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siRNA沉默S100A8與S100A9基因?qū)Ρ茄拾┘毎鸆NE1遷移功能的影響

發(fā)布時間:2021-05-10 10:42
  本論文包括兩個部分:(一)siRNA對鼻咽癌細胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達的影響及有效片段的篩選;(二)S100A8 siRNA與S100A9siRNA對鼻咽癌細胞CNE1遷移功能的影響。第一部分:siRNA對鼻咽癌細胞CNEl中S100A8、S100A9基因表達的影響及有效片段的篩選目的:通過將S100A8 siRNA、S100A9 siR NA分別轉(zhuǎn)染鼻咽癌細胞CNE1后,觀察S100A8、S100A9基因的表達水平變化以分別篩選有效片段。方法:1.分別合成三對S100A8 siRNA、S100A9 siRNA,分別標記為:S100A8-Homo-286, S100A8-Homo-324, S100A8-Homo-374; S100A9-Homo-61, S100A9-Homo-100, S100A9-Homo-267,利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000瞬時轉(zhuǎn)染鼻咽癌細胞CNE1。采用標記有熒光的陰性對照FAM-siRNA在熒光顯微鏡下檢測轉(zhuǎn)染效率;2.轉(zhuǎn)染24 h后,通過熒光定量PCR分別檢測S100A8、S100A9的相對表達水平,分別篩選出干擾效... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
個人簡歷
英文縮略語表
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 siRNA對鼻咽癌細胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達的影響及有效片段的篩選
    1 實驗材料
        1.1 細胞系
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 細胞的培養(yǎng)
        2.2 siRNA干擾片段的設(shè)計與合成
        2.3 實驗設(shè)計
        2.4 鼻咽癌細胞的轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化
        2.5 檢測siRNA對鼻咽癌細胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達的影響
        2.6 統(tǒng)計學處理
    3 實驗結(jié)果
        3.1 鼻咽癌細胞siRNA的轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化
        3.2 S100A8、S100A9基因的相對表達情況
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對鼻咽癌細胞CNE1遷移功能的影響
    1 實驗材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 實驗設(shè)計
        2.2 劃痕愈合實驗檢測細胞遷移功能
        2.3 熒光定量PCR法檢測MMP7基因的表達情況
    3 結(jié)果
        3.1 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對細胞遷移功能的作用
        3.2 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對MMP7表達的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻
第三部分 課題綜述S100A8與S100A9蛋白在惡性腫瘤中的作用
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文


【參考文獻】:
期刊論文
[1]鼻咽癌患者血漿中S100A8和S100A9蛋白濃度測定及臨床意義[J]. 韓冉冉,黃元姣,陳鈴,肖曉蘭,易翔,蔡紅武,吳勇滸.  臨床檢驗雜志. 2014(04)
[2]鼻咽癌伴區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)移規(guī)律及治療現(xiàn)狀[J]. 馬巖,孫磊,王立瑩,于雷,邱玲,賈曉晶.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2013(09)
[3]鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標志物的研究進展[J]. 鄧彥君,朱建思,張志偉,唐微,盧小敏.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2013(08)
[4]Loss of myeloid-related proteins 8 and myeloid-related proteins 14 expression in human esophageal squamous cell carcinoma correlates with poor differentiation[J]. Jian-Ping Kong Fang Ding Chuan-Nong Zhou Xiu-Qin Wang Xiao-Ping Miao Min Wu Zhi-Hua Liu National Laboratory of Molecular Oncology,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,ChinaDepartment of Etiology and Carcinogenesis,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(08)



本文編號:3179226

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