怡;裴秋玲;韓光;;維生素B_(12)鼻用凝膠劑對(duì)鼻黏膜刺激性的觀察[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年06期

5 燕志強(qiáng);高盛宏;張俊;邵曉莉;洪錦科;李得本;;正常人群鼻黏膜中組胺受體亞型的表達(dá)[J];中國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科;2011年09期

6 戚春彥;;凡士林在預(yù)防吸氧患者鼻黏膜干燥中的作用[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2012年23期

7 趙瑩,張大衛(wèi),鄭愛(ài)萍,于少云,武鳳蘭;7種吸收促進(jìn)劑的鼻黏膜毒性及評(píng)價(jià)方法[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年04期

8 徐丹;朱照靜;;影響藥物鼻黏膜吸收的因素[J];中國(guó)新藥雜志;2007年16期

9 葛衛(wèi)紅;張繼穩(wěn);韓玉環(huán);石森林;林潔;;豬鼻黏膜作為鼻腔給藥離體實(shí)驗(yàn)用黏膜的可行性實(shí)驗(yàn)研究[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2008年01期

10 劉曉玲;邢志敏;余力生;董建強(qiáng);鄧芙蓉;;大氣可吸入顆粒物致大鼠鼻黏膜急性損傷的研究[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2008年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 湯建國(guó);;放射性鼻黏膜損傷后組織纖維化重塑的特點(diǎn)[A];華東六省一市耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2008年浙江省耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

2 胡孫宏;肖芒;湯建國(guó);;鼻腔局部應(yīng)用皮質(zhì)類(lèi)固醇激素對(duì)鼻黏膜輻射性損傷的防護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科學(xué)分會(huì)成立60周年慶典暨2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

3 鄒堅(jiān)定;;下鼻甲等離子消融術(shù)對(duì)鼻黏膜組織學(xué)及纖毛功能改變的初步研究[A];2012年浙江省耳鼻咽喉科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

4 汪際云;胡寶華;王曉偉;黃春鑫;苗英;樂(lè)東海;李克強(qiáng);張順;;鼻黏膜中Toll樣受體5的表達(dá)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科學(xué)分會(huì)成立60周年慶典暨2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

5 肖芒;湯建國(guó);姜秀文;;輻射損傷后大鼠鼻黏膜早期組織重塑的特點(diǎn)[A];2007浙江省耳鼻咽喉—頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

6 尹根蒂;熊觀霞;趙充;陳媛媛;;鼻咽癌適形調(diào)強(qiáng)放射治療對(duì)鼻黏膜-纖毛輸送功能影響的臨床分析[A];第六屆全國(guó)鼻咽癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2010年

7 陳潔;;雙辛滴鼻液對(duì)鼻黏膜作用觀察(摘要)[A];第四屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會(huì)論文匯編[C];2003年

8 賈建偉;楊積明;李謙;馬瑩;趙潔;袁桂玉;曹武奎;;甜瓜蒂經(jīng)鼻黏膜給藥治療頑固性黃疸[A];第一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

9 張克軍;成娜莎;劉俊杰;劉太琴;王寧;王斌全;;實(shí)驗(yàn)性AR小鼠鼻黏膜嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度影響因素探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)2011年全國(guó)變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

10 楊秀海;李源;;LPS/TLR4/NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)通路及效應(yīng)蛋白INF-γ和IL-4在鼻黏膜組織中的表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 山東中醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校 祝建材;護(hù)好鼻黏膜有助防感冒[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2013年

2 西安交大醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 副教授 張美麗;健鼻巧防病[N];家庭醫(yī)生報(bào);2009年

3 ;另辟蹊徑天地新[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

4 健康時(shí)報(bào)特約記者 楊璞;初冬開(kāi)始防三干[N];健康時(shí)報(bào);2010年

5 劉江峰;鼻涕中帶血是怎么回事[N];民族醫(yī)藥報(bào);2006年

6 宇光;鼻子干用熱水熏熏[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

7 劉江峰（主治醫(yī)師）;鼻涕中帶血是怎么回事[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2005年

8 金慰鄂;滴鼻有方療效好[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

9 主治醫(yī)師 曉峰;鼻涕中帶血不可小視[N];保健時(shí)報(bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 段洪剛;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)鼻黏膜放射性損傷的效果和機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 李彤;神經(jīng)源性炎癥在變應(yīng)性鼻結(jié)膜炎發(fā)病中的作用機(jī)制探討[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

3 陳晴;迎香穴埋線調(diào)節(jié)變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜神經(jīng)源性炎癥的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊靜;18β-甘草次酸對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜纖毛上皮的影響[D];蘭州大學(xué);2016年

2 李盈盈;調(diào)控HIF-1α對(duì)鼻黏膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

3 喬巍;人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶通過(guò)腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶—表皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路誘導(dǎo)慢性鼻—鼻竇炎高分泌的研究[D];南昌大學(xué);2016年

4 鄧鵬;丙酸氟替卡松對(duì)豚鼠鼻黏膜輻射損傷的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 王剛;丁卡因?qū)毙苑蛛x的豚鼠鼻黏膜纖毛運(yùn)動(dòng)的影響[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

6 張友巖;聚焦超聲對(duì)鼻黏膜形態(tài)和黏液纖毛系統(tǒng)清除功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

7 梅丹;磷酸川芎嗪鼻黏膜給藥系統(tǒng)的研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2008年

8 劉建國(guó);變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜組織病理特征的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2008年

9 劉軍;射頻熱凝治療變應(yīng)性鼻炎對(duì)血清與鼻黏膜中神經(jīng)肽的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2011年

10 張慧;不同時(shí)間預(yù)防治療對(duì)變應(yīng)性鼻炎豚鼠鼻黏膜STAT6、IL-4表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶通過(guò)腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶—表皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路誘導(dǎo)慢性鼻—鼻竇炎高分泌的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：336674