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低分子殼聚糖對人晶狀體上皮細(xì)胞CLC-3的表達(dá)及功能影響

發(fā)布時間:2021-06-25 19:49
  殼聚糖是自然界廣泛存在的高分子生物多糖,具有生物功能性、相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等特性。近年來發(fā)現(xiàn),低分子量的殼聚糖具有一些獨(dú)特的生物活性,如抗菌、抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫性等。另外,低分子量殼聚糖對細(xì)胞的影響也成為近年來研究的熱點(diǎn),如成骨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等。后發(fā)性白內(nèi)障是常見的眼科遠(yuǎn)期并發(fā)癥,其發(fā)生的主要原因是晶狀體上皮細(xì)胞(lens epkhelial cells, LECs)的增殖、粘附和迀移,以及上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化等問題。CLC-3(CLC-3型氯離子通道)廣泛分布在不同組織和細(xì)胞內(nèi),參與維持細(xì)胞容積的動態(tài)平衡、細(xì)胞增殖、分泌和凋亡等各種功能調(diào)節(jié)。文獻(xiàn)報(bào)道,ClC-3與LECs的增殖、粘附和遷移關(guān)系密切,抑制CLC-3可抑制LECs的增殖、粘附和遷移,表明CLC-3在白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。本實(shí)驗(yàn)采用Western Blot和PCR方法檢測了白內(nèi)障患者LECs的CLC-3表達(dá);應(yīng)用TGF-β1構(gòu)建了高表達(dá)CLC-3的LECs模型,并采用Western Blot和PCR方法檢測了不同濃度的低分子殼聚糖對晶狀體上皮細(xì)胞系——HLECB-3的CLC-3的... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

低分子殼聚糖對人晶狀體上皮細(xì)胞CLC-3的表達(dá)及功能影響


人LECs中CLC-3的mRNA表達(dá)注:*表示與正常組相比P<0.05

蛋白質(zhì)表達(dá),給藥時間,模型構(gòu)建,最適濃度


圖 2 人 LECs 中 CLC-3 的蛋白質(zhì)表達(dá)注:*表示與正常對照組相比 P<0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,患者中 LECs 細(xì)胞 mRNA 和蛋白表達(dá)與正常人相比均升異顯著(P<0.05)。這與以往研究結(jié)果相符合。高表達(dá) CLC-3 的 LECs 模型構(gòu)建為確定 TGF-β1 對 LECs 的 CLC-3 表達(dá)最適濃度,我們利用人晶狀體上 HLEC B-3 構(gòu)建了高表達(dá) CLC-3 的 LECs 模型,以模擬白內(nèi)障患者的 L分五組,即:0ng/mL、2.5ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL和15.0ng/mL的TG有關(guān)文獻(xiàn)[15],我們確定給藥時間為 30h,然后采用 PCR 和 Western- B別檢測各組 LECs 中 mRNA 和蛋白的表達(dá)。具體結(jié)果如下(圖 3,4)

低分子殼聚糖對人晶狀體上皮細(xì)胞CLC-3的表達(dá)及功能影響


不同濃度TGF-β1對LECs的CLC-3的mRNA表達(dá)影響

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]ClC-3氯離子通道與腫瘤[J]. 武曉英,毛建文,李紅枝.  國際病理科學(xué)與臨床雜志. 2010(05)
[2]Nd:YAG激光切除兒童后發(fā)性白內(nèi)障50例[J]. 宋艷萍,丁琴,劉瓊,趙霞.  國際眼科雜志. 2005(03)
[3]ClC-3氯通道研究進(jìn)展[J]. 張海寧,關(guān)永源.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2003(02)
[4]背景氯離子通道研究進(jìn)展[J]. 張光平.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1998(04)



本文編號:3249843

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