第一部分嗅上皮干細胞凋亡與炎性疾病導致嗅覺障礙發(fā)生的相關性研究目的應用特定抗體標記嗅上皮干細胞,觀察嗅上皮干細胞改變,探索慢性鼻-鼻竇炎患者不同嗅覺水平的嗅上皮干細胞所發(fā)生的變化與嗅覺障礙疾病發(fā)生、發(fā)展的相關性。方法1.對48名慢性鼻-鼻竇炎患者進行T&T嗅覺評估檢測,根據(jù)結果將受試者分組,分為嗅覺正常（3例）、輕度減退（18例）,中度減退（12例）,重度減退（3例）,嗅覺喪失組（12例）。簽署樣本取材知情同意書,術中取0.5x0.5cm2大小嗅區(qū)組織一塊,4%多聚甲醛固定。2.以嗅覺正常樣本作為對照,將所有樣本均行HE染色,對嗅上皮（olfactory epithelium,OE）整體形態(tài)進行評估,ImageJ軟件統(tǒng)計細胞個數(shù),計算細胞密度;通過OMP標記嗅感覺神經元（olfactory receptor neurons,ORNs）,Ascl-1標記球狀基底細胞（globose basal cells,GBCs）、CK-5標記水平基底細胞（horizontal basal cells,HBCs）,觀察各組干細胞變化,TUNEL染色觀察細胞凋亡情況,ImageJ統(tǒng)計陽性細胞數(shù)量... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

嗅上皮HE染色，x400

圖3：ORNs染色，x400，圖示紅色為ORNs陽性信號。嗅覺正常（A）、嗅覺輕度下嗅覺中度下降(C)、嗅覺重度下降(D)、嗅覺喪失(E)。單箭頭（↑）所標記為OE表面，基膜。1.2 各組樣本ORNs陽性信號百分比：嗅覺正常組84.07±2.57%、嗅覺輕82.42±4.45%、嗅覺中度下降組72.56±1.72%、嗅覺重度下降組51.40±7.72%失組20.27±7.22%。每個樣本于OE層選取共10個HPF視野，計數(shù)ORNs，分別性細胞數(shù)目并取其均值。嗅覺正常（n=30），嗅覺輕度下降（n=180），嗅覺（n=120），嗅覺重度下降（n=30），嗅覺喪失（n=120），以嗅覺正常組作為果以均值±標準差表示，*P＜0.05，**P＜0.01。

圖4：ORNs陽性細胞數(shù)目百分比，縱坐標為陽性細胞百分比，橫坐標為不同組。（二）GBCs所用抗體為 Mash-1/Ascl-1 兔多克隆抗體一抗（1:50，Abcam），二驢抗兔（1:200，Servicebio），DAPI（Servicebio）。2.1 嗅覺正常及輕度下降樣本中散在少量的陽性信號，中度及重度性信號，以中度最為明顯；嗅覺喪失的患者樣本中幾乎未見明顯陽性信01020304050嗅覺正常 嗅覺輕度下降嗅覺中度下降嗅覺重度下降 嗅覺喪失目百分比（%）**A B

【參考文獻】：
期刊論文
[1]嗅覺功能障礙的診斷與治療[J]. 張偉,張羅.  首都醫(yī)科大學學報. 2013(06)
[2]慢性鼻竇炎嗅覺障礙患者嗅上皮超微結構觀察[J]. 王娜亞,程靖寧,盛瑞紅,何風,張敏,潘子昂,張小伯,王石麟.  中華耳鼻咽喉科雜志. 2001(01)



本文編號：3274286