目的:觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCMSCs）來(lái)源的外泌體對(duì)高糖作用下的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（retina pigment epithelial,RPE）的細(xì)胞間粘附分子-1（Intercellular adhesion molecule,ICAM-1）及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表達(dá)的影響。方法:1.hUCMSCs來(lái)源的外泌體的提取和鑒定。應(yīng)用低溫梯度超速離心法分離hUCMSCs培養(yǎng)液,獲得上清液中的外泌體,通過(guò)應(yīng)用蛋白免疫印記法（Western blot,WB）來(lái)檢測(cè)泌體表面蛋白CD63、hUCMSCs表面蛋白CD90的表達(dá)以鑒定外泌體來(lái)源。2.ARPE-19細(xì)胞高糖損傷模型的建立。取生長(zhǎng)良好的ARPE-19細(xì)胞,以不同濃度葡萄糖培養(yǎng),隨機(jī)分為五組,1組對(duì)照組:5.5 mmol/L,2組:20.0mmol/L;3組:35.0 mmol/L:4組:50.0mmol/L;5組高滲組:5.5mmol/L+甘露醇24.4m... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

電鏡下觀察到hUCMSCs外泌體透射電鏡下可見：hUCMSCs來(lái)源外泌體為直徑在30～100nm之間圓形或橢圓形具有明顯膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，囊泡腔內(nèi)可見低電子密度成分

體的形態(tài)學(xué)觀察透射電鏡下可見hUCMSCs來(lái)源外泌體有明顯膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，囊泡腔內(nèi)可UCMSCs 外泌體 透射電鏡下可見：hUCM橢圓形具有明顯膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，囊泡腔內(nèi)t 檢測(cè) hUCMSCs 外泌體的表面特異性蛋 Western-blot 檢測(cè) hUCMSCs 外泌體SCs 特異性表面蛋白 CD90（圖 1.4），SCs 來(lái)源。

糖濃度培養(yǎng)下的 ARPE-19 細(xì)胞形態(tài)組：葡萄糖濃度 5.5 mmol／L； B:2 組：葡萄糖濃度：2：35.0 mmol／L：D:4 組：葡萄糖濃度：50.0mmol／L；.5mmol／L+甘露醇 24.4mmol／L。測(cè)不同濃度葡萄糖下 ARPE-19 細(xì)胞增殖能力葡萄糖對(duì) ARPE-19 細(xì)胞增殖率的影響。1 組對(duì)照著葡萄糖濃度的增加，各組增值率均有下降。5 增殖率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表 2.1 不同濃度葡萄糖對(duì) ARPE-19 細(xì)胞增殖的影響較，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義照組 2 組 3 組 4 組 1.68 13.7±1.43* 11.8±1.54* 6.9±0

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomes ameliorate blue light stimulation in retinal pigment epithelium cells and retinal laser injury by VEGF-dependent mechanism[J]. Guang-Hui He,Wei Zhang,Ying-Xue Ma,Jing Yang,Li Chen,Jian Song,Song Chen.  International Journal of Ophthalmology. 2018(04)
[2]間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J]. 張惟,陳松.  中華眼底病雜志. 2016 (02)
[3]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[4]糖尿病鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞間黏附分子-1的表達(dá)與血視網(wǎng)膜屏障破壞的關(guān)系及曲安奈德的治療作用[J]. 王樹林,金學(xué)民.  中華眼底病雜志. 2006(01)



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